【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物应用，具体涉及枯草芽孢杆菌lm 4-2转化人参芦头中人参皂苷rd的方法及应用。
技术介绍
1、人参芦头是人参的根茎，具有很好的药用价值。人参芦头可以起到诸多药物功效，但主要是升阳举陷。主治：脾虚气陷；久泻；脱肛。主要含有皂苷类成分，以竹节参皂苷ⅲ(chikusetsusaponinⅲ)为主；抗炎，延缓衰老，降血糖。甘，微苦，温；滋补强壮，散瘀止痛，止血祛痰；用于病后虚弱、结核咯血、咳嗽痰多、跌扑损伤。又为兴奋剂和祛痰药。但如今，人们只是把人参芦头作为催吐的药物，导致每年我国大量的人参芦头被丢弃，造成了严重的浪费。
2、人参芦头主要含有人参皂苷、人参多糖、人参酸等成分，具有调节免疫系统、增强体力、改善贫血等功效。从人参芦头中可以分离出ro、rbl、rb2、rc、rd、re、rgl、rg2等多种人参皂苷。其中，人参皂苷rd属于稀有皂苷，但药理活性却优于主要人参皂苷。人参皂苷rd是主要皂苷代谢后在肠道中吸收利用的主要形式之一，对神经系统、心脑血管以及肾功能都具有良好的药理作用。但是人参皂苷rd的含量较低，因此导致药效显著受影响。
3、微生物转化人参皂苷rd是近年来的一个研究方向，但是能有效转化人参皂苷rd的微生物较少。限制了利用微生物转化人参皂苷rd的研究。因此挖掘微生物是否具备转化人参皂苷rd的新功能是研究重点。
技术实现思路
1、为找到利用微生物转化人参皂苷rd的方法，本专利技术提供了枯草芽孢杆菌lm 4-2转化人参芦头中人参皂苷rd的方法
2、本专利技术提供了枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参皂苷rd中的应用，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2于2023年9月20日保藏于中国普通微生物菌种保藏与管理中心，保藏编号为cgmcc1.15213，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis，所述转化是指人参芦头中人参皂苷rd的增加。
3、进一步地，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参芦头为原料进行发酵转化人参皂苷rd。
4、进一步地，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参芦头溶液为原材料，按照菌株接种量5.5-7.5％，发酵温度29-31℃、发酵时间15-25d的条件发酵转化人参皂苷rd。
5、进一步地，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参芦头溶液为原材料，按照菌株接种量7.5％，发酵温度30℃、发酵时间20d的条件发酵转化人参皂苷rd。
6、进一步地，所述人参芦头溶液由人参芦头溶解于无菌水中获得。
7、进一步地，所述人参芦头与水的料液比为1g:2-15ml。
8、进一步地，所述人参芦头与水的用量比为1g:4.3l。
9、本专利技术还提供了枯草芽孢杆菌lm 4-2菌液在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2于2023年9月20日保藏于中国普通微生物菌种保藏与管理中心，保藏编号为cgmcc1.15213，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis。
10、进一步地，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2菌液制备过程为：将枯草芽孢杆菌lm 4-2接种至lb液体培养基中于30℃需氧条件下培养至od600的值为0.8时获得枯草芽孢杆菌lm 4-2菌液。
11、进一步地，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2对人参皂苷rd转化率为562％。
12、本专利技术还提供了一种人参芦头中人参皂苷rd的转化方法，以人参芦头为原料，按照用量比1g：2-15ml溶解于水中，制得人参匀浆，然后按照接种量5.5-7.5％接种枯草芽孢杆菌lm 4-2，在温度29-31℃下发酵15-25d。
13、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
14、1、本研究通过接种枯草芽孢杆菌lm 4-2对人参芦头进行发酵，提高了人参芦头中人参皂苷rd的含量，进而提高人参芦头的药用价值。
15、2、本专利技术通过取人参芦头粉末1g放入三角瓶中，按用量比人参芦头粉末：水＝1g：4.3ml混匀，制成匀浆，得人参匀浆。放入高压蒸汽灭菌锅中在121℃下灭菌30min。将灭菌好的人参匀浆冷却，按照接种量加入7.5％的枯草芽孢杆菌lm 4-2菌液，放入摇床中于30℃、180rp下振荡培养，培养温度为30℃，时间20d，培养结束后获得发酵液。检测发现人参皂苷rd的含量为6.383mg/g，转化率为562％。
16、生物材料保藏信息说明
17、lm 4-2，在本申请中称作枯草芽孢杆菌lm 4-2，已于2023年9月20日保藏于中国普通微生物菌种保藏与管理中心，保藏编号为cgmcc1.15213，保藏单位地址是北京市朝阳区北辰西路一号院三号，邮编：100101，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis。
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1.枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2于2023年9月20日保藏于中国普通微生物菌种保藏与管理中心，保藏编号为CGMCC1.15213，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，所述转化是指人参芦头中人参皂苷Rd的增加。
2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2以人参匀浆为原料进行发酵转化人参皂苷Rd。
3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2以人参匀浆为原材料，按照菌株接种量5.5-7.5％，发酵温度29-31℃、发酵时间15-25d的条件发酵转化人参皂苷Rd。
4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2以人参匀浆为原材料，按照菌株接种量7.5％，发酵温度30℃、发酵时间20d的条件发酵转化人参皂苷Rd。p>
5.根据权利要求4所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述人参匀浆由人参芦头与水按照用量比1g:2-15mL制得。
6.根据权利要求5所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述人参芦头与水的用量比为1g:4.3mL。
7.枯草芽孢杆菌LM 4-2菌液在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2为权利要求1中所述的枯草芽孢杆菌，保藏编号为CGMCC1.15213。
8.根据权利要求7所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2菌液在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2菌液制备过程为：将枯草芽孢杆菌LM 4-2接种至LB液体培养基中于30℃需氧条件下培养至OD600的值为0.8时获得枯草芽孢杆菌LM 4-2菌液。
9.根据权利要求8所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2菌液在转化人参芦头中人参皂苷Rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌LM 4-2对人参皂苷Rd转化率为562％。
10.一种人参芦头中人参皂苷Rd的转化方法，其特征在于，以人参芦头为原料，按照用量比1g：2-15mL溶解于水中，制得人参匀浆，然后按照接种量5.5-7.5％接种权利要求1所述的枯草芽孢杆菌LM 4-2，在温度29-31℃下发酵15-25d。
...【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2于2023年9月20日保藏于中国普通微生物菌种保藏与管理中心，保藏编号为cgmcc1.15213，分类命名为枯草芽孢杆菌bacillus subtilis，所述转化是指人参芦头中人参皂苷rd的增加。
2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参匀浆为原料进行发酵转化人参皂苷rd。
3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参匀浆为原材料，按照菌株接种量5.5-7.5％，发酵温度29-31℃、发酵时间15-25d的条件发酵转化人参皂苷rd。
4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌lm 4-2以人参匀浆为原材料，按照菌株接种量7.5％，发酵温度30℃、发酵时间20d的条件发酵转化人参皂苷rd。
5.根据权利要求4所述的枯草芽孢杆菌lm 4-2在转化人参芦头中人参皂苷rd中的应用，其特征在于，所述人参匀浆由人...
【专利技术属性】
技术研发人员：尤晓颜，李亚春，韩静，布青云，汪伦记，孙晓菲，张红梅，段续，任广跃，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：
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