【技术实现步骤摘要】
本申请涉及大肠杆菌的样品制备，具体涉及大肠杆菌的冻干保护剂、冻干品的制备方法及应用。
技术介绍
1、大肠杆菌是动物肠道中的正常寄居菌，其中很小一部分在一定条件下引起疾病。大肠杆菌的血清型能够引起人体或动物胃肠道感染，主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的，除胃肠道感染以外，还会引起尿道感染、关节炎、脑膜炎以及败血型感染等。
2、目前国际公认的分类，主要有六个种类的大肠杆菌，即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌(epec)、肠道产毒素性的大肠杆菌(etec)、肠道侵袭性的大肠杆菌(eiec)、肠道出血性的大肠杆菌(ehec)、肠集聚性的大肠杆菌(eaec)以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌(esies)，另外，还有能够致使尿道感染的尿道致病性的大肠杆菌(upec)，以及最新命名的肠道集聚性的黏附大肠杆菌(eaggec)。
3、为对该菌属进行研究，常常需要对其进行菌种保藏，例如低温保藏、甘油管保藏，然而这些保藏方法对菌株的活性难免有负面影响，并且菌株的活化也会成为菌株的使用负担。
技术实现思路
1、真空冷冻干燥技术，是一种最有效的保存生物样品稳定性的手段，技术相对成熟，能够对产品进行批量生产，效果稳定，且冻干产品保存方便、贮藏稳定性强、便于运输的特点，广泛应用在蛋白质、益生菌、疫苗等领域生产中。本申请专利技术人开发了一类能够在冻干过程中加入至大肠杆菌菌液中进行冻干保护的制剂，能够形成性能稳定的大肠杆菌的冻干品。这些冻干品不仅
2、(1)一种大肠杆菌的冻干保护剂，其选自乳糖、蔗糖、甘油、山梨醇、甘氨酸、抗坏血酸钠和酵母提取物中的至少两种。
3、(2)一种大肠杆菌的冻干品，其包括(1)所述冻干保护剂以及与所述冻干保护剂混合并进行冷冻干燥形成固态样品的大肠杆菌。
4、(3)一种大肠杆菌冻干品的制备方法，包括：
5、准备大肠杆菌菌液和如(1)所述的冻干保护剂，其中，所述冻干保护剂为水溶液；
6、将所述大肠杆菌菌液与所述冻干保护剂混合后，依次进行预冻、第一温度保持、升温和第二温度保持。
7、(4)(1)所述冻干保护剂在制备大肠杆菌冻干品中的应用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种大肠杆菌的冻干保护剂，其选自乳糖、蔗糖、甘油、山梨醇、甘氨酸、抗坏血酸钠和酵母提取物中的至少两种。
2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，以重量份数计包括：
3.根据权利要求2所述的冻干保护剂，
4.根据权利要求1所述的冻干保护剂，以重量份数计包括：400～700份乳糖，50～200份甘油和50～200份抗坏血酸钠。
5.根据权利要求4所述的冻干保护剂，
6.一种大肠杆菌的冻干品，其包括权利要求1～5任一所述冻干保护剂以及与所述冻干保护剂混合并进行冷冻干燥形成固态样品的大肠杆菌。
7.根据权利要求6所述的冻干保护剂，所述大肠杆菌包括肠道致病性的大肠杆菌(EPEC)、肠道产毒素性的大肠杆菌(ETEC)、肠道侵袭性的大肠杆菌(EIEC)、肠道出血性的大肠杆菌(EHEC)、肠集聚性的大肠杆菌(EAEC)、大肠杆菌(ESIES)、尿道致病性的大肠杆菌(UPEC)以及肠道集聚性的黏附大肠杆菌(EAggEC)；可选地，所述大肠杆菌为大肠杆菌X6097。
8.一种大肠杆菌冻干品的制备方法，包括：
<...【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌的冻干保护剂，其选自乳糖、蔗糖、甘油、山梨醇、甘氨酸、抗坏血酸钠和酵母提取物中的至少两种。
2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，以重量份数计包括：
3.根据权利要求2所述的冻干保护剂，
4.根据权利要求1所述的冻干保护剂，以重量份数计包括：400～700份乳糖，50～200份甘油和50～200份抗坏血酸钠。
5.根据权利要求4所述的冻干保护剂，
6.一种大肠杆菌的冻干品，其包括权利要求1～5任一所述冻干保护剂以及与所述冻干保护剂混合并进行冷冻干燥形成固态样品的大肠杆菌。
7.根据权利要求6所述的冻干保护剂，所述大肠杆菌包括肠道致...
【专利技术属性】
技术研发人员：熊家军，吕志远，彭静娜，史月军，刘丽娟，舒永兰，韦唯，杨翔淞，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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