【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段及应用。
技术介绍
1、采用嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，car）修饰t细胞的过继性免疫疗法在1989年被gideon gross和zelig eshhar等人首次提出，回输患者体内的car-t细胞可以直接特异性识别抗原而不需要依赖于i型主要组织相容性复合体，所以一直备受关注。但第一代car-t细胞只包含识别抗原的单链可变区域(scfv)和胞内信号域cd3ζ，不能被完全激活，很容易耗竭，无法发挥杀伤作用。因为激活t细胞需要两个信号，一是通过tcr对抗原肽-mhc复合体的识别实现，由cd3的zeta链具体实施，二是经由cd28-b7通路提供第二个刺激信号。所以随后car在scfv下游加入共刺激域（cd28、ox40、4-1bb等）后疗效达到质的突破，成为最经典的car结构，打开免疫疗法的新篇章“真正的活性药物”，让治愈血液瘤成为现实。其中最为典型的案例是患有复发难治性白血病的艾米丽·怀特海德（emilywhitehead），她是第一位接受试验性car-t疗法的儿童患者，治疗后不久体内癌细胞竟然完全消失，今年已是健康成长的第十年。除此之外更多癌症免疫治疗的成功康复病例使得2013年成为了人类对抗癌症的历史转折点。
2、b细胞成熟抗原（bcma）是一种跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子tnf受体超家族，表达于浆细胞和少部分b细胞，参与多发性骨髓瘤（mm）的病理生理过程，采用嵌合抗原t细胞靶向bcma治疗多发
3、但是，car-t治疗mm易复发是个不容忽视的问题。据报道，抗bcma car-t (bb2121)治疗mm ，15名完全缓解的患者中有6人复发。一项双表位bcma-car的探索实验中，8例患者达到严格缓解后有6例复发。这与car-t细胞的持久性紧密相连。car-t细胞的持久性越好，病人复发的概率越低。有研究表明car的单链抗体的来源，可能对car的长期存续具有一定的影响。现绝大多数scfv均来源于小鼠，而从鼠杂交瘤中获得的单克隆抗体 (mab) 被发现在人类中具有免疫原性，加速药物清除效率，导致低效力。同时还会产生抗药抗体，表现出全身炎症反应，导致严重的生理并发症。因此，全人源的car抗体或者是人源化的抗体在患者体内可能免疫原性更低，抗药抗体（ada）产生浓度更低，更不易发生抗药抗体导致的复发，有助于提高car的安全性和治疗潜力。在一项b-all患者的临床试验中，在car-t细胞输注14天后，19/23(82.6%)患者达到cr/cri, 12/23(52.2%)患者达到cr, 18(78.3%)患者mrd阴性。其余4例患者被评价为nr，其中1例nr患者在灌注抗cd22 car-t细胞2个月后达到cr。另一项类似的临床试验能够评估所有10例纳入研究的r/r all患者的反应，并且所有患者都达到了cr; 其中6人在没有进一步治疗的情况下保持cr状态超过18个月。在大多数患者中观察到人化car-t细胞的长期坚持。虽然人源化car-t细胞的主要结果与小鼠car-t细胞表现出相似的反应率，但人源化car-t细胞似乎通过比小鼠car-t细胞持续更长的时间来提供更大的长期利益。
技术实现思路
1、为了避免鼠源等异种生物来源的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段在疾病治疗过程中对人体带来的危害，本专利技术将其框架区进行了人源化改造，获得了一种人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段，具体方案如下：
2、一种人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段，包含：
3、a1) 氨基酸序列为seq id no: 10的5ies-vh和氨基酸序列为seq id no: 19的5ies-vl；或
4、a2) 氨基酸序列为seq id no: 11的6al5-vh和氨基酸序列为seq id no: 20的6al5-vl；或
5、a3) 氨基酸序列为seq id no: 12的3na9-vh和氨基酸序列为seq id no: 21的3na9-vl；或
6、a4) 氨基酸序列为seq id no: 13的6fy3-vh和氨基酸序列为seq id no: 22的6fy3-vl；或
7、a5) 氨基酸序列为seq id no: 14的5ob5-vh和氨基酸序列为seq id no: 23的5ob5-vl；或
8、a6) 氨基酸序列为seq id no: 15的4fqq -vh和氨基酸序列为seq id no: 24的4fqq -vl；或
9、a7) 氨基酸序列为seq id no: 16的5wca -vh和氨基酸序列为seq id no: 25的5wca -vl；或
10、a8) 氨基酸序列为seq id no: 17的5wuv -vh和氨基酸序列为seq id no: 26的5wuv -vl；或
