本发明专利技术公开一种大肠菌增菌增酶培养液，包括组分Ａ、Ｂ，其中：组分Ａ：每１０００ｍｌ蒸馏水中含有胰蛋白胨０．５～２ｇ，氯化钠２～５ｇ，磷酸二氢钾６～８ｇ，氢氧化钠１～２ｇ；组分Ｂ：每１００ｍＬ蒸馏水中含有β－半乳糖苷酶诱导物０．０５－０．２ｇ，亚致死细菌快速修复物３－６ｇ，细菌快速增长剂２－５ｇ；其中，组分Ａ与组分Ｂ体积比为１００∶１。本发明专利技术的大肠菌增菌增酶培养液，能够对大肠菌进行快速增菌，与此同时增加β－半乳糖苷酶的量，对菌体培养６～７小时即可达到检测所需的菌体量，增菌增酶速度快、效率高。本发明专利技术还公开一种大肠菌增菌增酶培养液的制备方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及菌群的培养，特别涉及一种。
技术介绍
在食品行业，大肠菌群的含量是一项重要的卫生指标。由于于各种食品成分复杂， 存在干扰菌体生理状态、影响检测结果的物质，因此，在检测前需要进行菌体分离富集，以 去除干扰物质，然后将分离得到的菌体进行检测，如果将菌体直接进行检测，常常因菌量小 而无法检出，造成错误的检测结果。目前，通常采用增菌液对菌体进行培养，增加菌体量，从 而保证检测结果正确，该种增菌液多为大肠菌增菌培养基，采用该培养基增菌需要12小时 才能达到检测所需的菌体量，因此增菌时间太长，不能满足快速检测的要求，造成检测效率 低下的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种大肠菌增菌增酶培养液，对大肠菌进行增菌增酶培 育，快速达到检测要求的菌体量。为解决以上技术问题，本专利技术的技术方案是，一种增菌增酶培养液，包括组分A、B， 其中组分A 每IOOOml蒸馏水中含有胰蛋白胨0. 5 2g，氯化钠2 5g，磷酸二氢钾 6 8g，氢氧化钠1 2g;组分B 每IOOmL蒸馏水中含有β -半乳糖苷酶诱导物0. 05-0. 2g，亚致死细菌快 速修复物3-6g，细菌快速增长剂2-5g;其中，组分A与组分B体积比为100 1。其中，组分A中，每IOOml蒸馏水中还含有自由基清除剂Ig 3g、十二烷基磺酸钠 0. 03g 0. 06g。其中，所述半乳糖苷酶诱导物为乳糖、异丙基硫代半乳糖苷或者半乳糖中的 任一种。其中，所述亚致死细菌快速修复物为甘油、葡萄糖、丙酮酸钠、抗坏血酸、维生素E 中的任一种或多种。其中，所述细菌快速增长剂为三磷酸腺苷、肌酐，肌苷或者牛血清提取物中的任一 种或多种。其中，所述自由基清除剂为活性炭、可溶性淀粉、半胱氨酸、二苯胺、巯基乙醇或 α-生育酚中的任一种。本专利技术还提供一种增菌增酶培养液的制备方法，将组分A灭菌后与组分B以体积 比100 1混合，其中组分A为每IOOOml蒸馏水中含有胰蛋白胨0. 5 2g，氯化钠2 5g，磷酸二氢钾6 8g，氢氧化钠1 2g，组分B为每IOOmL蒸馏水中含有β -半乳糖苷 酶诱导物0. 05-0. 2g，亚致死细菌快速修复物3-6g，细菌快速增长剂2-5g。其中，组分A中，每1000ml蒸馏水中还含有自由基清除剂Ig 3g、十二烷基磺酸钠 0. 03g 0. 06g。其中，组分A先在121°C下灭菌15分钟后再与组分B混合。与现有技术相比，本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液，能够对大肠菌进行快速增菌， 与此同时增加β _半乳糖苷酶的量，对菌体培养6 7小时即可达到检测所需的菌体量，增 菌增酶速度快、效率高、成本低廉。 具体实施例方式以下通过具体实施例对本专利技术进行说明。实施例一本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中组分A 胰蛋白胨0. 5g，氯化钠2g，活性炭2g，十二烷基磺酸钠0. 05g,磷酸二氢钾 7g，氢氧化钠2g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用。组分B 乳糖0. 2g，甘油3g，三磷酸腺苷3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取 100 μ 1到IOml培养液组分A中。实施例二本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中组分A 胰蛋白胨0. Sg,氯化钠3g，可溶性淀粉lg，十二烷基磺酸钠0. 04g,磷酸二 氢钾6g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室 温保存供使用。组分B 半乳糖0. 07g,葡萄糖4g，肌酐5g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100 μ 1 到IOml培养液组分A中。实施例三本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中组分A 胰蛋白胨lg，氯化钠4g，半胱氨酸3g，十二烷基磺酸钠0. 