一种冻干口服轮状减毒活疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种冻干口服轮状减毒活疫苗及其制备方法和应用，属于病毒疫苗制剂技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种冻干口服轮状减毒活疫苗及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于病毒疫苗制剂
，尤其涉及一种冻干口服轮状减毒活疫苗及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]轮状病毒
(RV)
属于呼肠病毒科家族，为二十面体的
RNA
病毒，直径约
70nm
，无囊膜，轮状病毒有3层结构
(
外层衣壳
、
内层衣壳和核心
)
，中间包裹着含有
11
个节段的双链
RNA
基因，编码6种结构蛋白和6种非结构蛋白
(VPl
‑
VP4
，
VP6
，
VP7
，
NSPl
‑
NSP6)。
其中结构蛋白
VP4
和
VP7
都带有特异性的抗原决定簇，可诱导产生血清特异性的中和抗体，并在体内诱导发生血清特异保护免疫应答
。VP6
是数量最多的结构蛋白，具有群特异性抗原决定簇；非结构蛋白
NSP4
具有肠毒素作用
。
[0003]轮状病毒是一种普遍存在的病原体，根据血清学分类方法，可将已鉴定出的轮状病毒毒株可分为
A
‑
J 10
个群，引起婴幼儿和幼龄动物腹泻主要为
A
群，又将
A
群轮状病毒分为
P
血清型
(protease sensitive)
和
G
血清型
(glycoprotein)。
最新研究表明，目前已鉴定出可感染人和动物的血清型中，有
32
种
G
血清型和
47
种
P
血清型，其中以为
G1P、G2P、G3P、G4P
和
G9P
为主要流行株
。
[0004]轮状病毒是全球5岁以下儿童严重的脱水性腹泻的主要致病原因，全球每年约有
50
万
‑
60
万儿童死于轮状病毒引起的腹泻，其中
90
％以上的死亡儿童来自发展中国家，在非洲和亚洲低收入国家造成了严重的疾病负担
。
接种疫苗是目前公认的预防轮状病毒感染的有效方法之一，也是降低婴幼儿轮状病毒腹泻发病率和死亡率的重要手段
。
[0005]目前国内外已有6家轮状病毒疫苗上市，均为口服减毒活疫苗；全球已有近
100
个国家将轮状病毒疫苗纳入其国家免疫计划，但轮状病毒仍然是五岁以下儿童死亡的主要原因之一，大多数死亡发生在卫生保健基础设施和可及性有限的中低收入国家资源贫乏的环境中
。
据统计，仍有超过
8800
万婴儿无法获得轮状病毒疫苗
。
全球实施疫苗的障碍包括成本
、
生产能力有限
、
低收入国家疗效欠佳以及安全问题
。
且已上市轮状病毒疫苗针对的接种对象年龄下限仍为6周的婴儿
。
新生儿从出生到接种第一剂疫苗之前的6‑8周仍然有暴露于轮状病毒的风险
。
为了进一步扩大免疫范围，减小轮状病毒感染风险，需要开发一种在出生后可以直接接种的疫苗
。
[0006]RV3
病毒
(G3P)
是
1977
年从澳大利亚墨尔本健康新生儿粪便中分离获得的自然减毒株，研究发现新生儿自然感染
RV3
病毒后的3年内，对异型轮状病毒株的感染具有交叉保护作用，且可以预防严重疾病
。
国外使用该病毒制备的
RV3
‑
BB
疫苗为口服液体制剂，该疫苗的临床研究表明，该疫苗具有良好的安全性和免疫原性，可用于新生儿
。
[0007]对于口服轮状病毒疫苗，在低
pH
胃酸环境下，轮状病毒的滴度会受到影响，因此目前上市疫苗成分中均含有中和胃酸的缓冲液
。
考虑到6月龄以下的幼儿的胃酸含量约为
0.4mEq
，而口服疫苗后，其在胃里面通过的时间约为
15
‑
30
分钟，期间分泌的胃酸量约
0.4mEq。
[0008]文献报道的
RV3
‑
BB
疫苗对于胃酸的目标中和能力为
0.4mEq
，由于
RV3
病毒相较于其它轮状病毒对酸性环境更敏感，因此，为了更好地保护
RV3
病毒，避免效力损失，需要提高疫苗中和胃酸的能力
。