11、a9) 氨基酸序列为seq id no: 18的1jps -vh和氨基酸序列为seq id no: 27的1jps -vl；
12、所述人源化的结合bcma的抗体是多克隆抗体或抗bcma单克隆抗体；
13、所述人源化的bcma抗原结合片段是：
14、b1) 单链fv；或
15、b2) 二硫键连接的fv；或
16、b3) fab片段；或
17、b4) f(ab’)片段；或
18、b5) 一种由vl结构域、vh结构域、cl结构域和ch1结构域组成的单价片段；或
19、b6) f(ab)2片段，一种包含由二硫键在铰链区连接的两个fab片段的二价片段；或
20、b7) 由抗体单臂的vl结构域和vh结构域组成的fv片段。
21、5ies-vh和5ies-vl通过连接子（linker）连接组成5ies；6al5-vh和6al5-vl通过连接子连接组成6al5；3na9-vh和3na9-vl通过连接子连接组成3na9；6fy3-vh和6fy3-vl通过连接子连接组成6fy3；5ob5-vh和5ob5-vl通过连接子连接组成5ob5；4fqq-vh和4fqq-vl通过连接子连接组成4fqq；5wca-vh和5wca-vl通过连接子连接组成5wca；5wuv -vh和5wuv -vl通过连接子连接组成5wuv；1jps -vh和1jps -vl通过连接子连接组成1jps本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种人源化的结合BCMA的抗体或BCMA抗原结合片段，其特征在于，包含：
2.根据权利要求1所述的人源化的结合BCMA的抗体或BCMA抗原结合片段，其特征在于，所述人源化的BCMA抗原结合片段是单链Fv，即人源化抗BCMA scFv，所述人源化抗BCMAscFv包含：
3.核酸，其特征在于，编码根据权利要求1或2所述的人源化的结合BCMA的抗体或BCMA抗原结合片段。
4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，包含：
5.载体，其特征在于，包含根据权利要求3或4所述的核酸。
6.宿主细胞，其特征在于，包含根据权利要求3或4所述的核酸或者根据权利要求5所述的载体。
7.用于产生抗体或抗原结合片段的方法，其特征在于，培养根据权利要求6所述的宿主细胞并从培养物回收所述抗体或抗原结合片段。
8.一种抗BCMA CAR，其特征在于，包含抗BCMA scFv；所述抗BCMA scFv为根据权利要求1所述人源化的BCMA抗原结合片段；所述人源化的BCMA抗原结合片段是单链Fv。
9.抗BCMA
10.根据权利要1所述的人源化的结合BCMA的抗体或BCMA抗原结合片段，或根据权利要求3所述的核酸，或根据权利要求5所述的载体，或根据权利要求6所述的宿主细胞，或根据权利要求8所述的抗BCMA CAR，或根据权利要求9所述的抗BCMA CAR-T或抗BCMA CAR-NK或抗BCMA CAR-M在制备抗肿瘤药物或抗炎药物中的应用。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为BCMA阳性的霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤等血液瘤，由BCMA与APRIL结合介导的肿瘤细胞增殖的肝癌、卵巢癌、神经系统胶质瘤；所述抗炎药物针对的疾病是自身免疫性疾病。
...【技术特征摘要】
1.一种人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段，其特征在于，包含：
2.根据权利要求1所述的人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段，其特征在于，所述人源化的bcma抗原结合片段是单链fv，即人源化抗bcma scfv，所述人源化抗bcmascfv包含：
3.核酸，其特征在于，编码根据权利要求1或2所述的人源化的结合bcma的抗体或bcma抗原结合片段。
4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，包含：
5.载体，其特征在于，包含根据权利要求3或4所述的核酸。
6.宿主细胞，其特征在于，包含根据权利要求3或4所述的核酸或者根据权利要求5所述的载体。
7.用于产生抗体或抗原结合片段的方法，其特征在于，培养根据权利要求6所述的宿主细胞并从培养物回收所述抗体或抗原结合片段。
8.一种抗bcma car，其特征在于，包含抗bcma scfv；所述抗bcma scf...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶晶，徐南，朱红佳，谭靖雯，李明昊，康立清，余宙，
申请(专利权)人：上海优卡迪生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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