本发明专利技术公开了一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，属大蒜组织培养技术。将２，４－Ｄ、ＫＴ、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基Ｂ５中，ｐＨ值调整至５．８－６．０制得，其各组份的用量为：以１Ｌ基本培养基Ｂ５加入量计：Ｂ５?１Ｌ，２，４－Ｄ?２ｍｇ，ＫＴ?０．５－２ｍｇ，蔗糖３０ｇ。有益效果是利用本培养基可以建立大蒜悬浮培养系，解决了大蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织悬浮培养时易丧失胚性，难以成系的技术难题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种大蒜组织培养技术，具体是一种大蒜胚性悬浮培养系建立用的培养基。特别适用于利用从大蒜茎尖分生组织诱导出的胚性愈伤组织进行悬浮培养。
技术介绍
大蒜(Allium sativumL.)是无性繁殖植物，具有较高的食用及药用价值，利用生物工程技术改良其品质.抗病虫害等性状现已引起广泛的重视，这些生物技术应用的关键环节是建立一个大蒜细胞组织培养、增殖的有效植株再生体系。悬浮培养技术可以在短时间内培养出大量同质的试验材料，大幅度提高试验效率，为大蒜生物工程提供理想的试验材料。张毅等利用大蒜悬浮培养提取大蒜次生代谢物质有过报道(1993)；但利用大蒜悬浮培养技术，建立悬浮培养系及有效植株高频率再生体系尚未报道。
技术实现思路
本专利技术提供一种大蒜胚性悬浮培养系建立用的培养基，目的是解决大蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织悬浮培养时易丧失胚性，难以成系的技术难题，建立一个大蒜的胚性细胞培养系。 本专利技术的技术方案如下一种大蒜胚性悬浮培养系建立用的培养基，是将2，4二氯苯氧乙酸2，4-D、激动素KT、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基B5中，PH值调整至5.8-6.0制得，其各组份的用量为以1L基本培养基B5加入量计 B5 1L 2，4-D 2mg KT 0.5-2mg 蔗糖 30g。 优选为 B5 1L 2，4-D 2mg KT 0.5mg 蔗糖30g。 上述原料中，B5为基本培养基，提供培养组织生长发育所需的无机营养元素和部分有机营养元素；2，4-D、KT是植物生长调节剂，具有促进培养物愈伤组织形成和发育的作用；蔗糖提供培养组织生长发育所的碳素营养。 上述各组份的用量是专利技术人在理论分析的基础上进行大量试验摸索总结得出的，按上述比例配制培养基，具有形成优质胚性愈伤组织颗粒诱导效果。 上述培养基的制作方法是将2，4-D、KT和蔗糖溶解于基本培养基B5中，搅拌均匀，PH值调整为5.8-6.0即可。 本专利技术的积极效果是利用本培养基可以建立大蒜悬浮培养系，解决了大蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织悬浮培养时易丧失胚性，难以成系的技术难题。 具体实施例方式 以下通过实施例和对照例进一步阐述本专利技术的有益效果。 实施例1 B51L 2，4-D2mg 6-BA 2mg 蔗糖 30g。 实施例2 B5 1L 2，4-D 2mg 6-BA 0.5mg NAA 0.2mg 蔗糖 30g。 实施例3 B51L 2，4-D2mg KT0.5mg 蔗糖 30g。 实施例4 B51L 2，4-D2mg KT2mg 蔗糖 30g。 试验方法及结果 将上述实施例的培养基用于大蒜胚性悬浮培养系的建立试验 材料大蒜徐州白蒜茎尖分生组织诱导出的胚性愈伤组织。 方法将大蒜徐州白蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织破碎成小的细胞团，将其转移到装有上述实施例液体培养20ml(PH5.5)的三角瓶中，放在100r/min转速的水平摇床上进行振荡培养，培养条件为27±1℃，每日12h.1000lx光照。悬浮培养每隔2周继代一次，培养10周。 结果将大蒜茎尖分生组织诱导得到的胚性愈伤组织转管接种在上述4个实施例液体培养中进行振荡培养。在实施例3中悬浮系形成率最高为86.7％，可以获得增殖迅速.分散程度良好的胚性细胞悬浮培养系。实施例1中悬浮系形成率最低，为6.6％；实施例2中悬浮系形成率为40％；实施例4中悬浮系形成率为63.3％。在实施例1、2、4中，愈伤组织逐渐变白，最后丧失胚性，同时部分细胞团形成根状组织。由此可见，在大蒜体胚形成过程中，过高的生长素不利于其体胚的发生，而导致向根的方向分化。在实施例3培养基中获得的胚性细胞培养系每周继代一次，每次继代时，将坚硬.淡黄色.直径大于3mm的细胞团破碎成0.1mm以下的小细胞团或单细胞，通过2周的悬浮培养，部分细胞团又可以发育成2-3mm的细胞团。通过上述方法，由一个茎尖分生组织诱导得到的胚性愈伤组织可以在短时间内得到大量的同质胚性愈伤组织。 统计结果见表1。 表1大蒜悬浮培养系诱导结果统计(10周) 综合以上分析，得出大蒜胚性悬浮培养系诱导的最佳培养基为 B51L 2，4-D2mg KT0.5mg 蔗糖 30g。权利要求1.一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，其特征是将2，4二氯苯氧乙酸2，4-D、激动素KT、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基B5中，PH值调整至5.8-6.0制得，其各组份的用量为以1L基本培养基B5加入量计B5 1L2，4-D 2mgKT 0.5-2mg蔗糖30g。2.一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，其特征是将2，4二氯苯氧乙酸2，4-D、激动素KT、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基B5中，PH值调整至5.8-6.0制得，其各组份的用量为以1L基本培养基B5加入量计B5 1L2，4-D 2mgKT 0.5mg蔗糖30g。全文摘要本专利技术公开了一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，属大蒜组织培养技术。将2，4-D、KT、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基B5中，pH值调整至5.8-6.0制得，其各组份的用量为以1L基本培养基B5加入量计B5 1L，2，4-D 2mg，KT 0.5-2mg，蔗糖30g。有益效果是利用本培养基可以建立大蒜悬浮培养系，解决了大蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织悬浮培养时易丧失胚性，难以成系的技术难题。文档编号A01H4/00GK101816288SQ201010169619公开日2010年9月1日 申请日期2010年5月6日 优先权日2010年5月6日专利技术者张允刚 申请人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，其特征是：将２，４二氯苯氧乙酸２，４－Ｄ、激动素ＫＴ、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基Ｂ５中，ＰＨ值调整至５．８－６．０制得，其各组份的用量为：以１Ｌ基本培养基Ｂ５加入量计：Ｂ５１Ｌ２，４－Ｄ２ｍｇＫＴ０．５－２ｍｇ蔗糖３０ｇ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张允刚，
申请(专利权)人：江苏徐淮地区徐州农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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