本发明专利技术属于生物医药领域，涉及脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸－铜（Ⅱ）配合物的制备及应用。本发明专利技术将正八，十，十二，十四，十六烷基脂肪酸分别与Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ肽段相缀合，对其进行疏水性修饰，合成了具备两亲性的不同长链脂肪酸和Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ肽缀合物，即配体化合物ＣｎＨ２ｎ＋１ＣＯ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－ＯＨ，（ｎ＝７，９，１１，１３，１５）。之后，将不同长链脂肪酸和Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ肽的缀合物分别与Ｃｕ２＋进行配合，合成了以铜（Ⅱ）为配位中心离子，不同长链脂肪酸和Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ肽缀合物为配体的配合物，即铜配合物Ｃｕ－（ＣｎＨ２ｎ＋１ＣＯ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ）４，（ｎ＝７，９，１１，１３，１５）。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，涉及SOD模拟物一铜(II)配合物及其制备方法，尤其 涉及铜配合物构建以及鉴定方法。本专利技术还涉及到铜配合物在SOD样活性中的应用。
技术介绍
自由基的定义是指任何包含一个未成对电子的原子或原子团。生物体系中自由基 广泛存在，主要是氧自由基，例如超氧阴离子自由基(02__)、羟自由基(0H)、脂氧自由基、二 氧化氮和一氧化氮自由基。在正常生命过程中自由基为生命所必需，大量实验表明，自由基 参与了许多重要的生命过程。自由基的特点可以总结为三点，一是反应性强，二是具有顺磁 性，三是寿命短。在正常情况下，人体内存在大量的抗氧化剂，如维生素C、维生素E、胡萝卜素，超 氧化物歧化酶、过氧化氢酶等。它们能清除自由基，使体内的自由基处于不断产生与清除 的动态平衡中，但当自由基过多或清除过慢时，动态平衡被打乱，就会对生物体产生一系列 损害。自由基对体内生物大分子的损伤主要是对维持生命活动具有重要作用的蛋白质和 DNA的损伤。科学家认为自由基与衰老、癌症、胃炎、消化性溃疡、高血压、动脉粥样硬化、缺 血_灌注再损伤、帕金森、休克、糖尿病等疾病都息息相关。超氧化物歧化酶(SOD)是一类广泛存在于动物、植物和微生物多种生物体内的金 属酶，该酶是生物体内一种重要的氧自由基清除剂，其作用在于催化体内超氧阴离子自由 基02-_的歧化反应。SOD结构如式1所示，为每个铜原子除分别与4个组氨酸残基(His44， 46,61,118)的咪唑氮配位外，还与一轴向水分子形成远距离的第5配位，Zn则与3个组氨 酸残基(His61，69，78)和1个天冬氨酸(D81)配位。Cu、Zn共同连接组氨酸61组成“咪唑 桥”结构。研究证明，Cu和Zn与酶蛋白分子中的组氨酸残基咪唑环上的N原子之间的配位关 系以及Cu和Zn之间的“咪唑桥”连接部位对酶活性的发挥是至关重要的。而锌离子在催 化过程中不起作用，只起到稳定酶的作用，Cu2+则与酶的活性有直接关系。Cu，Zn-SOD的三 维结构由衍射晶体结构分析得到每个酶分子由两个亚基通过非共价健的疏水相互作用缔 合成二聚体，肽链内部由半胱氨酸的巯基(-SH)构成的二硫桥对业基缔合起重要作用。每 个亚基活性中心金属的配位结构如式2所示，由两个亚基组成的S0D活性部位正好是以Cu 为中心的一个“疏水口袋”。这一疏水微环境有利于反应的进行，口袋边有一带正电的精氨 酸残基Argl41，它可以在催化过程中提供质子，使酶催化反应得以进行并使催化速度大为 加快，同时Argl41带正电荷，可以引导02__进入活性中心。其他氨基酸对S0D活性的影响应该从整个酶结构来考虑。 式1.、SOD活性中心金属配位结构 式2、Cu，Zn_S0D酶活性中心结构目前，对SOD模拟物的研究主要是对合成SOD的微环境进行改造。SOD活性是由 于其活性中心处于酶的疏水微环境之中，此环境对SOD催化活性的影响主要体现在以下几 方面1)存在静电导引、定位作用。酶表面带负电荷，而在活性中心附近带正电荷，引导02__ 顺利进入活性中心，定位到中心原子铜原子上。2)由于微环境具有疏水性和介电常数低的 特点，02__可比较容易地去溶剂化而参与反应。3)能够提供质子，质子是催化反应中必需的 反应物。因此给中心模拟物提供一个疏水微环境将会大大提高其S0D样的活性。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种具有两亲性的配体化合物及其制备方法。