氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法技术

本发明专利技术提供了一种氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法，采用

【技术实现步骤摘要】
氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法


[0001]本专利技术属于医药检测分析
，特别涉及一种氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法
。

技术介绍

[0002]氟比洛芬是非甾体消炎镇痛药中优秀品种之一，主要用于治疗类风湿关节炎
、
骨关节炎
、
强直性脊柱炎
、
外伤疼痛和其他疼痛，氟比洛芬的化学结构式为：
。
[0003]杂质研究为药物研发过程中的重要部分，与药品的安全性和有效性直接相关
。
遗传毒性杂质（
genotoxic impurities
，
GTIs
）是指能引起遗传毒性的杂质，包括致突变性杂质和其他无致突变性的杂质
。
其主要来源于原料药或制剂的生产过程，如起始原料
、
反应物
、
催化剂
、
试剂
、
溶剂
、
中间体
、
副产物
、
降解产物等
。
根据
ICH M7
指导原则，氟比洛芬中的
11
个硝基苯类及1个氯苯杂质均含有遗传毒性警示结构，由起始物料引入，与原料药结构无关，且无致突变性数据，归属于第3类，因此我们通过
TTC
（毒理学关注阈值）算法拟定其可接受限度
。
参考氟比洛芬片（商品名：
Ansaid
）的
FDA
说明书，本制剂日均最大摄入量
300mg
，按日均单个杂质最大摄入量为
1.5
μ
g
计算，得出杂质限度为
5ppm。
因该类杂质限度较低，一般气相
、
高效液相色谱仪等检测仪器不能满足检测灵敏度的要求
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种
GC
‑
MS/MS
法检测氟比洛芬中基因毒性杂质的方法，能够针对氟比洛芬中硝基苯类及氯苯这些基因毒性杂质在微量水平上进行定量检测
。
[0005]根据本专利技术的一个方面，提供一种氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法，采用
GC
‑
MS/MS
法对供试品溶液进行测定；供试品溶液配制方法为：取氟比洛芬，用氢氧化钠溶液处理，超声，用乙腈定容即得
。
[0006]进一步地，气相色谱条件为：气相色谱柱：
VF
‑
1701ms
；升温程序：起始温度为
75~85℃
，维持1分钟，以每分钟
5℃
的速率升温至
170℃
，再以每分钟
10℃
的速率升温至
250℃
，维持
10
分钟；进样口温度：
245~255℃
；柱流量：
0.9~1.1ml/min
；分流进样，分流比：
10:1
；进样量：1μ
l。
[0007]进一步地，质谱条件为：
EI
源温度：
230℃
；电子能量：
70eV
；溶剂延迟时间：
3min
；扫描模式：多反应离子检测（
MRM
）
。
[0008]进一步地，所述基因毒性杂质包括
3,4
‑
二氟硝基苯
、2,6
‑
二氟硝基苯
、
对氟硝基苯
、2,4
‑
二氟硝基苯
、
硝基苯
、1
‑
氟
‑2‑
硝基苯
、
对硝基氯苯
、
邻硝基氯苯
、2,6
‑
二氯硝基苯
、2,4
‑
二氯硝基苯
、
氯苯
。
[0009]进一步地，所述的多反应离子检测所采用的的定性定量的离子对和碰撞能如下：
。
[0010]进一步地，供试品溶液配制中，所述氢氧化钠溶液的浓度为
5~10 mg/ml。
[0011]本专利技术的有益效果：本专利技术的氟比洛芬基因毒性杂质的分析方法，采用
GC
‑
MS/MS
法测定，可以将同分异构体杂质（如杂质
3,4
‑
二氟硝基苯
、2,6
‑
二氟硝基苯与
2,4
‑
二氟硝基苯；对氟硝基苯与1‑
氟
‑2‑
硝基苯；对硝基氯苯与邻硝基氯苯；
2,6
‑
二氯硝基苯与
2,4
‑
二氯硝基苯）通过气相模块进行分离，根据气相出峰位置的不同对上述杂质进行区分；对于在气相分离度较差或出峰位置一致的杂质（如杂质
2,4
‑
二氟硝基苯与1‑
氟
‑4‑
硝基苯）可以通过质谱分子量的不同将杂质进行区分；从而本专利技术的分析方法大大提升了杂质分离度的要求，可将多个杂质在同一方法进行检测，不需要开发多个方法分别对不同的杂质进行检测，降低了检测和方法开发成本
。
[0012]本专利技术的氟比洛芬基因毒性杂质的分析方法，最低检测限可达到约
0.04ng/ml
，极大地提高了氟比洛芬中的杂质检测灵敏度，能够在微量水平上定性定量检测出氟比洛芬中硝基苯类及氯苯基因毒性杂质，本专利技术的检测方法经方法学验证，各项检测指标均符合规定，检测结果准确，可靠，为监控氟比洛芬的质量稳定性和临床用药安全提供了保证
。
附图说明
[0013]图1为实施例1中空白溶液的色谱图
。
[0014]图2为实施例1中对照品溶液的色谱图；图中，
1、
氯苯；
2、3,4
‑
二氟硝基苯；
3、2,6
‑
二氟硝基苯；
4、1
‑
氟
‑4‑
硝基苯；
5、2,4
‑
二氟硝基苯；
6、
硝基苯；
7、1
‑
氟
‑2‑
硝基苯；
8、
对硝基氯苯；
9、
邻氯硝基苯；
10、2,6
‑
二氯硝基苯；
11、2,4
‑
二氯硝基苯
。
[0015]图3为实施例1中氟比洛芬（自制）供试品溶液的色谱图
。
[0016]图4为实施例1中加杂质的供试品溶液的色谱图；图中，
1、
氯苯；
2、3,4
‑
二氟硝基苯；
3、2,6
‑
二氟硝基苯；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法，其特征在于，采用
GC
‑
MS/MS
法对供试品溶液进行测定；供试品溶液配制方法为：取氟比洛芬，用氢氧化钠溶液处理，超声，用乙腈定容即得
。2.
根据权利要求1所述的氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法，其特征在于，气相色谱条件为：气相色谱柱：
VF
‑
1701ms
石英毛细管柱；载气：氦气，碰撞气：氮气；升温程序：起始温度为
75~85℃
，维持1分钟，以每分钟
5℃
的速率升温至
170℃
，再以每分钟
10℃
的速率升温至
250℃
，维持
10
分钟；进样口温度：
245~255℃
；柱流量：
0.9~1.1ml/min
；分流进样，分流比：
10:1
；进样量：1μ
l。3.
根据权利要求1或2所述的氟比洛芬中基因毒性杂质的分析方法，其特征在于，质谱条件为：
EI
源温度：
230℃
；电子能量：
70eV
；溶剂延...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏艳红，徐汨，王皖，张幸，
申请(专利权)人：湖南九典制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：