【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖及其制备方法与用途，属于食品及医药。
技术介绍
1、当机体受到异源性物质的侵袭时，免疫系统被激活——识别和攻击非己的外源性物质，诱发免疫应答反应，以达到清除目的。然而，免疫应答过激亦会引起炎症反应，通常伴随着血管扩张、通透性增加等现象，导致局部组织及细胞损伤，免疫物质和凝血因子外流，环氧合酶cox2被激活，炎症反应加剧，进一步加速细胞衰老和凋亡。
2、临床应用的抗炎药物包括非甾体类抗炎药物和甾体类抗炎药物。非甾体类抗炎药包括非选择性环氧酶抑制剂和选择性环氧酶-2抑制药，甾体类抗炎药物主要为糖皮质类激素类药物。但是，这些抗炎类药物通常伴随一些副作用，如胃肠道不适及溃疡、过敏反应、向心性肥胖、水钠潴留等，加重肝脏、肾脏代谢负担，长期使用会造成器官损伤。因此，寻找一种副作用和毒副反应小的天然抗炎活性物质尤为重要。研究表明，食用真菌是多糖的主要来源之一，天然真菌多糖具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化及抗肿瘤等，因毒性低、生物相容性好，活性多糖已成为天然药物与保健品领域的研发热点。
3、裂褶菌(schizophyllum commune fr.)又称白参、树花、白花等，是裂褶菌科、裂褶菌属的大型真菌。裂褶菌为食药两用菌，其肉质柔软细嫩，含有丰富的氨基酸和人体必需的微量元素，具有重要的食用和药用价值，中医理论认为，其性平，具有滋补、镇静作用。采用液体深层发酵技术获得的裂裥菌素(spg)具有免疫调节、抗肿瘤等功效，已实现商品化生产。本专利技术首次发现的裂褶菌子实体多糖具有优
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供一种具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖及其制备方法与用途。
2、本专利技术为实现目的，采用如下技术方案：
3、本专利技术首先提供了一种具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖，其分子量为1.84×104da，糖含量为96.41％±2.12，紫外全波长扫描显示其不含蛋白，红外光谱显示其具有显著的多糖红外特征吸收峰，其单糖组成摩尔比为甘露糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：岩藻糖＝9.057：9.633：9.631：1.561：1。
4、本专利技术还提供了所述具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖的制备方法，包括如下步骤：
5、(1)将干燥的裂褶菌子实体经粉碎机粉碎后过80目筛，得粉料；
6、(2)将所得粉料按料液比1:10-50在温度60-100℃下热水浸提1-4h，重复2-3次，合并提取液；
7、(3)将步骤(2)所得提取液旋蒸浓缩至体积的1/4-1/10，向所得浓缩液中加入乙醇至乙醇最终的体积浓度为60-90％，然后4℃醇沉，静置8-12h，收集沉淀；
8、(4)将步骤(3)所得沉淀用水溶解，旋蒸除去乙醇并继续旋蒸浓缩，获得糖溶液；使用sevag法去除糖溶液中的蛋白：将糖溶液、正丁醇和三氯甲烷按体积比为5:1～4:1～4混合均匀，震荡，静置分层后除去蛋白层，重复至无蛋白层出现；
9、将剩余糖溶液装入截留分子量为3kda-5kda的透析袋中透析，流水透析24-48h，静水透析48h，浓缩后冷冻干燥得裂褶菌子实体粗多糖；
10、(5)将步骤(4)获得的裂褶菌子实体粗多糖用去离子水配成20-40mg/ml的溶液，离心去除不溶性杂质，经0.22μm滤膜过滤后，截留溶液置于deae-cellulose 52离子交换柱中进行洗脱，以去离子水作为流动相，流速为0.5-1.2ml/min，收集产物，冷冻干燥；
11、(6)将步骤(5)所得干燥产物用去离子水配成50-80mg/ml的溶液，离心去除不溶性杂质，经0.22μm滤膜过滤后，置于cl-4b分子筛中洗脱，采用自动收集器分管收集，流速为0.5-1.2ml/min，8min/管，收集产物，冷冻干燥，获得多管干燥产物；
12、(7)将步骤(6)所获得的多管干燥产物分别用去离子水配制成3-5mg/ml的溶液，经过0.22μm滤膜过滤后，用高效液相tsk-6000进行检测，流动相为水，流速为0.6ml/min，进样量为20μl，检测得到峰型均一对称的目标产物裂褶菌子实体多糖。
13、本专利技术还公开了所述裂褶菌子实体多糖的用途，其特点在于：用于作为抗炎活性剂，制备抗炎保健类食品或抗炎药品。
14、本专利技术的有益效果体现在：
15、1、本专利技术制备的裂褶菌子实体多糖经高效液相色谱(hplc)检测，其峰型均一对称，分子量为1.84×104da，糖含量为96.41％±2.12，单糖组成摩尔比为甘露糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：岩藻糖＝9.057：9.633：9.631：1.561：1，是一种纯度较高的天然活性多糖。
16、2、本专利技术发现的裂褶菌子实体多糖具有优异的抗炎活性：体外抗炎表明其对lps诱导raw264.7巨噬细胞的细胞炎症具有缓解作用，对正常细胞无毒性，且随着多糖浓度增加，抗炎作用增强并呈现剂量依赖性，说明裂褶菌子实体多糖对细胞炎症具有重要的缓解作用。同时，体内实验证实其对dss诱导的uc小鼠具有显著的治疗作用。目前尚未有关于裂褶菌子实体多糖的抗炎活性报道，因此其体内外抗炎特性具有重要的开发和利用前景。
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1.一种具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖分子量为1.87×104Da。
2.根据权利要求1所述的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖的糖含量为96.41％±2.12。
3.根据权利要求1所述的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖的单糖组成摩尔比为甘露糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：岩藻糖＝9.057：9.633：9.631：1.561：1。
4.一种权利要求1～3中任意一项所述的具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，向所得浓缩液中加入乙醇至乙醇最终的体积浓度为60-90％。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，糖溶液，正丁醇和三氯甲烷的体积比为5:1～4:1～4。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，透析时使用的透析袋中的截留分子量为3kDa-5kDa，流水透析24-48h，静水透析48h，。
8.根据
9.一种权利要求1～3中任意一项所述具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖的用途，其特征在于：用于制备抗炎活性剂。
...【技术特征摘要】
1.一种具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖分子量为1.87×104da。
2.根据权利要求1所述的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖的糖含量为96.41％±2.12。
3.根据权利要求1所述的裂褶菌子实体多糖，其特征在于：所述裂褶菌子实体多糖的单糖组成摩尔比为甘露糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：岩藻糖＝9.057：9.633：9.631：1.561：1。
4.一种权利要求1～3中任意一项所述的具有抗炎活性的裂褶菌子实体多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，向所得浓缩液中加...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴庆喜，王静，吴迎超，杨增燕，马莹莹，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：
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