本专利技术的目的之二是提供一种与Cu，Zn-S0D具有相似结构的铜(II)配合物及其 制备方法。本专利技术的目的之三是提供铜(II)配合物在S0D样活性中的应用。本专利技术所述的具有两亲性的系列配体化合物，其分子式为CnH2n+1C0-Gly-Gly-His-0H,其中，n代表不同长链烷基脂肪酸的碳数，优选为7、9、11、13或15。本专利技术所述的具有两亲性的系列配体化合物，其制备方法为将不同长链烷基脂肪酸分别与Gly-Gly-His进行缀合，即得。本专利技术所述的具有两亲性的系列配体化合物，其具体的制备方法为将不同长链烷基脂肪酸CH3(CH2)6C00H、CH3(CH2)8COOH、CH3(CH2)10COOH、CH3 (CH2) 12C00H、CH3 (CH2) 14C00H分别与保护基保护的Gly-Gly-His偶联，脱去保护基，即得配 体化合物。本专利技术还提供一种与Cu，Zn-SOD具有相似结构的铜(II)配合物，即 Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4, (n = 7,9,11,13，15)。本专利技术所述的铜(II)配合物粒径为290 450nm，Zeta电位为-23 _37mV。本专利技术所述铜(II)配合物，其制备方法为将本专利技术所述具有两亲性的系列配体化合物分别与Cu2+进行配合，合成了以铜 (II)为配位中心离子，不同长链烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物，即 Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4, (n = 7,9,11,13，15)。本专利技术所述铜(II)配合物，具体的制备方法为将本专利技术所述具有两亲性的系列配体化合物，即CnH2n+1C0-Gly-Gly-His-0H， (n = 7,9,11,13,15),分别与Cu2+进行配合，合成了以铜(II)为配位中心离子， 不同长链脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物，即铜(II)配合物 Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4, (n = 7,9,11,13，15)。本专利技术所述铜(II)配合物，更加具体的制备方法为(1)按照常规技术合成保护基保护的Gly-Gly-His ；(2)将保护基保护的 Gly-Gly-His 与 CH3(CH2)6C00H、CH3(CH2)8C00H、 CH3 (CH2) 1(1COOH、CH3 (CH2) 12COOH或CH3 (CH2) 14COOH偶联，脱去保护基，即得具有两亲性的系列 配体化合物:CnH2n+1C0-Gly-Gly-His-0H, (n = 7,9,11,13，15)；(3)将上述具有两亲性的系列化合物作为配体与Cu2+进行配合，合成了以铜(II) 为配位中心离子，不同链长的烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物，即铜 (II)配合物Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4，(n = 7,9,11,13，15)。以上所述的Cu2+是指含有Cu2+的物质如CuS04溶解或熔融后得到的Cu2+。因此本 专利技术所述的配合反应，加入的反应物为含有Cu2+的物质。所述保护基是指常规的羟基或羧基保护基，如苯甲酰基等。许多SOD的模拟物即铜与肽的配合物具有消除超氧阴离子自由基的活性，但是 SOD样活性是由于其活性中心处于酶的疏水微环境之中，因此给SOD模拟物提供一个疏水 微环境将会大大提高其SOD样的活性。所以本专利技术将不同长链烷基脂肪酸与Gly-Gly-His 肽段相缀合，对其进行疏水性修饰，合成了具备两亲性的配体化合物，之后，将不同长链烷 基脂肪酸和Gly-Gly-His肽的缀合物分别与Cu2+进行络合，合成了以铜(II)为配位中心 离子，不同长链烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物。这本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种铜（Ⅱ）配位化合物，其分子式为：Ｃｕ－（Ｃ↓［ｎ］Ｈ↓［２ｎ＋１］ＣＯ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ）↓［４］，其中ｎ＝７、９、１１、１３或１５。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：崔国辉，崔纯莹，王欣，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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