一种抗制造技术

本发明专利技术提供了一种抗

【技术实现步骤摘要】
一种抗TGF
β
的人源化纳米抗体及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种抗
TGF
β
的人源化纳米抗体及其制备方法和用途
。

技术介绍

[0002]转化生长因子
β
(transforming growth factor
β
，
TGF
β
)
是属于调节细胞生长和分化的
TGF
β
超家族
。TGF
β
在细胞的生长
、
分化和免疫功能中发挥重要的调节作用
。TGF
β
可以抑制丝裂原
、
同种异体抗原刺激的
T
细胞增殖或
IL
‑2依赖的
T
细胞生长，也可以抑制
IFN
‑
γ
诱导黑素瘤细胞
MHCⅡ类抗原表达，并且，
TGF
β
还可以抑制
PBMC
中
IFN
‑
γ
和
TNF
‑
α
的产生，并促进
IL
‑6的表达
。
[0003]TGF
β
能够抑制原癌基因
c
‑
myc
的表达，但在肿瘤发展过程中，随着突变的引入或表观遗传修饰的变化后，癌细胞逐渐耐受
TGF
β
信号的抑制作用，最终导致肿瘤的发展
。
近年的研究发现，肿瘤微环境中
TGF
β
增加与免疫逃逸相关，
TGF
β
的增加会增加
T
细胞排斥，阻断
TH1
效应
T
细胞的浸润
。Tauriello
等人发现
TGF
β
阻断使小鼠肝转移癌症模型对
PD1/PDL1
疗法更敏感，而类似的
Mariathasan
等人报道了
TGF
β
阻断和
PD
‑
L1
抗体联用，可以下调基质细胞的
TGF
β
信号通路，促进
T
细胞渗透进肿瘤中，激活强烈的抗肿瘤免疫反应
。
因此开发靶向
TGF
β
信号通路的抗
TGF
β
抗体对肿瘤治疗具有重要意义
。
[0004]基于免疫相关的
TGF
‑
β
/TGF
‑
β
R
通路，全球现已进行了深入的研究
。
但是，目前临床研究中针对
TGF
β
的单抗药物的主要来源是经鼠源抗体改造的抗体，例如
Fresolimumab(
非苏木单抗
)
，它是
Genzyme
公司基于
1D11
鼠源抗体经嵌合改造获得的人源性抗
TGF
β
的单克隆抗体，可同时靶
TGF
β
1、TGF
β
2、TGF
β3三种亚型
。Fresolimumab
是一种分子量为
150KDa
的单链抗体，其分子量较大不利于穿透血脑屏障，且由于该抗体是一种人源化鼠抗，存在一定的免疫风险
。
为了解决上述问题，亟需开发出一种抗
TGF
β
的人源化纳米抗体
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的一个目的在于提供一种表达抗
TGF
β
的人源化纳米抗体的核苷酸分子；本专利技术的另一个目的在于提供一种抗
TGF
β
的人源化纳米抗体及其制备方法和用途
。
[0006]本专利技术还提供了一种核苷酸分子，它的核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示
。
[0007]本专利技术还提供了一种表达载体，它包含上述的核苷酸分子
。
[0008]本专利技术还提供了一种宿主细胞，它包含上述的表达载体
。
[0009]本专利技术还提供了一种人源化纳米抗体，它包括互补决定区
CDR1
‑
CDR3
，
CDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示，
CDR2
的氨基酸序列如
SEQ IDNO:2
所示，
CDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:3
所示
。
[0010]进一步地，它还包括与互补决定区
CDR1
‑
CDR3
交替连接的四个框架区
FR1
‑
FR4
，
FR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
所示，
FR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示，
FR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示，
FR4
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:7
所示
。
[0011]进一步地，它的氨基酸序列如
SEQ ID NO:8
所示
。
[0012]本专利技术还提供了一种制备上述人源化纳米抗体的方法，所述方法包括以下步骤：
[0013](1)
将上述的核苷酸分子连接至表达载体中获得阳性质粒；
[0014](2)
将阳性质粒转化宿主细胞，诱导表达人源化纳米抗体
。
[0015]本专利技术还提供了上述人源化纳米抗体在制备抗
TGF
β
抗体中的用途
。
[0016]进一步地，所述
TGF
β
为
TGF
β
1、TGF2
或
TGF
β3；
[0017]进一步地，所述抗
TGF
β
抗体为预防和
/
或治疗肿瘤的药物
。
[0018]进一步地，所述肿瘤为胶质瘤
、
黑色素瘤
、
肾细胞癌
、
胰腺癌
、
乳腺癌
、
肺癌
、
前列腺癌
、
胆管癌
、
头颈部鳞状细胞癌或子宫颈癌
。
[0019]进一步地，所述黑色素瘤为恶性黑色素瘤，所述肺癌为非小细胞肺癌，所述前列腺癌为晚期前列腺癌，所述头颈本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种核苷酸分子，其特征在于，它的核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示
。2.
一种表达载体，其特征在于，它包含权利要求1所述的核苷酸分子
。3.
一种宿主细胞，其特征在于，它包含权利要求2所述的表达载体
。4.
一种人源化纳米抗体，其特征在于，它包括互补决定区
CDR1
‑
CDR3
，
CDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示，
CDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:2
所示，
CDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:3
所示
。5.
根据权利要求4所述的人源化纳米抗体，其特征在于，它还包括与互补决定区
CDR1
‑
CDR3
交替连接的四个框架区
FR1
‑
FR4
，
FR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
所示，
FR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示，
FR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示，
FR4
的氨基酸序列如
SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东，余鼎，梁洪，付道兴，
申请(专利权)人：成都蓉生药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：