ASIC1制造技术

本发明专利技术公开了

【技术实现步骤摘要】
ASIC1在制备神经病理性疼痛治疗药物中的应用


[0001]本专利技术属于医学
，具体涉及
ASIC1
在制备神经病理性疼痛治疗药物中的应用
。

技术介绍

[0002]神经病理性疼痛是一种由神经系统原发性损伤和功能障碍引起的慢性痛
。
其临床特点是顽固性强，发病率高，病程长，痛觉过敏在数周
、
数月乃至数年内仍然持续存在
。
目前治疗慢性神经病理性疼痛的关键难题在于其发生
、
发展机制还不完全清楚
。
过去很多年的研究，都集中在神经元，发现初级感觉神经元兴奋性增加导致的外周敏化，以及炎性介质作用于中枢神经元产生的中枢敏化，是神经病理性痛发生和维持的重要病理基础
。
但近些年越来越多的证据表明：在神经病理性痛的发生
、
发展中，神经胶质细胞发挥着重要的作用
。
神经胶质细胞主要包括中枢神经系统的胶质细胞：星型胶质细胞，少突胶质细胞以及小胶质细胞；以及周围神经系统的胶质细胞：施万细胞和卫星细胞
。
研究表明：在脑和脊髓中，神经损伤后，激活的小胶质细胞及活化的星型胶质细胞可释放多种疼痛相关的细胞因子，趋化分子等物质调节神经元的兴奋性，促进慢性神经病理性痛的发生
、
发展和维持；而抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的激活，可阻断或缓解多种慢性神经痛
。
在周围神经系统中，卫星细胞包绕着背根神经元，其激活早于中枢神经系统的神经胶质细胞，在神经病理性痛的发生过程中，起着重要作用
。
然而，施万细胞在周围神经损伤后，可分泌多种与疼痛相关的促炎
/
抑炎因子，但其在神经病理性痛发生
、
发展及维持过程中的作用及可能机制，目前仍知之甚少
。
[0003]施万细胞作为周围神经系统特异的胶质细胞，支持
、
保护轴突，包绕其形成髓鞘
。
研究表明，施万细胞的功能极其活跃，在周围神经系统发育过程中，它通过分泌神经营养因子和信号分子，产生细胞外基质和细胞黏附分子等，在营养神经元
、
调节神经信号传导
、
维持内环境稳定等多方面都起着重要作用；在神经损伤的病理情况下，施万细胞可以清除变性崩解物，分泌促进轴突生长的多种营养因子，对轴突起黏附趋化作用等，形成对修复再生有利的微环境，促进损伤轴突的再生
。
而稳定的胞外微环境，尤其是
pH
，对细胞发挥正常的生理功能至关重要，正常生理环境下，细胞受到各种
H
+
转运体的精密调控，细胞外
pH
通常维持在
7.2
‑
7.4。
在病理环境下，如神经损伤
、
炎症
、
缺血，由于乳酸和
ATP
水解产生过多的
H
+
，导致组织酸化，严重时细胞外
pH
可以降低至
5.0
‑
6.0
，酸化的微环境可以激活各种蛋白和离子通道，进而调节细胞的功能
。
周围神经损伤后，局部组织酸化，
pH
降低，施万细胞如何感知和应答胞外酸性微环境目前还不确定
。
[0004]酸敏感离子通道（
Acid
‑
sensing ion channels, ASICs
）是一类能够在很大
pH
范围内感受胞外
H
+
变化的配体门控阳离子通道，属于上皮
/
退化通道（
Degeneration
‑
Epithelial sodium channel, DGE
‑
ENaC
）超家族的一个分支
。ASICs
被胞外
H
+
激活后，对阳离子有一定的选择性，
Na
+
>Ca
2+
>K
+
。
目前为止，发现了7种
ASICs
蛋白亚型，
1a
，
1b
，
2a
，
2b
，3，4和5，分别由5个基因编码（
ACCN1
‑5）
。
研究发现，
ASICs
在中枢和周围神经系统中都有广泛性
的表达
。
在中枢神经系统中，不同
ASICs
亚型在神经元和神经胶质细胞中都有表达，其激活与多种生理和病理过程有关，例如疼痛，学习和记忆，恐惧，焦虑，缺血，退行性病变等；在周围神经系统中，其主要表达在感觉神经元，分布于胞体和突起，对伤害性刺激及机械刺激的感受具有重要意义
。
然而，施万细胞是否表达
ASICs
，能否被胞外酸性微环境激活，释放活性物质，参与神经病理性疼痛调节，目前仍不确定
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是研究施万细胞
ASICs
在慢性神经病理性疼痛中的作用，为
ASIC1
在细胞层面，作为治疗靶点提供更有力的证据
。
[0006]首先，本专利技术通过
real
‑
time qPCR
检测发现，与其它酸敏感离子通道亚型相比，施万细胞主要表达
ASIC1
；利用
western blotting
，免疫荧光检测发现，酸性细胞外液（
pH5
）模拟的酸性胞外环境以及慢性压迫性损伤诱导的慢性神经病理性疼痛均能显著引起
ASIC1
的表达增加
。
之后，利用
ASICs
抑制剂
amiloride
抑制
ASICs
的功能，通过机械痛及热痛的行为学检测发现，
amiloride
能有效缓解慢性压迫性损伤诱导的慢性神经病理性疼痛中的机械痛；同时，利用
P0
‑
Cre
小鼠及
ASIC1 MIR30shRNA
‑
AAV
病毒特异性敲降施万细胞
ASIC1
的表达，发现其也能显著缓解慢性压迫性损伤诱导的机械痛
。
[0007]本专利技术确定了施万细胞中主要表达
ASIC1
，通过体内外模型模拟损伤后微环境发现，损伤微环境能显著上调
ASIC1
的表达，在小鼠背根神经节中，
ASIC1
主要表达在胞体，通过神经外膜下给予
ASICs
抑制剂
amiloride
，能显著改善慢性压迫性损伤诱导的机械痛，而通过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. ASIC1
在筛选神经病理性疼痛治疗药物中的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物抑制施万细胞
ASIC1
的表达或功能
。3.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述药物选自核酸分子
、
碳水化合物
、
脂类
、
小分子化...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦中亚，凌卓敏，陈方宇，陈罡，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：