水稻镉吸收主效基因制造技术

技术编号:39808331 阅读:6 留言:0更新日期:2023-12-22 02:42
本申请公开了一种水稻镉吸收主效基因

【技术实现步骤摘要】
水稻镉吸收主效基因OsNramp5的SNP分子标记的应用以及检测方法


[0001]本申请属于植物分子育种
,尤其涉及一种水稻镉吸收主效基因
OsNramp5

SNP
分子标记的应用以及检测方法


技术介绍

[0002]稻米被镉污染,影响了粮食安全

培育低镉水稻品种则是最经济有效的应对手段

水稻
OsNramp5
基因编码的蛋白是水稻根部细胞参与二价阳离子的主要转运蛋白,主要吸收
Mn
2+

Cd
2+

Fe
2+
,同时负责这些离子从根部向地上部的运输

[0003]相关技术中,使用
Indel
分子标记检测,步骤繁琐且耗时长,对于大量检测具有局限性,而且对基因型辨别的精准度也不够

[0004]因此,建立一种新的基于
PCR
技术的基因分型方法来快速

准确地鉴定水稻镉低吸收突变体基因
OsNramp5
的基因型将有助于提高水稻低镉育种的效率


技术实现思路

[0005]本申请实施例提供一种水稻镉吸收主效基因
OsNramp5

SNP
分子标记的应用以及检测方法,旨在提供一种新的检测水稻低镉育种的分子标记位点

[0006]第一方面,本申请提供一种水稻镉吸收主效基因
OsNramp5

SNP
分子标记在水稻育种中的应用,所述
SNP
分子标记位于水稻第7号染色体第
8878412bp
处,所述
SNP
分子标记的多态性为
C/T。
[0007]可选地,所述
SNP
分子标记的多态性为
T。
[0008]可选地,所述基因
OsNramp5
的编码区如
SEQ ID NO.1
所示

[0009]可选地,所述
SNP
分子标记位于所述
SEQ ID NO.1
核苷酸序列自5’
端起第
132
位,其碱基为
C

T。
[0010]可选地,所述水稻育种中的应用为鉴定镉低积累水稻品种

[0011]第二方面,本申请提供一种检测镉低积累水稻的方法,包括以下步骤:
[0012](1)
提取待测水稻基因组
DNA
,以其为模板,利用引物组合进行
KASP
反应检测;所述
KASP
引物组合由两条特异性引物和一条通用引物组成,其核苷酸序列为:
[0013]1)
两条特异性引物:
[0014]引物
X
:5’‑
GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTC
‑3’

[0015]引物
Y
:5’‑
GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTT
‑3’

[0016]2)
一条通用引物:
[0017]引物
C
:5’‑
ATCCAAGTAGGCTAAAGACACCAT
‑3’

[0018](2)
检测扩增产物片段中所述基因
OsNramp5
的编码区序列自5’
端起的第
132
位的碱基种类,若碱基种类为
T
,则待测水稻为镉低积累水稻,若碱基种类为
C
,则判定待测水稻不是镉低积累水稻

[0019]可选地,所述两条特异性引物分别携带不同的荧光标记

[0020]第三方面,本申请提供一种用于扩增水稻镉吸收主效基因
OsNramp5

SNP
分子标记的
KASP
引物组合,
KASP
引物组合用于检测中所述基因
OsNramp5
的编码区序列自5’
端起第
132
位的碱基种类,
KASP
引物组合包括:
[0021]1)
两条特异性引物:
[0022]引物
X
:5’‑
GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTC
‑3’

[0023]引物
Y
:5’‑
GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTT
‑3’

[0024]2)
一条通用引物:
[0025]引物
C
:5’‑
ATCCAAGTAGGCTAAAGACACCAT
‑3’

[0026]第四方面,本申请提供一种含有第三方面所述
KASP
引物组合的试剂盒

[0027]第五方面,本申请提供一种引物组合或含有该引物组合的试剂盒在辅助鉴定水稻籽粒镉吸收主效基因
OsNramp5
或鉴定镉低积累水稻品种中的应用,所述引物组合用于检测中所述基因
OsNramp5
的编码区序列自5’
端起第
132
位的碱基种类,引物组合包括:
[0028]1)
两条特异性引物:
[0029]引物
X
:5’‑
GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTC
‑3’

[0030]引物
Y
:5’‑
GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTT
‑3’

[0031]2)
一条通用引物:
[0032]引物
C
:5’‑
ATCCAAGTAGGCTAAAGACACCAT
‑3’

[0033]本专利技术具有如下有益效果:
[0034]本申请的提供的
SNP
分子标记的应用可以有效鉴定
OsNramp5
的基因型,具有操作简单

成本低廉

周期短等优点,应用于水稻分子标记辅助选择中,显著缩短低镉水稻育种的选育周期,具有较高的应用价值

[0035]本申请的检测方法利用
SNP
分子标记,并结合...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种水稻镉吸收主效基因
OsNramp5

SNP
分子标记在水稻育种或水稻种质资源改良中的应用,所述
SNP
分子标记位于水稻第7号染色体第
8878412bp
处,所述
SNP
分子标记的多态性为
C/T。2.
根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述
SNP
分子标记的多态性为
T。3.
根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述基因
OsNramp5
的编码区如
SEQ ID NO.1
所示
。4.
根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述
SNP
分子标记位于所述
SEQ ID NO.1
核苷酸序列自5’
端起第
132
位,其碱基为
C

T。5.
根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述水稻育种中的应用为鉴定镉低积累水稻品种
。6.
一种检测镉低积累水稻的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)
提取待测水稻基因组
DNA
,以其为模板,利用引物组合进行
KASP
反应检测;所述
KASP
引物组合由两条特异性引物和一条通用引物组成,其核苷酸序列为:
1)
两条特异性引物:引物
X
:5’‑
GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTC
‑3’
;引物
Y
:5’‑
GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGAGCCTGCATGGAAAAGGTTT
‑3’

2)
一条通用引物:引物
C
:5’‑
ATCCAAGTAGGCTAAAGACACCAT
‑3’

(2)
检测扩增产物片段中所述基因
OsNramp5
的编码区序列自5’
端起第
132
位的碱基种类,若碱基种类为
T
,则待测水稻为镉低积累水稻,若碱基种...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨远柱周延彪唐倩莹赵新辉常兰唐晓丹周群丰
申请(专利权)人:湖南亚华种业科学研究院湖南隆平高科种业科学研究院有限公司
类型:发明
国别省市:

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