一种靶向制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，公开了一种可靶向

【技术实现步骤摘要】
一种靶向CD55的嵌合抗原受体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种靶向
CD55
的嵌合抗原受体及其应用
。

技术介绍

[0002]肿瘤治疗经历了手术切除
、
放化疗等多种手段的进程，这些方法对于某些肿瘤的治疗效果仍然十分有限
。
随着分子生物学的发展，新的生物技术不断被应用于临床
。
过继细胞免疫治疗（
adoptive cellular immunotherapy,ACI
）作为新的抗肿瘤免疫疗法，经过深入研究用于临床，给癌症患者带来新希望
。ACI
在不损害患者免疫系统及其功能的情况下杀死肿瘤细胞，且能够避免肿瘤免疫逃逸
。
嵌合抗原受体
T
细胞（
chimeric antigen receptor T cell
，
CAR
–
T
）疗法作为重要的免疫治疗手段，其作用机制通过构建能特异性识别肿瘤抗原的嵌合抗原受体（
chimeric antigen receptor
，
CAR
）的基因表达载体，转染
T
细胞诱导细胞表面表达
CAR
，在体内进一步地诱发抗原抗体反应，释放颗粒酶
、
穿孔素，并募集免疫细胞，特异性识别杀伤肿瘤细胞
。
[0003]胶质母细胞瘤（
GBM
）是最常见和恶性程度最高的中枢神经系统肿瘤
。
手术切除
、
放射治疗和化疗等标准治疗方案已将成人的中位生存期提高到
15
个月
。
肿瘤基因组图谱（
TCGA
）根据转录聚类分析将胶质母细胞瘤分为三个亚型：前神经型
、
经典型和间充质型
。
间充质亚型是最具侵袭性和侵袭性的亚型
。
胶质母细胞瘤干细胞（
GSCs
）是
GBM
异质性和恶性的关键驱动因素
。GSCs
具有自我更新
、
增殖
、
分化
、
转移和治疗抵抗的能力，导致
GBM
的异质性
、
进展和侵袭性
。
在
GSCs
增殖过程中，血管新生和中心坏死相继发生，从而引起抗肿瘤免疫反应的抑制和对细胞毒疗法的抵抗
。
[0004]CD55
也称
DAF
，是一种糖磷脂酰肌醇锚定的膜补体调节蛋白，保护细胞免受补体介导的裂解，是补体活化经典通路的主要调节因子
。CD55
通过加速
C3
转化酶的降解来抑制早期补体激活，
C3
转化酶是调节补体级联的中心分子，并阻止
C3b
沉积和抑制膜攻击复合物的形成
。
通过
TCGA
数据库筛选的
GBM
表面标志物中，
CD55
在恶性程度最高的间充质型
GBM
中的表达比在其他两种亚型胶质母细胞瘤中的表达更高，其持续高表达很可能与
GBM
的恶性进展密切相关
。
而目前，以
CD55
作为恶性脑胶质瘤的免疫治疗的靶点尚未见报道
。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的在于构建
CD55
的特异性嵌合抗原受体，制备出靶向
CD55
的特异性嵌合抗原受体修饰的
T
淋巴细胞，所得的嵌合抗原受体修饰的
T
淋巴细胞可以特异性识别并杀伤
CD55
阳性的肿瘤细胞，应用于肿瘤的免疫治疗中
。
[0006]本专利技术的第一方面，提供一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括
CD55
抗原结合结构域
、
跨膜结构域以及胞内信号传导结构域；所述
CD55
抗原结合结构域包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如
SEQ ID NO.9
所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含如
SEQ ID NO.13
所示的氨基酸序列
。
[0007]优选的，所述
CD55
抗原结合结构域为抗
CD55
单链抗体，所述抗
CD55
单链抗体的氨
基酸序列如
SEQ ID NO.3
所示
。
其中
,
所述抗
CD55
单链抗体的重链可变区和轻链可变区分子之间有一个连接肽（
Linker
），其氨基酸序列如
SEQ ID NO.11
所示
。
[0008]优选的，所述胞内信号传导结构域包括串联的
CD137
胞内区和
CD3
ζ
胞内区，
CD137
胞内区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.17
所示，
CD3
ζ
胞内区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.19
所示
。
[0009]优选的，所述跨膜结构域包括人
CD8
跨膜区
CD8
α
Hinge
，其氨基酸序列如
SEQ ID NO.15
所示
。
[0010]优选的，所述的嵌合抗原受体，由
CD8
α
信号肽（
CD8
α
SP
）
、CD55
抗体重链可变区（
CD55 scFv
‑
VH
）
、Linker
区
、CD55
抗体轻链可变区（
CD55 scFv
‑
VK
）
、
人
CD8
α
铰链区（
CD8
α
Hinge
）
、CD137、
免疫受体酪氨酸活化基序
CD3
ζ
串联组成
。
所述的嵌合抗原受体
CD8
α
SP
‑
CD55 scFv VH
‑
Linker
‑
CD55 scFv VK
‑
CD8
α
Hinge
‑
CD137
‑
CD3
ζ
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.1
所示
。
[0011]本专利技术的第二方面，提供编码上述的嵌合抗原受本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括
CD55
抗原结合结构域
、
跨膜结构域以及胞内信号传导结构域；所述
CD55
抗原结合结构域包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如
SEQ ID NO.9
所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含如
SEQ ID NO.13
所示的氨基酸序列
。2.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述
CD55
抗原结合结构域为抗
CD55
单链抗体，所述抗
CD55
单链抗体的氨基酸序列如
SEQ ID NO.3
所示
。3.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内信号传导结构域包括串联的
CD137
胞内区和
CD3
ζ
胞内区，
CD137
胞内区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.17
所示，
CD3
ζ
胞内区的氨基酸序列如
SEQ ID NO.19
所示
。4.
根据权利要求3所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜结构域包括
CD8
α
Hinge
，其氨基酸序列如
SEQ ID NO.15
所示
。5.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，由
CD8
α
SP、CD55 scFv VH、Linker、CD55 scFv VK、CD8
α
Hinge、CD137、CD3
ζ
依次串联构成，嵌合抗原受体的氨基酸序列如
SEQ ID NO.1
所示
。6.
编码权利要求1‑5任一所述的嵌合抗原受体的基因
。7.
根据权利要求6所述的基因，其特征在于，基因的核苷酸序列包含如
SEQ ID NO.2
所示的序列
。8.
利用权利要求1‑5任一所述的嵌合抗原受体修饰
T
细胞的方法，其特征在于，将编码所述嵌合抗原受体的核苷酸序列转染到
T
细胞中，获得可靶向
C...

【专利技术属性】
技术研发人员：张茜，常新霞，彭燕，李扬清，唐奇，汪秀星，冯振卿，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：