利用制造技术

本发明专利技术公开了一种利用

【技术实现步骤摘要】
利用SSR指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法


[0001]本专利技术涉及一种利用
SSR
指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法，属于分子生物学

。

技术介绍

[0002]古茶树，是指树龄
100
年以上的野生茶树或栽培型茶树
。
古茶树大部分生长在空气清洁
、
生态环境良好
、
远离城市的山林中
。
在茶与天然林复合生态环境下生长的古树茶品质独特
、
安全，其独特的风味深受消费者喜爱，非常畅销
。
目前茶农种植以及改良的茶树品种大部分是从古茶树中选育而来
。
[0003]近些年来，随着国家对古茶树保护条例的不断完善，越来越多的育种者对古茶树保护的意识增强，积极申请古茶树保护
。
这其中，对古茶树进行精准鉴定是保护
、
研究
、
利用古茶树的重要措施
。
[0004]SSR
指纹图谱技术是一种分子标记技术，是近年来随着分子生物学发展而发展起来的一种应用性遗传种质分析方法，具有稳定性好
、
操作简单
、
准确率高等优点，近年来在植物遗传多样性分析
、
种质鉴定
、
品种进化分析等方面得到了广泛的应用
。
[0005]本申请的专利技术人在安徽省各地走访中发现岳西县竹山古茶园中存在一颗有
300
～
500
年历史的古茶树
(
照片如图1所示
)
，标记为岳西古茶树1号，该古茶树叶形独特，植株特征为：灌木型，树姿半开张，中叶类，叶椭圆形，叶色深绿，叶面隆起，叶身稍内折，叶缘平，叶尖渐尖，叶齿锐度中等
、
较密，叶质较硬
(
叶片的照片如图2所示
)。
抗病虫害和抗逆境能力较强，来自岳西县的省级良种“石佛翠”有可能是从该古茶树上选育而来，或者和该古茶树亲缘关系较近
。
但是本地并没有对其进行有效管理和保护
。

技术实现思路

[0006]针对上述现有技术，本专利技术提供了一种利用
SSR
指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法
。
本专利技术还提供了用于鉴别岳西古茶树1号的
SSR
引物
。
[0007]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0008]一种利用
SSR
指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法，包括以下步骤：
[0009](1)
提取待检测植株的基因组
DNA
；
[0010](2)
以待测植株的基因组
DNA
为模板，利用
SSR
引物分别进行
PCR
扩增；
[0011]所述
SSR
引物包括4对特异性引物，具体如下：
[0012]SSR 1
‑
F
：5’‑
GTACCATTCCTCAATTGGGTTC
‑3’
，如
SEQ ID NO.13
所示；
[0013]SSR 1
‑
R
：5’‑
TTTATTTTCCACGAGTTCTTAT
‑3’
，如
SEQ ID NO.14
所示；
[0014]SSR 9
‑
F
：5’‑
AGTCTCTATCACCGACCATCAC
‑3’
，如
SEQ ID NO.15
所示；
[0015]SSR 9
‑
R
：5’‑
CTGACCTGGAAAATTCCTCGAC
‑3’
，如
SEQ ID NO.16
所示；
[0016]SSR 14
‑
F
：5’‑
CCCAAATGCTCTATTAGTCTCA
‑3’
，如
SEQ ID NO.17
所示；
[0017]SSR 14
‑
R
：5’‑
AGTCAGTCTTCTTCTTTGTCCT
‑3’
，如
SEQ ID NO.18
所示；
[0018]SSR 34
‑
F
：5’‑
GAATCCTGAAACTGAATTGTCC
‑3’
，如
SEQ ID NO.19
所示；
[0019]SSR 34
‑
R
：5’‑
GTAGGAATAAGAGGCACCACAA
‑3’
，如
SEQ ID NO.20
所示；
[0020]3)
检测
PCR
扩增产物，如果同时满足以下条件，则表明待测植株的品种为岳西古茶树1号：
[0021]①
SSR
引物
SSR 1
‑
F/R
的扩增产物中出现
186bp
的特征条带；
[0022]②
SSR
引物
SSR 9
‑
F/R
的扩增产物中出现
203bp
和
206bp
的特征条带；
[0023]③
SSR
引物
SSR 14
‑
F/R
的扩增产物中出现
243bp
和
246bp
的特征条带；
[0024]④
SSR
引物
SSR 34
‑
F/R
的扩增产物中出现
199bp
和
213bp
的特征条带
。
[0025]进一步地，所述步骤
(1)
中，待检测植株选自谷雨香
、
石佛翠
、
岳西
901、
石佛香
、
铁观音
、
舒茶早
、
安徽3号
、
迎霜
、
浙农
117、
槠叶齐
、
岳西古茶树1～
19
号中的任意一种或两种以上
。
[0026]进一步地，所述步骤
(1)
中，采用
CTAB
法从待检测植株的鲜叶或干茶中提取基因组
DNA。
[0027]进一步地，所述步骤
(2)
中，
PCR
扩增的反应总体系为
10
μ
L
，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种利用
SSR
指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)
提取待检测植株的基因组
DNA
；
(2)
以待测植株的基因组
DNA
为模板，利用
SSR
引物分别进行
PCR
扩增；所述
SSR
引物包括4对特异性引物，具体如下：
SSR 1
‑
F
：5’‑
GTACCATTCCTCAATTGGGTTC
‑3’
，如
SEQ ID NO.13
所示；
SSR 1
‑
R
：5’‑
TTTATTTTCCACGAGTTCTTAT
‑3’
，如
SEQ ID NO.14
所示；
SSR 9
‑
F
：5’‑
AGTCTCTATCACCGACCATCAC
‑3’
，如
SEQ ID NO.15
所示；
SSR 9
‑
R
：5’‑
CTGACCTGGAAAATTCCTCGAC
‑3’
，如
SEQ ID NO.16
所示；
SSR 14
‑
F
：5’‑
CCCAAATGCTCTATTAGTCTCA
‑3’
，如
SEQ ID NO.17
所示；
SSR 14
‑
R
：5’‑
AGTCAGTCTTCTTCTTTGTCCT
‑3’
，如
SEQ ID NO.18
所示；
SSR 34
‑
F
：5’‑
GAATCCTGAAACTGAATTGTCC
‑3’
，如
SEQ ID NO.19
所示；
SSR 34
‑
R
：5’‑
GTAGGAATAAGAGGCACCACAA
‑3’
，如
SEQ ID NO.20
所示；
(3)
检测
PCR
扩增产物，如果同时满足以下条件，则表明待测植株的品种为岳西古茶树1号：
①
SSR
引物
SSR 1
‑
F/R
的扩增产物中出现
186bp
的特征条带；
②
SSR
引物
SSR 9
‑
F/R
的扩增产物中出现
203bp
和
206bp
的特征条带；
③
SSR
引物
SSR 14
‑
F/R
的扩增产物中出现
243bp
和
246bp
的特征条带；
④
SSR
引物
SSR 34
‑
F/R
的扩增产物中出现
199bp
和
213bp
的特征条带
。2.
根据权利要求1所述的利用
SSR
指纹图谱鉴别岳西古茶树1号的方法，其特征在于：所述步骤
(1)
中，待检测植株选自谷雨香
、
石佛翠
、
岳西
901、
石佛香
、
铁观音
、
舒茶早
、
安徽3号
、
迎霜
、
浙农
117、
槠叶齐
、
岳西古茶树1～
19
号中的任意一种或两种以上
。3.
根据权利要求1所述的利用
SSR<...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘升锐，陶玲玲，韦朝领，朱俊彦，费月，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：