【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物提取，具体涉及一种山慈菇中二酸苄酯苷类和芪类化合物的提取方法及其应用。
技术介绍
1、山慈菇为兰科植物杜鹃兰cremastra appendiculata(d.don)makino、独蒜兰pleione bulbocodioides(franch.)rolfe或者云南独蒜兰pleione yunnanensis rolfe的干燥假鳞茎。其味甘、微辛，性凉，归肝、脾经，具有清热解毒、化痰散结，善消燥痰等功效，可治疗瘰疬痰核、癥瘕痞块等。20世纪末，国内外学者开始研究山慈菇的化学成分和药理作用，发现其在抗肿瘤、抗氧化、抗菌、降血糖、神经保护等方面均有疗效。其中dactylorhina、militarine和山药素iii是山慈菇含量较高的成分，dactylorhin a、militarine属于二酸苄酯苷类，具有较好的抗炎作用。山药素iii是一种芪类化合物，可以通过抑制上皮-间充质转化(emt)和fak-akt信号抑制癌症的迁移和侵袭，具有较好的抗癌活性。此外，研究发现山慈菇提取物具有较好抗氧化活性。
2、目前，对山慈菇中活性成分的提取制备工艺研究比较有限，主要集中于总黄酮、总酚酸及多糖类成分，采用最频繁的方法为加热回流提取法，该提取工艺较为成熟，但在山慈菇提取中存在一些不足，如提取时间、温度等没有最佳条件。同时，山慈菇中丁二酸苄酯苷和芪类活性成分的提取工艺研究较少。因此，我们以上述3种成分含量和提取率为综合指标对山慈菇回流提取工艺进行研究，并探究其提取物的抗氧化活性和其对人乳腺癌mda-mb-231细胞
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种山慈菇中二酸苄酯苷类和芪类化合物的提取方法及其应用。
2、本专利技术的目的可以通过以下方案来实现：
3、本专利技术提供了一种山慈菇中二酸苄酯苷类和芪类化合物的提取方法，包括如下步骤：
4、s1、取山慈菇，粉碎过筛，得山慈菇粉末；
5、s2、将山慈菇粉末以乙醇为提取溶剂，进行加热回流提取，抽滤，减压浓缩，冷冻干燥，最后制得浸膏，即山慈菇提取物。
6、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s1中，粉碎过筛是过40-80目筛。所述山慈菇为云南独蒜兰假鳞茎部位，粉碎前干燥处理。
7、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所述乙醇的质量浓度为70％-90％，优选为78-83％。
8、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所述山慈菇末与乙醇的料液比1g：6-10l，优选为1g：8-8.5l。
9、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所述加热回流提取的温度为70-90℃，优选为83-86℃。
10、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所述加热回流提取的时间为3-5h，优选为3.5-3.9h。
11、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，山慈菇的最佳回流提取工艺为：乙醇浓度为80.79％，提取时间为3.73h，提取温度为84.58℃，料液比为1:8.37。
12、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所述二酸苄酯苷类和芪类化合物包括dactylorhin a、militarine和山药素iii。
13、作为本专利技术的一个实施方式，步骤s2中，所得浸膏经萃取，得山慈菇提取物；具体为：
14、将所得乙醇提取物浸膏用纯水溶解，用石油醚萃取，再将萃取液减压浓缩，冷冻干燥，得到石油醚提取物浸膏。
15、或，将所得乙醇提取物浸膏用纯水溶解，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，再将每个部位的萃取液减压浓缩，冷冻干燥，分别得到石油醚部位提取物浸膏、二氯甲烷部位提取物浸膏、乙酸乙酯部位提取物浸膏和正丁醇部位浸膏。石油醚部位提取物浸膏效果最佳。
16、乙醇提取物浸膏、纯水用量比为10g：250-300ml，石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇每次萃取时的用量均为300-400ml；减压浓缩至20-30ml，冷冻干燥的温度为-50～-60℃。各萃取液每次萃取时，萃取3-6次，直至萃取液无色。
17、本专利技术还提供了一种所述山慈菇提取物作为抗氧化剂在制备保健品、护肤品中的应用。
18、本专利技术还提供了一种所述山慈菇提取物在制备人乳腺癌药物中的应用。
19、作为本专利技术的一个实施方式，所述应用中，所述山慈菇提取物还经过石油醚萃取、减压浓缩、冷冻干燥处理，得到石油醚提取物浸膏。萃取具体为：将山慈菇提取物(浸膏)经稀释，使用石油醚萃取3-6次，直至萃取液无色。稀释是将浸膏、纯水按照10g：250-300ml的比例稀释；每次萃取，石油醚的用量为石300-400ml。石油醚萃取物还经减压浓缩至20-30ml，冷冻干燥的温度为-50～-60℃。
20、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
21、(1)通过本专利技术的提取方法可在较为短暂的时间范围里提取出较多的有效成分。
22、(2)通过本专利技术的液相方法可明显区分山慈菇中的有效成分并计算其含量。
23、(3)提取物可作为抗氧化剂制备保健品，护肤品，营养补充剂等。
24、(4)提取物经过萃取后可发现其部位提取物对乳腺癌细胞有较好的抑制效果。
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1.一种山慈菇中二酸苄酯苷类和芪类化合物的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：将山慈菇粉末以乙醇为提取溶剂，进行加热回流提取，抽滤，减压浓缩，冷冻干燥，最后制得浸膏，即山慈菇提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述山慈菇粉末是将山慈菇粉碎过40-80目筛，得山慈菇粉末。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述乙醇的质量浓度为70％-90％。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述山慈菇末与乙醇的料液比1g：8-10L。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述加热回流提取的温度为70-90℃。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述加热回流提取的时间为3-4h。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述二酸苄酯苷类和芪类化合物包括dactylorhin A、militarine和山药素III。
8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所得浸膏经萃取，得山慈菇提取物；具体为将所得乙醇提取物浸膏用纯水溶解，用石油醚萃取，
9.一种如权利要求1所述的提取方法得到的山慈菇提取物作为抗氧化剂在制备保健品、护肤品中的应用。
10.一种如权利要求1所述的提取方法得到的山慈菇提取物在制备人乳腺癌药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种山慈菇中二酸苄酯苷类和芪类化合物的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：将山慈菇粉末以乙醇为提取溶剂，进行加热回流提取，抽滤，减压浓缩，冷冻干燥，最后制得浸膏，即山慈菇提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述山慈菇粉末是将山慈菇粉碎过40-80目筛，得山慈菇粉末。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述乙醇的质量浓度为70％-90％。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述山慈菇末与乙醇的料液比1g：8-10l。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述加热回流提取的温度为70-90℃。
6.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨东风，夏雨婷，梁宗锁，吴梅，陈子林，邓惠敏，徐忠玉，傅杨群，
申请(专利权)人：浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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