一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法技术

本发明专利技术提供一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，涉及细胞检测技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法


[0001]本专利技术涉及细胞检测
，具体而言，涉及一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法
。

技术介绍

[0002]老年性耳聋，也被称为年龄相关性听力损失
(ARHL)
，是世界范围内最常见的听觉功能障碍
。
据报道，
65
岁以上的人中约有三分之一患有严重的老年性耳聋
。
然而，除了使用助听器外，
ARHL
还无法治愈
。
除了生理和解剖变化，其他因素包括个体遗传易感性
、
环境因素
、
激素
、
耳部感染史和某些全身性疾病的存在与
ARHL
的发展密切相关
。
由于
ARHL
的多因素起源，目前还没有具体的方法来保护或延缓进展性
ARHL。
[0003]ARHL
的标志是血迷宫屏障
(BLB)
完整性的丧失
。BLB
由内皮细胞
(ECs)、
周细胞
、
基底膜和血管周围巨噬细胞样黑素细胞
(PVM/Ms)
紧密连接和粘附连接的结构完整性组成
。ECs、
周细胞和
PVM/Ms
之间的相互作用和串扰维持了血管通透性和听力完整性的精细调节
。
发生血管渗漏，血源性有毒物质流入内耳腔内，损害耳蜗内淋巴稳态，促进毛细胞凋亡，这与许多听力障碍有关，包括
ARHL。
然而，
ECs
和
PVM/ms
调节
BLB
通透性的确切机制尚不完全清楚
。
越来越多的证据证实，内源性白细胞介素包括白细胞介素
8(interleukin 8
，
IL
‑
8)
加重内皮细胞的通透性，导致炎症性疾病和肿瘤的发生
。
顺铂诱导的
PVM/Ms
的激活与耳蜗纹血管损伤进展过程中
IL
‑1β
的增加有关
。
因此，白细胞介素可能对
BLB
的完整性起决定性作用，可作为
ARHL
的潜在治疗靶点
。
[0004]IL
‑8，也称为
CXCL
‑8，最初是从脂多糖
(LPS)
刺激的人血液单个核细胞的上清中纯化出来的
。
通常，在健康组织中检测不到
IL
‑8，但在受伤和
/
或感染组织中其含量明显升高，可以吸引中性粒细胞在炎症部位积聚
。
分泌的
IL
‑8通过与两个高亲和力的
G
蛋白偶联受体：
cxc
趋化因子受体
CXCR1
和
CXCR2
结合，迅速招募并激活炎症反应
。
实际上，小鼠缺乏
IL
‑8的直接同源物，这导致在使用动物模型研究其功能时存在一些障碍
。
然而，趋化因子
CXCL1
和
CXCL2
作为功能性
IL
‑8同源物，作用于
CXCR1/2
受体，参与多种嗜中性粒细胞依赖的病理性动物疾病模型的病理过程
。
因此，携带包含整个人类
IL
‑8基因的细菌人工染色体的小鼠通常被用于研究其在多种疾病中的作用
。
有趣的是，在以发作性眩晕伴波动感音神经性听力损失为特征的梅尼埃病患者血清中观察到
IL
‑8升高
。IL
‑
8/CXCR2
信号通路促进内皮通透性增加
。
在听力障碍疾病中，
IL
‑8与
ECs
通透性之间是否存在关联尚不清楚
。
[0005]因此，设计一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，能够充分的证明白细胞介素8在
ARHL
进展中的作用，是目前亟待解决的问题
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，通过建立合理的动物模型组来设置合理的参考信息，以为后续的数据分析对比提供基础，同时采用不同的方式对白细胞介素8在老年听力损失中的作用
。
以充分证明了白细胞介素8在
ARHL
进展中的作用
。
[0007]第一方面，本专利技术提供一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，包括进行动物模型的建立，完成对动物模型组的分类处理，形成动物模型分类处理信息；根据动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据；获取动物模型中动物的耳蜗，并设置对照组对耳蜗进行提取处理，进行耳蜗细胞凋亡趋势的分析
。
[0008]作为一种可能的实现方式，进行动物模型的建立，完成对动物模型组的分类处理，形成动物模型分类处理信息，包括：获取多个无噪声暴露史
、
无中耳炎史以及无耳毒性药物用药史的小鼠在设定光照和温度的低噪声环境中饲养，并保证小鼠自由饮水和食物；将多个小鼠进行分组，形成不同的动物模型组，并对不同的动物模型组进行对比处理，形成动物模型分类处理信息
。
[0009]作为一种可能的实现方式，将多个小鼠进行分组，形成不同的动物模型组，并对不同的动物模型组进行对比处理，形成动物模型分类处理信息，包括：对多个小鼠按照数量均分为三组，保证每个动物模型组中小鼠的数量不少于
