System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用制造技术_技高网

绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用制造技术

技术编号:40043381 阅读:13 留言:0更新日期:2024-01-16 20:04
本发明专利技术涉及绒山羊繁育功能基因技术领域,具体为绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,包括:绒山羊血样采集:所述采血5mL于山羊颈静脉,置于‑20℃含EDTA的抗凝血管中保存,DNA提取:所述取1毫升全血,在离心管中离心(5000rpm,5min),加入相同量的PBS,摇匀,放置5‑10min,丢弃上清液。本发明专利技术为推进辽宁绒山羊选育,提高绒山羊产羔数量提供更多数据基础,对SNP位点进行遗传多样性分析,并与生产性能进行相关性分析,确定影响产羔性状的基因型及单倍型组合,为辽宁绒山羊的选育提供参考。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及绒山羊繁育功能基因,具体为绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用。


技术介绍

1、研究辽宁绒山羊的产羔性状具有重要意义。山羊的产羔性状虽然是低遗传力性状,但其遗传基础最终还是由基因决定的。有些基因突变会引起排卵率和产仔数的变化。

2、随着人们生活水平的提高,对羊肉、羊毛等需求量不断提高,因此,提高山羊产羔数量是亟需解决的问题,目前的研究指出inha、rarg、pgr基因可能与繁殖性能有关,单核苷酸多态性(snp)作为一种分子标记技术,具有密度高、代表性强、遗传稳定性好、分析自动化程度高的特点,它可以在被研究基因附近或内部提供一系列标记,蛋白的结构和表达水平可能直接受到基因中某些snp的影响,从而改变动物体内某些性状的表达,目前虽然有研究证明inha、rarg、pgr基因可能调控产羔数量,但对产羔性状的影响尚不明确。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,以解决上述
技术介绍
中提出的目前虽然有研究证明inha、rarg、pgr基因可能调控产羔数量,但对产羔性状的影响尚不明确的问题。

2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案,绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,包括:

3、绒山羊血样采集:

4、所述采血5ml于山羊颈静脉,置于-20℃含edta的抗凝血管中保存。

5、dna提取:

6、所述取1毫升全血,在离心管中离心(5000rpm,5min),加入相同量的pbs,摇匀,放置5-10min,丢弃上清液,保留沉淀液,反复洗涤三次,将450ml的细胞裂解液和6ml的蛋白酶k加入到水浴中,放置4小时(55-66℃),使用恒定体积的苯酚:氯仿(25:24)提取液体2次(12000rpm,5min),双体积无水乙醇沉淀法(20℃,30min),当发生絮凝沉淀(12000rpm,5min)时,弃上清液,用800ml70%乙醇(12000rpm,3min)清洗沉淀,弃上清液干燥,然后用紫外分光光度法测定od值,计算值为od260/od280,最后加入50mlte缓冲液溶解,-20℃保存。

7、产羔性能数据:

8、所述绒山羊的产羔数据由畜牧科学研究院进行采集与统计分析。

9、引物设计:

10、所述通过ncbi数据库查找山羊inha、rarg、pgr基因序列,用primerpremier5软件对其进行特异性引物设计,并生工合成引物。

11、产物扩增:

12、所述pcr反应体系的容量为50μl,按照pcr反应体系过程完成产物扩增。

13、优选的,所述混匀的5ul产物和1ul样品缓冲液内加入5ulmarker作为对照,电泳条件设置为120v,180w,15-20min,电泳结束之后观察是否存在靶基因条带,若存在将产物测序。

14、优选的,所述使用ezup柱式血液基因组dna抽提试剂盒提取绒山羊血液中的dna。

15、优选的,所述pcr产物扩增结束以后选择电泳出的目的条带单一、清晰的片段,将测序结果与inha、rarg、pgr基因序列比对,共发现6个突变位点,分别为inha基因上的g144a和t504c,rarg基因上的a56g、g144a、g490c,pgr基因上的g109519t。

16、优选的,所述inha、rarg、pgr基因的6个位点中inha的g144a、t504c、rarg的g144a、g490c位点替代效果相对较好。

17、优选的,所述inha基因g144a的aa基因型、t504c位点的tt基因型,rarg基因a56g的gg基因型、g144a和g490c的gg基因型,pgr基因g109519t的gg基因型产羔性能更好。

18、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:

19、1、通过对inha、rarg、pgr基因的snp分析,找到了影响辽宁绒山羊产羔性状的基因型(inha基因g144a的aa基因型、t504c位点的tt基因型,rarg基因a56g的gg基因型、g144a和g490c的gg基因型,pgr基因g109519t的gg基因型),单倍型(rarg基因的g144a和inha的t504c的单倍型组合agtt和aact),为推进辽宁绒山羊选育,提高绒山羊产羔数量提供更多数据基础。

20、2、利用snp对辽宁绒山羊产羔性状基因inha、rarg、pgr进行基因分型,找到snp位点,对snp位点进行遗传多样性分析,并与生产性能进行相关性分析,确定影响产羔性状的基因型及单倍型组合,为辽宁绒山羊的选育提供参考。

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【技术保护点】

1.绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于:所述混匀的5uL产物和1uL样品缓冲液内加入5uLMarker作为对照,电泳条件设置为120V,180W,

3.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于:所述使用Ezup柱式血液基因组DNA抽提试剂盒提取绒山羊血液中的DNA。

4.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于:所述PCR产物扩增结束以后选择电泳出的目的条带单一、清晰的片段,将测序结果与INHA、RARG、PGR基因序列比对,共发现6个突变位点,分别为INHA基因上的G144A和T504C,RARG基因上的A56G、G144A、G490C,PGR基因上的G109519T。

5.根据权利要求4所述的绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于:所述INHA、RARG、PGR基因的6个位点中INHA的G144A、T504C、RARG的G144A、G490C位点替代效果相对较好。

6.根据权利要求4所述的绒山羊高繁基因INHA,RARG和PGR的分型应用,其特征在于:所述INHA基因G144A的AA基因型、T504C位点的TT基因型,RARG基因A56G的GG基因型、G144A和G490C的GG基因型,PGR基因G109519T的GG基因型产羔性能更好。

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【技术特征摘要】

1.绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,其特征在于:所述混匀的5ul产物和1ul样品缓冲液内加入5ulmarker作为对照,电泳条件设置为120v,180w,

3.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,其特征在于:所述使用ezup柱式血液基因组dna抽提试剂盒提取绒山羊血液中的dna。

4.根据权利要求1所述的绒山羊高繁基因inha,rarg和pgr的分型应用,其特征在于:所述pcr产物扩增结束以后选择电泳出的目的条带单一、清晰的片段,将测序结果与inha、rarg、pgr基因序列比对,共...

【专利技术属性】
技术研发人员:王泽英陈芮孔令超潘媛孙迎港吴彦智乔艳军李茜汪小微张秋李帅彤李思沂刘一宁刘庆坤侯思冰李嘉琪
申请(专利权)人:沈阳农业大学
类型:发明
国别省市:

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