06g,磷酸二氢钾 6g，氢氧化钠2g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用。组分B 异丙基硫代半乳糖苷0. 15g，丙酮酸钠3g，肌苷2g，溶于IOOmL蒸馏水，过 滤除菌，取100 μ 1到IOml培养液组分A中。实施例四本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中 组分A 胰蛋白胨1. 5g，氯化钠2g，二苯胺g，十二烷基磺酸钠0. 05g,磷酸二氢钾 7g，氢氧化钠17g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用。组分B 乳糖0. 2g，维生素E3g，牛血清提取物3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取 100 μ 1到IOml培养液组分A中。实施例五本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中组分A 胰蛋白胨2g，氯化钠3g，巯基乙醇lg，十二烷基磺酸钠0. 06g，磷酸二氢钾7g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用。 组分B 半乳糖0. 2g，抗坏血酸4g，三磷酸腺苷3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌， 取100 μ 1到IOml培养液组分A中。实施例六本专利技术的大肠菌增菌增酶培养液包括组分Α、组分B，其中组分Α:胰蛋白胨0. 5g，氯化钠3g，α-生育酚lg，十二烷基磺酸钠0.04g，磷酸二 氢钾8g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室 温保存供使用。组分B 异丙基硫代半乳糖苷0. 18g，甘油、5g，肌酐2g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除 菌，取100 μ 1到IOml培养液组分A中。以下以两个应用例对本专利技术大肠菌增菌增酶培养液的效果进行说明。应用例一1、样品利用大肠杆菌标准菌株ATCC8739制备一系列不同菌浓度的大肠杆菌稀释液。2、培养液组成与制备本专利技术的大肠菌群增菌增酶培养液的配方及制备方法参见前述实施例一 实施 例六。将以下两种培养基/培养液作为对照例，与本专利技术的大肠菌群增菌增酶培养液进 行实施效果对照。对照例1 乳糖胆盐发酵培养基(购自广东环凯微生物科技有限公司)，培养基配 方与制备方法参见GB/T4789. 2-2008)。对照例2 大肠菌群增菌培养液，其组分及制备方法为将胰蛋白胨0. 5g，氯化钠 2g，自由基清除剂lg，十二烷基磺酸钠0. 03g，磷酸二氢钾6g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml 蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用。3、菌体培养取五种不同菌浓度的稀释液各ImL分别加入到前述大肠菌增菌增酶培养液、对照 例1、对照例2中，每个稀释液每种培养液/培养基做2个重复，放入39-42°C的恒温培养箱 中培养6 7小时。4、发光检测分别取培养完毕的菌悬液100 μ 1，置于96孔板中相应检测孔中，加入50 μ 1发 光试剂底物、发光增强剂和大肠菌温和裂解液混合试剂反应30分钟，在振荡器上摇勻振荡 1分钟后，进行发光检测，发光检测的波长为560nm，检测积分时间为Is。此检测步骤中， 以半乳糖苷酶作为标记物，半乳糖苷酶分解发光试剂底物时，反应体系会发出生物 光，在一定范围内β -半乳糖苷酶的量与发光强度呈正相关，通过发光值间接测定大肠菌 群的数量。其中，发光试剂底物选用荧光素_ β本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大肠菌增菌增酶培养液，其特征在于，包括组分Ａ、Ｂ，其中： 组分Ａ：每１０００ｍｌ蒸馏水中含有胰蛋白胨０．５～２ｇ，氯化钠２～５ｇ，磷酸二氢钾６～８ｇ，氢氧化钠１～２ｇ； 组分Ｂ：每１００ｍＬ蒸馏水中含有β－半乳糖苷酶诱导物０．０５－０．２ｇ，亚致死细菌快速修复物３－６ｇ，细菌快速增长剂２－５ｇ； 其中，组分Ａ与组分Ｂ体积比为１００∶１。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：严守雷，缪素娜，邓少雅，吴俊，黄文彪，潘思轶，
申请(专利权)人：佛山市海天调味食品有限公司，佛山市海天高明调味食品有限公司，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]
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