一种首乌藤多糖的制备方法技术

本发明专利技术涉及首乌藤多糖的制备方法，有效解决首乌藤多糖的制备问题，其方法是，将首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与碱溶液混合，然后水浴回流提取，过滤，合并滤液，调ｐＨ，浓缩，再加入乙醇，静置，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上树脂柱，直到流出液在４７３ｎｍ处的吸收度与树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱树脂柱至ｍｏｌｉｓｈ反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩，加入乙醇，静置，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖；本发明专利技术工艺简单，多糖得率高，含量亦较高，提取的多糖有明显的抗氧化活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药领域，特别是。
技术介绍
中药首乌藤(Caulis Polygoni Multiflori)为蓼科植物何首乌的干燥藤茎，又名夜交藤、棋藤，资源丰富，价廉易得。中医用于治疗失眠多梦、血虚身痛、风湿痹痛；外治皮肤 瘙痒。具有养血安神、祛风通络的功能。目前对首乌藤的研究仅限于蒽醌类化合物(大黄 素、大黄素-6-甲醚、大黄素-8-0-i3-D-葡萄糖甙等)。另有报道，首乌藤醇提物能抑制实 验性大鼠高脂血症，对鹌鹁实验性动脉粥样硬化(AS)有一定的预防和治疗作用，首乌藤有 降低实验动物血脂的功能；复方首乌藤合剂能增强自然衰老小鼠的学习和记忆能力，并对 分别由东莨菪碱、亚硝酸钠和40%乙醇引起的小鼠记忆获得、记忆巩固和记忆再现病理模 型有较明显的改善作用。研究表明，首乌藤中的主要活性成分首乌藤多糖可显著增强小鼠SOD和GSH-Px活 性，有效降低MDA含量，具有很好的抗氧化作用，将成为新一代抗氧化剂，是一种在治疗肿 瘤及抗衰老方面的潜力药。那么，如何将首乌藤多糖从首乌藤中提练出来，提高药用价值， 目前国内外无人涉足，因此，如何研制出一种从首乌藤中提取首乌藤多糖，且多糖得率高的 制备方法为众所期待。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本专利技术之目的就是提供一种首乌藤多糖的 制备方法，可有效解决首乌藤多糖的制备问题。本专利技术解决的技术方案是，将首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与碱 溶液以1 5-30的重量体积比混合，然后用80-95 °C水浴回流提取2_3次，每次l_5h，过 滤，合并滤液，调PH为7，浓缩至首乌藤粉末重量体积的1-2倍，再加入乙醇至含醇量达到 80%，静置12小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加蒸馏水溶 解，得多糖溶解液，上树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与树脂柱上层溶液的吸收度 相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱树脂柱至molish反应无紫色环时停止 收集，将洗脱液浓缩至首乌藤粉末重量体积的0. 5-1倍，加入乙醇至含醇量达到80%，静置 12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入第二次多糖沉淀物重量体积的 1-2倍量的无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥， 得首乌藤多糖；所说的碱溶液是摩尔浓度为0. 05-lmol/L的NaOH水溶液、0. 05-lmol/L的 KOH水溶液、0. 01-lmol/L的Na2CO3水溶液等中的一种；所说的树脂柱，是预处理的树脂柱， 树脂柱的预处理方法是，取树脂用乙醇浸泡24小时，湿法装柱，继续用乙醇作流动相清洗 树脂，洗至流出的乙醇与水混合不呈白色混浊为止，再以蒸馏水作流动相通过树脂层，洗净 乙醇，树脂柱湿态(即预处理的树脂柱)保存备用；所说的树脂为DA-201、D101、HPD-600、 AB-8、XDA-6、LSA-20、CAD-45、D860021等中的一种；所说的乙醇为质量浓度95%的乙醇或无水乙醇；所说重量体积是指固体用g计，液体用ml计，以下同。本专利技术工艺简单，多糖得率高，含量亦较高，提取的多糖有明显的抗氧化活性。具体实施例方式以下结合实际情况对本专利技术的具体实施方式作详细说明。实施例1 将100克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为 0. 07-0. 8mol/L (具体可采用0. 2mol/L)的NaOH水溶液800mL混合，85°C水浴回流提取5h， 过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0. 07-0. 8mol/L(具体可 采用0. 2mol/L)的NaOH水溶液550mL，80°C水浴提取4h，过滤，得第二次滤液，并和第一次 滤液合并，用盐酸调PH为7，浓缩至120mL，再加入乙醇至含醇量达到80%，静置12小时， 离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加IOOmL蒸馏水溶解，得多糖溶 解液，上DA-201树脂柱或HPD-600树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与DA-201树 脂柱或HPD-600树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水 洗脱DA-201树脂柱或HPD-600树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩 至IOOmL,加入乙醇至含醇量达到80 %，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀 物，再依次加入20mL的无水乙醇、20mL的丙酮、20mL的乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上 清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖干粉10g，用公知的UV检测方法测的多糖含量是 41. 