一种展示新冠病毒制造技术

本发明专利技术提供了一种展示新冠病毒

【技术实现步骤摘要】
一种展示新冠病毒S蛋白的融合蛋白和重组病毒粒子及其应用
[0001]本申请是申请日为
2021
年
12
月
16
日
、
申请号为
202111541851.3、
专利技术名称为
《
一种展示新冠
S
蛋白的融合蛋白和重组病毒粒子及其应用
》
的分案申请
。


[0002]本专利技术属于生物制品
，具体涉及一种展示新冠病毒
S
蛋白的融合蛋白以及重组病毒粒子及其应用
。

技术介绍

[0003]新冠病毒的免疫原性相对较弱，在以活病毒为载体构建疫苗株时，理想情况下，希望病毒粒子表面或被病毒感染进而表达细胞膜抗原的细胞表面有更多的抗原蛋白展示
。
新冠病毒的
S
蛋白是病毒与宿主细胞膜受体
ACE2
结合，进而感染宿主细胞的关键蛋白
。S
蛋白属于
I
型跨膜蛋白，其在细胞膜上的表达量与跨膜区氨基酸排列有关
。
以新城疫
(Newcastle Disease virus,NDV)
病毒新型冠状重组疫苗株为例，前期研究发现，将新型冠状病毒
(SARS
‑
COV
‑
2)
的
S
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域更换为
NDV F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域后所拯救得到的重组
NDV
‑
COVS
‑
F
病毒，其免疫原性比原始
S
蛋白直接插入
NDV
病毒载体所形成的重组病毒更好
。
然而，将
S
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域更换为
NDV F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域，有极大可能使得
S
蛋白的上膜与
NDV
病毒本身
F
蛋白的上膜形成竞争关系，干扰细胞膜上抗原蛋白的表达或者病毒组装，影响其免疫原性
。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种展示新冠病毒
S
蛋白的融合蛋白和构建的相应重组病毒及其应用
。
[0005]本专利技术提供了一种展示新冠病毒
S
蛋白的融合蛋白，包含新冠病毒
S
蛋白的胞外域序列和含禽副黏病毒科病毒
F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域的序列
。
[0006]优选的，所述禽副黏病毒科病毒包括以下一种或几种血清型：
APMV
‑
2、APMV
‑
3、APMV
‑
4、APMV
‑
5、APMV
‑
6、APMV
‑
7、APMV
‑
8、APMV
‑
9、APMV
‑
10、APMV
‑
11
或
APMV
‑
12
；
[0007]优选的，所述禽副黏病毒科病毒包括以下一种或几种血清型：
APMV
‑
3、APMV
‑
5、APMV
‑7和
APMV
‑8血清型
。
[0008]优选的，所述新冠病毒
S
蛋白的胞外结构域来源于新冠原始毒株或变异株
。
[0009]优选的，所述新冠病毒
S
蛋白的胞外结构域序列还包括以下一种或几种蛋白编码序列：
S2P
，
S6P
，
S2P/GSAS
；
[0010]所述
S2P
是将所述新冠病毒
S
蛋白胞外域进行
K986P
和
V987P
突变所形成的蛋白编码序列；
[0011]所述
S2P/GSAS
蛋白编码序列是在
S2P
基础上将第
682
～
685
位氨基酸
RRAR
突变为
GSAS
所形成的蛋白编码序列；
[0012]所述
S6P
蛋白编码序列是在
S2P
基础上进行
F817P、A892P、A899P
和
A942P
突变所形成的蛋白编码序列
。
[0013]本专利技术提供了一种编码所述融合蛋白的融合基因
。
[0014]本专利技术提供了一种包含所述融合基因的重组病毒载体
。
[0015]优选的，所述重组病毒载体以新城疫病毒载体为骨架载体
。
[0016]优选的，所述融合基因以表达盒子形式插入新城疫病毒载体的
P
基因和
M
基因之间
。
[0017]本专利技术提供了一种由所述重组病毒载体制备得到的重组病毒粒子或疫苗株
。
[0018]本专利技术提供了所述融合蛋白
、
所述融合基因
、
所述重组病毒载体或所述重组病毒粒子或疫苗株在制备防控新冠病毒所致疾病的疫苗中的应用
。
[0019]本专利技术提供的一种展示新冠病毒
S
蛋白的融合蛋白，包括新冠病毒
S
蛋白的胞外域序列和禽副黏病毒科
F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域编码序列
。
本专利技术采用禽副黏病毒科
F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域序列替换新冠病毒
S
蛋白的原始跨膜结构域和胞内结构域后形成的融合蛋白可以解决以下技术问题：
1)
避免融合蛋白的上膜与新城疫病毒
F
蛋白的上膜形成竞争关系；
2)
提高了融合蛋白或重组新城疫病毒免疫小鼠后产生中和抗体的能力，减弱了融合蛋白或重组新城疫病毒产生垃圾抗体的能力，极大地增强了免疫原性
。
可见，
S
蛋白的胞外域编码序列和
APMV
病毒科病毒
(
除
NDV
外
)F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域编码序列相融合所产生的融合基因或蛋白，具有成为优秀新冠疫苗候选抗原的巨大潜力
。
[0020]进一步的，本专利技术具体限定了
APMV
病毒科病毒的种类，其中融合蛋白
S2P
‑
AP3(aa3)、S2P
‑
AP5、S2P
‑
AP7、S2P
‑
AP8
或其编码基因都具有优异的免疫原性，可用于防本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种展示新冠病毒
S
蛋白的融合蛋白，其特征在于，包含新冠病毒
S
蛋白的胞外域序列和含禽副黏病毒科病毒
F
蛋白的跨膜结构域和胞内结构域的序列；所述禽副黏病毒科病毒的血清型为
APMV
‑
7。2.
根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述新冠病毒
S
蛋白的胞外结构域来源于新冠原始毒株或变异株
。3.
根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述新冠病毒
S
蛋白的胞外结构域序列还包括以下一种或几种蛋白编码序列：
S2P
，
S6P
，
S2P/GSAS
；所述
S2P
是将所述新冠病毒
S
蛋白胞外域进行
K986P
和
V987P
突变所形成的蛋白编码序列；所述
S2P/GSAS
蛋白编码序列是在
S2P
基础上将第
682
～
685
位氨基酸
RRAR
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈瑞婷，孙慧敏，毛水花，周孟云，宋家升，
申请(专利权)人：浙江迪福润丝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：