【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于兽医微生物，具体涉及猪肺炎支原体rt02株、疫苗组合物及其应用。
技术介绍
1、猪喘气病(mycoplasma pneumonia of swine，mps)，又称猪地方流行性肺炎(enzootic pneumonia of pig)。它是猪的一种呼吸道飞沫性传染病，临床症状表现为咳嗽和气喘，病情加剧时呼吸喘促，肷肋煽动，张嘴呼吸。病变特点为融和性支气管肺炎，在尖叶、心叶、中间叶和膈叶外缘呈“肉样”或“胰样”实质变。该病存在于世界各地，其死亡率虽然不高，但由于流行的广泛性、长期性和消耗性，可使饲料转化率降低，并引起猪的多种并发病，是造成养猪业经济损失的最重要的疾病之一。
2、疫苗免疫是猪支原体肺炎的主要防制措施，目前商品化疫苗应用广泛，对防控mps起到积极作用。目前使用较为广泛的疫苗主要是灭活疫苗。然而，市面上虽然有很多利用猪肺炎支原体株开发成灭活疫苗的产品，仍存在疫苗免疫效果不佳等问题。
技术实现思路
1、为解决现有技术中存在的上述问题，本专利技术提供猪肺炎支原体rt02株、疫苗组合物及其应用。该株是由本专利技术人自行分离得到，具有较好的免疫原性，其对仔猪的平均肺炎病变减少率可达84％。
2、在第一方面，本专利技术提供了一株猪肺炎支原体rt02株。
3、所述猪肺炎支原体rt02株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2023年08月17日，保藏编号为cgmcc no. 26673。
4、在一些实施
5、在一些实施方案中，所述猪鼻支原体高免血清的制备方法为将猪鼻支原体菌株atcc 17981接种于pplo液体培养基中，于37℃培养24~36h收获，加入终浓度0.2wt%甲醛溶液，于37℃灭活24h后，加入等质量佐剂制成疫苗，分四次，每次间隔7天，每次0.5ml/只，免疫0.8~1.5kg健康成年兔，第四次免疫21天后采集其血清，即为猪鼻支原体高免血清。
6、在一些实施方案中，所述pplo液体培养基的配制方法为取pplo 40g、酵母浸粉20g、葡萄糖10g、0.4%酚红溶液5ml，添加注射用水至1600ml，115℃，20分钟灭菌，灭菌后加入400ml猪血清。
7、较佳地，本专利技术中，猪肺炎支原体rt02株传代至18代后菌种各项检验指标均稳定，并且毒力以及免疫原性仍旧保持与原始菌种相当。根据菌种最高代次相关规定，为了满足生产需要，规定f1~f3代为原始种子代次，f4~f7代为基础种子代次，并且规定实际生产中菌种传代不得超过第15代。
8、在第二方面，本专利技术提供了所述猪肺炎支原体rt02株在制备疫苗组合物中的应用。
9、在第三方面，本专利技术提供了一种疫苗组合物，其包含分离自所述猪肺炎支原体rt02株的抗原。
10、在一些实施方案中，所述抗原为灭活抗原。
11、在一些优选的实施方案中，所述抗原为猪肺炎支原体rt02株f6代基础种子抗原，该f6代基础种子完全符合猪肺炎支原体菌种特性，菌种纯粹。
12、在一些实施方案中，所述灭活抗原的含量为1×107ccu/ml以上，在一些优选的实施方案中，所述灭活抗原的含量为1×108ccu/ml以上，在一些更优选的实施方案中，所述灭活抗原的含量为2×108ccu/ml以上。
13、在一些实施方案中，所述疫苗组合物还包含佐剂。
14、在一些实施方案中，所述佐剂为201佐剂；优选地，所述灭活抗原与所述佐剂的质量比为1:（0.8-1.2）；更优选地，所述灭活抗原与所述佐剂的质量比为1:1。
15、在第四方面，本专利技术提供了所述疫苗组合物的制备方法。
16、所述制备方法包括如下步骤：
17、培养所述猪肺炎支原体rt02株，得到菌液；
18、对所述菌液进行浓缩、纯化、灭活，得到抗原原液；
19、将所述抗原原液与佐剂进行混合处理，得到疫苗组合物。
20、在一些实施方案中，所述灭活包括向所述菌液加入二乙烯亚胺的步骤。
21、在第五方面，本专利技术提供了所述疫苗组合物或所述制备方法制得的疫苗组合物在制备用于预防和/或治疗猪支原体肺炎药物中的应用。
22、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
23、本专利技术分离得到一株猪肺炎支原体rt02株，该菌株具有较好的免疫原性，将其制成疫苗组合物时，对仔猪的平均肺炎病变减少率可达84%，疫苗的防护效果较好，并且，该猪肺炎支原体rt02株在18代以内稳定性较好，具有较好的毒力和免疫原性；同时，该猪肺炎支原体rt02株f6代基础种子在菌种形态、培养特性、特异性等方面符合菌种标准。本专利技术提供的猪肺炎支原体rt02株制备成疫苗组合物时，具有免疫效果好、有效降低使用量的优势，因此，在灭活疫苗的领域中具有较好的应用前景。
24、保藏信息：保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2023年08月17日，保藏编号：cgmcc no.26673，分类命名为猪肺炎支原体( mycoplasma hyopneumoniae)。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1. 猪肺炎支原体RT02株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 26673。
2.权利要求1所述的猪肺炎支原体RT02株在制备疫苗组合物中的应用。
3.一种疫苗组合物，其特征在于，包含分离自权利要求1所述的猪肺炎支原体RT02株的抗原。
4.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述抗原为灭活抗原。
5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其特征在于，所述灭活抗原的含量为1×107CCU/ml以上，优选含量为1×108CCU/ml以上，更优选含量为2×108CCU/ml以上。
6.根据权利要求3-5中任一项所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物还包含佐剂。
7.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其特征在于，所述佐剂为201佐剂。
8.一种疫苗组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述灭活包括向所述菌液加入二乙烯亚胺的步骤。
10.权利要求3-7任一项所述的疫苗组合物，
...【技术特征摘要】
1. 猪肺炎支原体rt02株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 26673。
2.权利要求1所述的猪肺炎支原体rt02株在制备疫苗组合物中的应用。
3.一种疫苗组合物，其特征在于，包含分离自权利要求1所述的猪肺炎支原体rt02株的抗原。
4.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述抗原为灭活抗原。
5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其特征在于，所述灭活抗原的含量为1×107ccu/ml以上，优选含量为1×108ccu/ml以上，更优选含量...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘延钵，王金亮，商云鹏，
申请(专利权)人：北京瑞阳瑞泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。