21%。实施例2将500克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为 0. 07-0. 8mol/L (具体可采用0. 2mol/L)的KOH水溶液7500mL混合，90°C水浴回流提取4h， 过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0. 07-0. 8mol/L(具体可 采用0. 2mol/L)的KOH水溶液5000mL，85°C水浴提取3h，过滤，得第二次滤液，并和第一次 滤液合并，用盐酸调PH为7，浓缩至500mL，再加入乙醇至含醇量达到80%，静置12小时，离 心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加500mL蒸馏水溶解，得多糖溶解 液，上DlOl树脂柱或XDA-6树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与DlOl树脂柱或XDA-6 树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱DlOl树脂柱 或XDA-6树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至500mL，加入乙醇至含 醇量达到80%，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入500mL的 无水乙醇、500mL的丙酮、500mL的乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空 干燥，得首乌藤多糖干粉48g，用公知的UV检测方法测的多糖含量是40. 52%。实施例3将2000克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为 0. 03-0. 8mol/L (具体可采用0. Imo 1/L)的Na2CO3水溶液56000mL混合，95°C水浴回流提取 2h,过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0. 03-0. 8mol/L (具 体可采用0. lmol/L)的Na2CO3水溶液40000mL，90°C水浴回流提取2h，过滤，得第二次滤 液，第二次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0. 03-0. 8mol/L(具体可采用0. lmol/L)的 Na2CO3水溶液30000mL，90°C水浴提取lh，过滤，得第三次滤液，并和第一、第二次滤液合并，用盐酸调PH为7，浓缩至2500mL，再加入乙醇至含醇量达到80%，静置12小时，离心去除 上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加2000mL蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上 AB-8树脂柱或LSA-20树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与AB-8树脂柱或LSA-20树 脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱AB-8树脂柱或 1^八-20树脂柱至11101丨吐本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种首乌藤多糖的制备方法，其特征在于，将首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与碱溶液以１∶５－３０的重量体积比混合，然后用８０－９５℃水浴回流提取２－３次，每次１－５ｈ，过滤，合并滤液，调ｐＨ为７，浓缩至首乌藤粉末重量体积的１－２倍，再加入乙醇至含醇量达到８０％，静置１２小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上树脂柱，直到流出液在４７３ｎｍ处的吸收度与树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱树脂柱至ｍｏｌｉｓｈ反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至首乌藤粉末重量体积的０．５－１倍，加入乙醇至含醇量达到８０％，静置１２小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入第二次多糖沉淀物重量体积的１－２倍量的无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖；所说的碱溶液是摩尔浓度为０．０５－１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ水溶液、０．０５－１ｍｏｌ／Ｌ的ＫＯＨ水溶液、０．０１－１ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ↓［２］ＣＯ↓［３］水溶液中的一种；所说的树脂柱，是预处理的树脂柱，树脂柱的预处理方法是，取树脂用乙醇浸泡２４小时，湿法装柱，继续用乙醇作流动相清洗树脂，洗至流出的乙醇与水混合不呈白色混浊为止，再以蒸馏水作流动相通过树脂层，洗净乙醇，树脂柱湿态保存备用；所说的树脂为ＤＡ－２０１、Ｄ１０１、ＨＰＤ－６００、ＡＢ－８、ＸＤＡ－６、ＬＳＡ－２０、ＣＡＤ－４５、Ｄ８６００２１中的一种。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨云，冯卫生，张寒娟，
申请(专利权)人：河南中医学院，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]