【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫分析，尤其涉及一种纤维蛋白或纤维蛋白原降解产物fdp测定试剂盒。
技术介绍
1、fdp是纤维蛋白水解后的产物，根据切割纤维蛋白原位点的不同，而形成长度不等的d-d片段、d-de片段和ded片段，这些混合物即是fdp，其主要用于判断纤溶系统的功能状态。当血浆fdp水平升高时，则提示纤溶活性增强，动态监测fdp水平可作为评估机体从高凝状态转为纤溶亢进状态的重要指标。
2、胶乳免疫比浊法是近年来出现的一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊测定方法，目前已广泛应用于临床诊断领域。该法是在高分子胶乳微颗粒的表面交联抗体，当交联有抗体的微球与抗原结合后，在短时间内会迅速聚集在一起，改变了反应液的散光性能或透光性能。反应液散光性能或透光性能(即吸光度)的改变与被测抗原的浓度有内在的相关性，在一定范围内可以反映被测抗原的浓度。目前也有采用胶乳免疫比浊法来测定人体血浆中fdp的含量的试剂盒，但目前市场上的纤维蛋白(原)降解产物(fdp)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法)线性范围较窄，一般为2.5～60ug/ml，不能满足临床高值样本的检测。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题在于，针对现有技术的缺陷，提供一种纤维蛋白或纤维蛋白原降解产物fdp测定试剂盒及其制备方法。
2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种纤维蛋白或纤维蛋白原降解产物fdp测定试剂盒，包括r1试剂、r2试剂以及稀释试剂，用于检测血浆中浓度范围为4-130ug/ml的fd
3、所述r1试剂包括第一缓冲液、第一稳定剂、促凝剂，所述r1试剂的ph为6.0～9.0；
4、所述r2试剂包括抗人fdp抗体胶乳颗粒、第二缓冲液、第二稳定剂，所述r2试剂的ph为6.0～9.0，所述抗人fdp抗体胶乳颗粒为胶乳颗粒和抗人fdp抗体的偶联物，所述抗人fdp抗体为抗人fdp单克隆抗体和抗人fdp多克隆抗体的混合抗体；
5、所述稀释试剂包括第三缓冲液、第三稳定剂，所述稀释试剂的ph为7.0～7.5。
6、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述抗人fdp抗体胶乳颗粒在所述r2试剂的浓度为1-20mg/l。
7、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述胶乳颗粒为羧基聚苯乙烯胶乳颗粒。
8、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第一缓冲液、第二缓冲液、第三缓冲液均为mes缓冲液、hepes缓冲液、tris缓冲液、甘氨酸缓冲液、dipso缓冲液、mops缓冲液、磷酸盐缓冲液、咪唑缓冲液、巴比妥缓冲液中的至少一种。
9、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第一缓冲液的浓度为10-200mmol/l；所述第二缓冲液的浓度为10-500mmol/l；所述第三缓冲液的浓度为10-200mmol/l。
10、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第一缓冲液为磷酸缓冲液；所述第二缓冲液为tris缓冲液；第三缓冲液为咪唑缓冲液。
11、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第一稳定剂在所述r1试剂中的质量百分比为0.5～2％，所述第一稳定剂包括无关蛋白、无机盐、助悬剂、表面活性剂中的至少一种。
12、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述无关蛋白包括牛血清蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶中的至少一种；
13、所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸钠、硫酸钾、醋酸钠和醋酸钾中的至少一种；
14、所述表面活性剂包括二乙醇胺、三乙醇胺、二乙三胺、亚乙基亚胺、烷基苯磺酸钠、烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯醚硫酸钠、脂肪酸钠、烷基聚氧乙烯醚羧酸钠、烷基磺酸钠、亚甲基双萘磺酸钠、油酰甲基牛磺酸钠、吐温-20、吐温-21、吐温-40、吐温-60、吐温-61、吐温-80、吐温-81、吐温-85、曲拉通100、甘油中的至少一种；
15、所述助悬剂包括乙二醇、丙三醇、麦芽糖、blockmaster中的至少一种。
16、进一步地，在所述的试剂盒的，优选所述促凝剂包括peg200～10000、葡聚糖4000～12000中的至少一种；所述促凝剂在所述r1试剂中的质量百分比为0.2～5％。
17、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述r1试剂、r2试剂均、稀释试剂还包括防腐剂，所述防腐剂包括亚硝酸钠、硫柳汞、proclin300、proclin950中的至少一种，所述防腐剂在所述r1试剂、所述r2试剂、稀释试剂中的质量百分比为0.03～0.05％。
18、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第二稳定剂在所述r2试剂中的质量百分比为0.5～2％，所述第二稳定剂包括无关蛋白、无机盐、助悬剂、表面活性剂中的至少一种。
19、进一步地，在所述的试剂盒的，优选所述无关蛋白包括牛血清蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶中的至少一种；
20、所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸钠、硫酸钾、醋酸钠和醋酸钾中的至少一种；
21、所述表面活性剂包括二乙醇胺、三乙醇胺、二乙三胺、亚乙基亚胺、烷基苯磺酸钠、烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯醚硫酸钠、脂肪酸钠、烷基聚氧乙烯醚羧酸钠、烷基磺酸钠、亚甲基双萘磺酸钠、油酰甲基牛磺酸钠、吐温-20、吐温-21、吐温-40、吐温-60、吐温-61、吐温-80、吐温-81、吐温-85、曲拉通100、甘油中的至少一种；
22、进一步地，在所述的试剂盒的，优选所述助悬剂包括乙二醇、丙三醇、麦芽糖、blockmaster中的至少一种。
23、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述第三稳定剂包括无机盐；所述第三稳定剂在所述稀释试剂中的质量百分比为0.85％～0.95％。
24、进一步地，在所述的试剂盒中，优选所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸钠、硫酸钾、醋酸钠、醋酸钾中的至少一种。
25、一种上述所述的试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
26、s1、取第一稳定剂、促凝剂加入到第一缓冲液中，调节ph至6.0～9.0，制得r1试剂；
