一种融合蛋白制造技术

本发明专利技术公开了一种融合蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种融合蛋白IGF2
‑
Z及在制备抗体药物增敏剂中的应用
(一)

[0001]本专利技术属于靶向药物
，涉及基于溶酶体靶向嵌合体
(LYTACs)
技术的类胰岛素生长因子
‑
2(Insulin
‑
like growth factor 2
，
IGF
‑
2)
融合蛋白质
A(Protein A)
的
Z
结构域的重组蛋白及其制备方法与在提高抗体药物性能中的应用
。
(二)
技术介绍

[0002]抗体药物，主要靶向细胞膜外
(
上
)
的靶标，在恶性肿瘤
、
自身免疫性疾病
、
感染性疾病的治疗上发挥着重要作用
。
然而，抗体药物的研发仍存在不少问题，包括研发技术缺乏创新
、
研发成本高
、
临床研究进展缓慢等，也限制了抗体药物的高速发展
。
[0003]靶向蛋白质降解
(Targeted protein degradation
，
TPD)
技术，在高度选择性靶向致病蛋白的同时，通过泛素蛋白酶体途径
、
靶向溶酶体途径等方式诱导蛋白降解
。
比如，
2022
年诺贝尔奖得主
Carolyn R.Bertozzi
课题组提出的溶酶体靶向嵌合体
>(lysosome
‑
targeting chimeras LYTACs)
，是一种将溶酶体靶向受体
(LTR)、LYTAC、
细胞外靶标蛋白三者相互结合形成三元复合物，进而将细胞外或膜相关蛋白利用溶酶体途径降解的技术
。
在传统的抗体药物通过与靶标进行非共价结合并阻断其相关功能的基础上，该
LYTACs
技术将靶标蛋白进一步降解，提升抗体药物的性能
。
然而，现有的
LYTACs
是将抗体与特异性糖基进行偶联修饰，合成方式困难，且在人体内可能产生较强免疫原性，这些都限制了
LYTACs
的大规模发展
。
[0004]Z
结构域
(Z domain)
是金黄色葡萄球菌表面的蛋白
Protein A
结构域的突变体，能与商用单抗
IgG
的
Fc
段进行高亲和力的结合，可作为一通用的万能抗体连接器
。
目前已有研究将
Z domain
与细胞穿透肽
(CPP)
结合，将胞外的抗体带入到细胞内使抗体发挥作用，但这些方式只能使抗体起到自身免疫的作用，并不能同时降低致病蛋白的表达，从而获得更好的治疗效果
。
[0005]因此，开发一种能够快速且大量获取
、
减少免疫原性的
LYTACs
，对于抗体药物的增效具有重要的意义
。
(三)
技术实现思路

[0006]本专利技术目的是提供一种融合蛋白
IGF2
‑
Z
及其在制备抗体药物增敏剂中的应用，提高抗体药物性能
。
将溶酶体靶向受体
IGF2R
的结合配体类胰岛素生长因子
‑
2(Insulin
‑
like growth factor 2
，
IGF
‑
2)
与
Z domain
融合重组，并在大肠杆菌系统中表达，获得融合蛋白
IGF2
‑
Z。
该融合蛋白完全由基因编码，不需要任何形式的化学修饰，可大规模生产
。
且通过
Z domain
的连接器的作用，
IGF2
‑
Z
能够与各种抗体药物相结合
。
利用
IGF2
‑
Z
作为一种便捷的抗体药物增敏剂，不仅保留抗体药物对癌细胞靶向作用的能力，同时又能将商用抗体药物所靶向的抗原进行降解，降低抗原的表达水平，最终达到了抗体药物增敏的目的，提高抗体药物抗癌效果
、
减少耐药性的产生
。
[0007]本专利技术采用的技术方案是：
[0008]本专利技术提供一种基于溶酶体靶向嵌合体技术的融合蛋白
IGF2
‑
Z
，所述融合蛋白
IGF2
‑
Z
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.1
所示，分子量为
15.3kDa。
[0009]所述融合蛋白
IGF2
‑
Z
主要有两部分构成，用于识别抗体的
Z
结构域
、
起到溶酶体靶向作用的类胰岛素样生长因子
2(IGF2)。
所述的
Z
结构域来源于葡萄球菌蛋白
A
，能够以纳摩尔亲和力与
IgG
的
Fc
区域结合，同时此结构域能够与大多数在售的抗体药物
(Ab)
进行结合，起到万能抗体连接器的作用
。
所述的融合蛋白
IGF2
‑
Z
能够借助
IGF2
靶向哺乳动物细胞膜表面的
IGF2R
受体，形成复合物
(IGF2R/IGF2
‑
Z/Ab/POI
，其中
POI
代表靶标蛋白
Protein of interest)
，利用
IGF2
结合
IGF2R
后诱导
IGF2R
转运至溶酶体的性质，将复合物递送至溶酶体，从而对
POI
进行降解
。
所述的
IGF2R
受体为细胞表面跨膜受体又称
CI
‑
M6PR
受体，是一种溶酶体靶向受体，有
10
％存在于细胞膜上，可以介导带有甘露糖
‑6磷酸
(M6P)
或
IGF2
修饰的蛋白质转运至溶酶体
。
而内吞入溶酶体过程中，随着
pH
的降低，
CI
‑
M6PR
与结合的蛋白发生解离，
CI
‑
M6PR
可再度进入循环回到细胞膜上
。
[0010]本专利技术还提供一种所述融合蛋白
IGF2
‑
Z
在制备抗体药物增敏剂中的应用，所述的应用是将融合蛋白
IGF2
‑
Z本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于溶酶体靶向嵌合体技术的融合蛋白
IGF2
‑
Z
，其特征在于，所述融合蛋白
IGF2
‑
Z
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.1
所示
。2.
一种权利要求1所述融合蛋白
IGF2
‑
Z
在制备抗体药物增敏剂中的应用
。3.
如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的应用是将融合蛋白
...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛璟燕，冯嘉毅，张蓓，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：