技术实现思路

[0009]为解决上述问题，本专利技术提供一种冻干口服轮状减毒活疫苗，包括病毒无菌组合物；
[0010]其中，所述病毒无菌组合物包括
RV3
病毒原液
、
蔗糖
、
甘氨酸
、
聚山梨酯
80
和氯化钠；所述
RV3
病毒原液中包括自然减毒株
RV3
病毒
。
[0011]优选地，所述病毒无菌组合物中各组分的含量，在单位剂量的所述冻干口服轮状减毒活疫苗包括如下：
[0012]RV3
病毒，滴度
≥6.5lgFFU/
剂；
[0013]蔗糖，
42mg/mL
‑
70mg/mL
；
[0014]甘氨酸，
25mg/mL
‑
30mg/mL
；
[0015]聚山梨酯
80
，
0.5mg/mL
‑
0.7mg/mL
；
[0016]氯化钠，
2.5mg/mL
‑
3.6mg/mL。
[0017]优选地，所述冻干口服轮状减毒活疫苗中还包括稀释液；
[0018]所述稀释液中包括：磷酸二氢钠一水合物
、
枸橼酸钠
、
蔗糖和氢氧化钠
。
[0019]优选地，所述稀释液中各组分的含量，在单位剂量的所述冻干口服轮状减毒活疫苗包括如下：
[0020]磷酸二氢钠一水合物，
48mg
‑
76mg
；
[0021]枸橼酸钠，
206mg
‑
235mg
；
[0022]蔗糖，
250mg/mL
‑
350mg/mL
；
[0023]氢氧化钠，
9.9mg/mL
‑
11.5mg/mL。
[0024]此外，为解决上述问题，本专利技术还提供如上述任一项所述冻干口服轮状减毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种冻干口服轮状减毒活疫苗，其特征在于，包括病毒无菌组合物；其中，所述病毒无菌组合物包括
RV3
病毒原液
、
蔗糖
、
甘氨酸
、
聚山梨酯
80
和氯化钠；所述
RV3
病毒原液中包括自然减毒株
RV3
病毒
。2.
如权利要求1所述冻干口服轮状减毒活疫苗，其特征在于，所述病毒无菌组合物中各组分的含量，在单位剂量的所述冻干口服轮状减毒活疫苗包括如下：
RV3
病毒，滴度
≥6.5lgFFU/
剂；蔗糖，
42mg/mL
‑
70mg/mL
；甘氨酸，
25mg/mL
‑
30mg/mL
；聚山梨酯
80
，
0.5mg/mL
‑
0.7mg/mL
；氯化钠，
2.5mg/mL
‑
3.6mg/mL。3.
如权利要求1所述冻干口服轮状减毒活疫苗，其特征在于，所述冻干口服轮状减毒活疫苗中还包括稀释液；所述稀释液中包括：磷酸二氢钠一水合物
、
枸橼酸钠
、
蔗糖和氢氧化钠
。4.
如权利要求3所述冻干口服轮状减毒活疫苗，其特征在于，所述稀释液中各组分的含量，在单位剂量的所述冻干口服轮状减毒活疫苗包括如下：磷酸二氢钠一水合物，
48mg
‑
76mg
；枸橼酸钠，
206mg
‑
235mg
；蔗糖，
250mg/mL
‑
350mg/mL
；氢氧化钠，
9.9mg/mL
‑
11.5mg/mL。5.
如权利要求1‑4任一项所述冻干口服轮状减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，包括：制备得到
RV3
病毒原液，以及，利用所述
RV3
病毒原液
、
蔗糖
、
甘氨酸
、
聚山梨酯
80
和氯化钠制备得到
RV3
无菌组合物；利用磷酸二氢钠一水合物
、
枸橼酸钠
、
蔗糖和氢氧化钠制备得到稀释液
。6.
如权利要求5所述冻干口服轮状减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备得到
RV3
病毒原液，以及，利用所述
RV3
病毒原液
、
蔗糖
、
甘氨酸
、
聚山梨酯
80
和氯化钠制备得到
RV3
无菌组合物，包括：收集带病毒的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈德祥，胡业勤，艾绪露，
申请(专利权)人：成都迈科康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：