15
，并分别对不同的动物模型组进行以下处理：对动物模型组中的小鼠进行每月一次的等量生理盐水腹腔注射，形成基础动物模型组；对动物模型组中的小鼠进行对比时间间隔的等量病毒载体腹腔注射，形成对照动物模型组；对动物模型组中的小鼠进行对比时间间隔的等量携带白细胞介素8的病毒的腹腔注射，形成目标动物模型组
。
[0010]作为一种可能的实现方式，根据动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据，包括：对基础动物模型组
、
对照动物模型组以及目标动物模型组中的小鼠进行麻醉后，放置在声音衰减舱中，使用扬声器在声音衰减舱中采用不同频率的纯音脉冲进行声音刺激，获取不同动物模型组对声音的范阔，形成第一听觉反应数据，其中：扬声器上使用到的频率包括
4kHz、8kHz、16kHz、24kHz
以及
32kHz。
[0011]作为一种可能的实现方式，根据动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据，包括：对基础动物模型组
、
对照动物模型组以及目标动物模型组中的小鼠在每次到达测量周期后本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在于，包括：进行动物模型的建立，完成对动物模型组的分类处理，形成动物模型分类处理信息；根据所述动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据；获取所述动物模型中动物的耳蜗，并设置对照组对耳蜗进行提取处理，进行耳蜗细胞凋亡趋势的分析，形成细胞凋亡分析结果数据
。2.
根据权利要求1所述的白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在于，所述进行动物模型的建立，完成对动物模型组的分类处理，形成动物模型分类处理信息，包括：获取多个无噪声暴露史
、
无中耳炎史以及无耳毒性药物用药史的小鼠在设定光照和温度的低噪声环境中饲养，并保证小鼠自由饮水和食物；将多个小鼠进行分组，形成不同的所述动物模型组，并对不同的所述动物模型组进行对比处理，形成所述动物模型分类处理信息
。3.
根据权利要求2所述的白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在于，所述将多个小鼠进行分组，形成不同的所述动物模型组，并对不同的所述动物模型组进行对比处理，形成所述动物模型分类处理信息，包括：对多个小鼠按照数量均分为三组，保证每个所述动物模型组中小鼠的数量不少于
15
，并分别对不同的所述动物模型组进行以下处理：对所述动物模型组中的小鼠进行每月一次的等量生理盐水腹腔注射，形成基础动物模型组；对所述动物模型组中的小鼠进行对比时间间隔的等量病毒载体腹腔注射，形成对照动物模型组；对所述动物模型组中的小鼠进行所述对比时间间隔的等量携带白细胞介素8的病毒的腹腔注射，形成目标动物模型组
。4.
根据权利要求3所述的白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在于，根据所述动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据，包括：对所述基础动物模型组
、
所述对照动物模型组以及所述目标动物模型组中的小鼠进行麻醉后，放置在声音衰减舱中，使用扬声器在所述声音衰减舱中采用不同频率的纯音脉冲进行声音刺激，获取不同动物模型组对声音的范阔，形成第一听觉反应数据，其中：扬声器上使用到的频率包括
4kHz、8kHz、16kHz、24kHz
以及
32kHz。5.
根据权利要求4所述的白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在于，所述根据所述动物模型分类处理信息，进行听觉功能的测定，形成听觉功能测定结果数据，包括：对所述基础动物模型组
、
所述对照动物模型组以及所述目标动物模型组中的小鼠在每次到达测量周期后进行麻醉放置在声音衰减舱中，使用扬声器在所述声音衰减舱中采用不同频率的纯音脉冲进行声音刺激，获取不同动物模型组对声音的范阔，形成第二听觉反应数据，其中：所述测量周期从开始实验的第四个月开始，周期间隔时间为2个月
。6.
根据权利要求5所述的白细胞介素8在老年听力损失中作用的验证方法，其特征在
于，所述获取所述动物模型中动物的耳蜗，并设置对照组对耳蜗进行提取处理，进行耳蜗细胞凋亡趋势的分析，形成细胞凋亡分析结果数据，包括：分别获取所述动物模型组中的小鼠的耳蜗和野生型小鼠的耳蜗，制取初始样块；对初始样块进行包埋
、
切片，形成纵...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈帅，骆献阳，周燚，吴俊华，
申请(专利权)人：厦门大学附属第一医院厦门市第一医院，
类型：发明
国别省市：