面中部发育畸形动物选育方法技术

本发明专利技术公开了一种面中部发育畸形动物选育方法

【技术实现步骤摘要】
面中部发育畸形动物选育方法、辅助选育试剂和预防药物


[0001]本专利技术涉及动物发育畸形预防
，特别涉及一种面中部发育畸形动物的选育方法
、
诊断试剂盒和仪器
。

技术介绍

[0002]面中部发育畸形是颅面部最常见的先天性缺陷之一，其中面中裂是最严重的缺陷，会增加患者的死亡率
。
面中部发育畸形损害患者的颅颌面外观
、
功能，严重影响患儿的身心健康
。
目前并无胚胎发育早期预测面中部发育畸形的方法，且其需要全生命周期的多次手术
、
正畸
、
语音及心理治疗，给家庭和社会带来严重的负担
。
因此，系统研究面中部发育畸形的发病机制
、
早期诊断指标
、
预防策略等显得尤为重要
。
[0003]面中部的主体结构，包括骨
、
软骨等，均由来自神经管背侧的颅神经嵴细胞
(cranial neural crest cells
，
CNCCs)
衍化发育而来
。
在胚胎早期发育过程中，
CNCCs
与上皮细胞和间充质细胞组合构成面部突起结构，包括额鼻突
、
中鼻突
、
侧鼻突
、
上颌突和下颌突
。
中鼻突
、
侧鼻突及上颌突进一步发育形成面中部结构
。BMP(
骨形成蛋白
)
信号通路在胚胎发育过程中起关键作用
。BMPs
的功能主要是通过结合并磷酸化
I
型
BMP
受体介导
。I
型
BMP
受体包括
BMPR1A、BMPR1B
和
ACVR1
，它们和
II
型
BMP
受体形成异源受体复合物并与
BMP
配体结合，之后
I
型
BMP
受体的
GS
区磷酸化，致使细胞质中的
Smad
‑
1,
‑
5,
‑8磷酸化并入核，进而调节下游信号
。
研究发现
BMP
配体及
I
型
BMP
受体在不同时期颅颌面组织呈现特异的时空表达模式
,
且
BMP
信号通路在下颌骨及颚发育过程中起重要作用
。
然而，
BMP
信号在面中部发育中的作用仍不清楚
。
目前尚未发现与
ACVR1
基因有关的面中部发育畸形的报道，相应的治疗方法也未展开过系统研究
。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种面中部发育畸形动物选育方法
、
辅助选育试剂和预防药物，本专利技术将
ca
‑
Acvr1
flox
小鼠和
P0
‑
Cre
小鼠自交之后的显性子代杂交，获得
ca
‑
Acvr1
flox
和
P0
‑
Cre
双阳性的面中部发育畸形动物，该选育方法可为面中部发育畸形研究提供稳定有效的模型动物，基于该模型动物可开发出早期诊断试剂盒
、
诊断仪器和靶向治疗药物
。
[0005]第一方面，本专利技术提供一种面中部发育畸形动物选育方法，包括：
[0006]使
ca
‑
Acvr1
flox
动物和
P0
‑
Cre
动物分别自交，获得
F1
代动物；
[0007]使
F1
代动物中
ca
‑
Acvr1
flox
阳性表达的个体和
P0
‑
Cre
阳性表达的个体杂交，选育出面中部发育畸形动物；所述面中部发育畸形动物的基因型为
ca
‑
Acvr1
flox
和
P0
‑
Cre
双阳性
。
[0008]在上述技术方案的基础上，所述
ca
‑
Acvr1
flox
动物的基因型为
ca
‑
Acvr1
flox/+
；所述
P0
‑
Cre
动物的基因型为
P0
‑
Cre(+)/(
‑
)。
[0009]在上述技术方案的基础上，所述
ca
‑
Acvr1
flox
动物为
Acvr1
基因中插入条件激活
ACVR1
片段条件性过表达
ca
‑
Acvr1
flox/+
杂合动物；所述
P0
‑
Cre
小鼠为
P0
基因启动子区域携
带
Cre
元件的
P0
‑
Cre(+)/(
‑
)
杂合动物
。
[0010]在上述技术方案的基础上，
F1
代动物中
ca
‑
Acvr1
flox
阳性表达的个体的基因型为
ca
‑
Acvr1
flox/+
或
ca
‑
Acvr1
flox/flox
；
F1
代动物中
P0
‑
Cre
阳性表达的个体的基因型为
P0
‑
Cre(+)/(
‑
)
或
P0
‑
Cre(+)/(+)。
[0011]在上述技术方案的基础上，所述动物为哺乳动物，优选为鼠科动物，进一步优选为小白鼠
。
[0012]在上述技术方案的基础上，所述面中部发育畸形动物选育方法还包括：
[0013]分别利用
SEQ ID NO.1
～
SEQ ID NO.4
或
SEQ ID NO.1
～
SEQ ID NO.5
所示的检测引物去检测
F1
代动物的基因型，筛选出
ca
‑
Acvr1
flox
阳性表达的个体和
P0
‑
Cre
阳性表达的个体
。
[0014]第二方面，本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种面中部发育畸形动物选育方法，其特征在于，包括：使
ca
‑
Acvr1
flox
动物和
P0
‑
Cre
动物分别自交，获得
F1
代动物；使
F1
代动物中
ca
‑
Acvr1
flox
阳性表达的个体和
P0
‑
Cre
阳性表达的个体杂交，选育出面中部发育畸形动物；所述面中部发育畸形动物的基因型为
ca
‑
Acvr1
flox
和
P0
‑
Cre
双阳性
。2.
根据权利要求1所述的面中部发育畸形动物选育方法，其特征在于：所述
ca
‑
Acvr1
flox
动物为
Acvr1
基因中插入条件激活
ACVR1
片段条件性过表达
ca
‑
Acvr1
flox/+
杂合动物；所述
P0
‑
Cre
小鼠为
P0
基因启动子区域携带
Cre
元件的
P0
‑
Cre(+)/(
‑
)
杂合动物
。3.
根据权利要求1或2所述的面中部发育畸形动物选育方法，其特征在于：所述动物为鼠科动物
。4.
根据权利要求1或2所述的面中部发育畸形动物选育方法，其特征在于：
F1
代动物中
ca
‑
Acvr1
flox
阳性表达的个体的基因型为
ca
‑
Acvr1
flox/+
或
...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨静文，杨倩，朱玲新，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：