【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于蜂花粉多糖分离的，具体涉及一种从蜂花粉中分离得到的低分子多糖及其提取工艺。
技术介绍
1、蜂花粉由花粉粒、蜜蜂分泌的少量唾液和植物体内的花蜜组成，含有碳水化合物、蛋白质、氨基酸等丰富的营养物质。因此，在国内外，蜂花粉常被用作人类的膳食补充剂。近年来，有一些关于蜂花粉活性物质及其生物活性的报道。目前，多糖的生物活性受到越来越多的关注。蜂花粉中的多糖具有抗氧化、降血糖和免疫调节等生物活性。多糖的生物活性和结构特性与提取过程密切相关。多糖的提取方法通常包括热水提取、超声或微波辅助提取、酶法提取等。研究表明，不同提取工艺获得的多糖在提取率、单糖组成、分子量、糖苷键及空间结构方面存在显著差异，从而影响它们的抗氧化能力、降血糖能力和免疫活性。目前，关于荷花蜂花粉多糖的微波辅助提取工艺优化及进一步纯化还未见报道，对荷花蜂花粉多糖的生物活性，如抗氧化、降血糖和抗炎能力的信息比较有限，关于荷花蜂花粉的生物活性物质及功效研究相对匮乏，因此，本专利技术提供而另一种多糖的提取纯化工艺，实验初步探究荷花蜂花粉多糖的抗氧化、降血糖和抗炎活性，为荷花蜂花粉多糖的基础研究和应用提供了借鉴。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种从蜂花粉中分离得到的低分子多糖及其提取工艺。
2、本专利技术的
技术实现思路
如下：
3、本专利技术提供了一种从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，所述低分子多糖命名为lbpp-1，其为多糖混合物，其分子量mw为1625da；
4、
5、经紫外光谱分析，所述低分子多糖lbpp-1不含核苷酸或蛋白质杂质；
6、经红外光谱分析，所述低分子多糖lbpp-1为水溶性吡喃糖，具有β-构型；
7、经刚果红法测定，所述低分子多糖lbpp-1存在三股螺旋结构。
8、本专利技术还提供了一种从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，包括如下步骤：
9、1)预处理：取荷花蜂花粉溶于水进行均质处理；
10、2)提取：将处理后的样品进行超声微波反应提取荷花蜂花粉多糖，将所得样液进行减压旋蒸，之后取其上清液，加入无水乙醇，静置；
11、所述超声微波反应的提取时间为20～50min，优选40～50min；
12、所述提取料液比为10～40ml/g，优选为30～40ml/g；
13、所述提取温度为60～90℃，优选为75-90℃；
14、所述微波功率为100-700w，优选为300-500w。
15、3)分离：去除大部分上清液，将剩余少量上清液与沉淀物混匀后离心，弃去上清液，取沉淀经真空冷冻干燥后得到荷花蜂花粉粗多糖；
16、4)纯化a：采用sevag法去除粗多糖中的蛋白；
17、具体为，将蜂花粉花粉粗多糖溶液与除蛋白的有机溶剂(氯仿正丁醇)混合溶液进行混合振摇，使得水相与变形蛋白质层分离；
18、5)纯化b：采用deae-52纤维素离子柱层析分离纯化，包括填料预处理和层析柱平衡；
19、填料预处理：将deae-52纤维素浸泡在去离子水中过夜，使其充分溶胀，用去离子水冲洗3遍，以去除悬浮杂质，用0.5mol/lnaoh溶液浸泡1h，用去离子水反复清洗至中性，再用0.5mol/lhcl溶液浸泡1h，用去离子水反复清洗至中性，抽干，储存于20％乙醇中备用。
20、层析柱平衡：将浸泡在20％乙醇溶液中的deae-52纤维素柱填料取出，用去离子水洗去乙醇后，超声40min去除气泡进行湿法装柱(层析柱规格：26mm×40cm)，平衡2-3个柱床体积。
21、本专利技术的有益效果如下：
22、本专利技术的从蜂花粉中分离出的低分子多糖，其分子量为1625da，主要由阿拉伯糖(ara)、盐酸氨基葡萄糖(glcn)、半乳糖(gal)和葡萄糖(glc)组成，其结构中含有β-构型糖苷键以及具有三螺旋结构，通过体外实验证明，荷花蜂花粉多糖具有清除dpph、abts、羟基自由基的能力，且表现出较好的清除能力，此外，荷花蜂花粉多糖还可以抑制aaph诱导的红细胞溶血，在细胞水平上表现出潜在的抗氧化能力。同时，体外降血糖实验表明荷花蜂花粉多糖可以抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性，呈现出一定的剂量效应，以及通过抗炎活性研究表明，不同浓度的lbpp-1可以缓解lps诱导的raw264.7细胞炎症反应，具有良好的抗炎效果；
23、本专利技术的从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，采用微波辅助法提取粗多糖，再通过对荷花蜂花粉粗多糖进行sevag法除蛋白后，采用deae-52纤维素离子柱层析，得到纯化的低分子多糖lbpp-1，其中研究了微波辅助法中提取时间、料液比、提取温度、微波功率对荷花蜂花粉多糖得率的影响，得到最佳工艺为在提取时间41min、料液比31ml/g、提取温度82℃、微波功率570w条件下，荷花蜂花粉多糖得率为1.30±0.15％。
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1.一种从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖为多糖混合物，其分子量Mw为1625Da。
2.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖中包括阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖和葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖为水溶性吡喃糖，具有β-构型。
4.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖存在三股螺旋结构。
5.一种权利要求1-4任一项所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，步骤2)所述超声微波反应的提取时间为20～50min。
7.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，步骤2)所述超声微波反应的提取料液比为10～40mL/g。
8.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，步骤2)所述超
9.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，步骤2)所述超声微波反应的微波功率为100-700W。
10.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，步骤5)所述纯化中，包括填料预处理和层析柱平衡。
...【技术特征摘要】
1.一种从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖为多糖混合物，其分子量mw为1625da。
2.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖中包括阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖和葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖为水溶性吡喃糖，具有β-构型。
4.根据权利要求1所述的从蜂花粉中分离得到的低分子多糖，其特征在于，所述低分子多糖存在三股螺旋结构。
5.一种权利要求1-4任一项所述从蜂花粉中分离得到低分子多糖的提取工艺，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述从蜂花粉中分离得...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宏，李岚涛，刘功良，廖湘，白卫东，钟婧威，张霖靖，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：
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