27、s2、取抗人fdp抗体胶乳颗粒、第二稳定剂加入到第二缓冲液中，调节ph至6.0～9.0，制得r2试剂；
28、s3、取第三稳定剂加入到第三缓冲液中，调节ph至7.0～7.5，制得稀释试剂。
29、进一步地，在所述的试剂盒的制备方法，优选在所述s2中，具体包括以下步骤：
30、s21、取胶乳颗粒加入至活化缓冲液中，加入活化剂进行活性，得到活化胶乳颗粒；
31、s22、将活化胶乳颗粒分别与抗人fdp单克隆抗体、抗人fdp多克隆抗体按比例混匀，分别得到抗人fdp单克隆抗体胶乳颗粒、抗人fdp多克隆抗体胶乳颗粒，将抗人fdp单克隆抗体胶乳颗粒与抗人fdp多克隆抗体胶乳颗粒混合形成所述抗人fdp抗体胶乳颗粒；
32、s23、加入第二缓冲液、第二稳定剂混匀，调节ph至6.0～9.0，制得r2试剂。
33、进一步地，在所本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种纤维蛋白或纤维蛋白原降解产物FDP测定试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂以及稀释试剂，用于检测血浆中浓度范围为4-130ug/mL的FDP；
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗人FDP抗体胶乳颗粒在所述R2试剂的浓度为1-20mg/L。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述胶乳颗粒为羧基聚苯乙烯胶乳颗粒。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液、第二缓冲液、第三缓冲液均为MES缓冲液、HEPES缓冲液、TRIS缓冲液、甘氨酸缓冲液、DIPSO缓冲液、MOPS缓冲液、磷酸盐缓冲液、咪唑缓冲液、巴比妥缓冲液中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液的浓度为10-200mmol/L；所述第二缓冲液的浓度为10-500mmol/L；所述第三缓冲液的浓度为10-200mmol/L。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液为磷酸缓冲液；所述第二缓冲液为TRIS缓冲液；第三缓冲液为咪唑缓冲液。
7.根据权利要
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述无关蛋白包括牛血清蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶中的至少一种；
9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述促凝剂包括PEG200～10000、葡聚糖4000～12000中的至少一种；所述促凝剂在所述R1试剂中的质量百分比为0.2～5％。
10.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述R1试剂、R2试剂均、稀释试剂还包括防腐剂，所述防腐剂包括亚硝酸钠、硫柳汞、ProClin300、ProClin950中的至少一种，所述防腐剂在所述R1试剂、所述R2试剂、稀释试剂中的质量百分比为0.03～0.05％。
11.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第二稳定剂在所述R2试剂中的质量百分比为0.5～2％，所述第二稳定剂包括无关蛋白、无机盐、助悬剂、表面活性剂中的至少一种。
12.根据权利要求11所述的试剂盒，其特征在于，所述无关蛋白包括牛血清蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶中的至少一种；
13.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第三稳定剂包括无机盐；所述第三稳定剂在所述稀释试剂中的质量百分比为0.85％～0.95％。
14.根据权利要求13所述的试剂盒，其特征在于，所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸钠、硫酸钾、醋酸钠、醋酸钾中的至少一种。
15.一种权利要求1-14任意一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
16.根据权利要求15所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述S2中，具体包括以下步骤：
17.根据权利要求16所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述活化缓冲液为MES溶液，所述胶乳颗粒的活化剂为EDC，胶乳颗粒与活化剂的配比为1:(2-20)，活化时间为20～40min，活化胶乳颗粒中分别与抗人FDP单克隆抗体胶乳颗粒、抗人FDP多克隆抗体胶乳颗粒进行偶联，反应时间为2～4h。
...【技术特征摘要】
1.一种纤维蛋白或纤维蛋白原降解产物fdp测定试剂盒，其特征在于，包括r1试剂、r2试剂以及稀释试剂，用于检测血浆中浓度范围为4-130ug/ml的fdp；
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗人fdp抗体胶乳颗粒在所述r2试剂的浓度为1-20mg/l。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述胶乳颗粒为羧基聚苯乙烯胶乳颗粒。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液、第二缓冲液、第三缓冲液均为mes缓冲液、hepes缓冲液、tris缓冲液、甘氨酸缓冲液、dipso缓冲液、mops缓冲液、磷酸盐缓冲液、咪唑缓冲液、巴比妥缓冲液中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液的浓度为10-200mmol/l；所述第二缓冲液的浓度为10-500mmol/l；所述第三缓冲液的浓度为10-200mmol/l。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液为磷酸缓冲液；所述第二缓冲液为tris缓冲液；第三缓冲液为咪唑缓冲液。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一稳定剂在所述r1试剂中的质量百分比为0.5～2％，所述第一稳定剂包括无关蛋白、无机盐、助悬剂、表面活性剂中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述无关蛋白包括牛血清蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶中的至少一种；
9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述促凝剂包括peg200～10000、葡聚糖4000～12000中的至少一种；所述促凝剂在所述r1试剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡彦勇，
申请(专利权)人：深圳市帝迈生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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