Toll制造技术

本发明专利技术公开一种

【技术实现步骤摘要】
Toll样受体激动剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及一种
Toll
样受体激动剂及其应用
。

技术介绍

[0002]Toll
样受体
(Toll Like Receptors
，
TLRs)
是在多种细胞类型中发现的高度保守的模式识别受体，在先天免疫细胞监视微生物病原体中起着关键作用
。
在人类中已经鉴定到
10
个
TLRs
，它们表达于
T
细胞
、B
细胞
、APC
以及多种非免疫细胞，包括上皮细胞和内皮细胞
。TLRs
定位在细胞的两个不同区域：细胞膜和细胞内小体
。TLR1、2、5
和6存在于质膜，
TLR3、7、8
和9表达于细胞内小体，
TLR4
在两个区域都存在
。TLRs
在肿瘤微环境表达于免疫细胞和肿瘤细胞，其激活可以抑制
Treg
细胞功能，增强
CD8
+
T
细胞的存活
、
增殖和细胞因子释放
。
[0003]迄今为止已有许多应用
TLR
激动剂治疗肿瘤的研究
。
由于
TLR9
的激活可引起树突状细胞
、T
细胞
、B
细胞活化，通过诱导干扰素
‑
αr/>分泌而促进
T
细胞向肿瘤微环境迁移，
TLR9
激动剂在肿瘤治疗领域显示出巨大的潜力
。TLR9
激动剂主要为细菌未甲基化的
CpG DNA
，人工合成的
CpG
寡核苷酸
(CpG oligonucleotide
，
CpG
‑
ODN)
也已被证实可以有效激活
TLR9。CpG
‑
ODN
一般分为
A、B、C
三类：
A
类
CpG
‑
ODN
以含有
CpG
二核苷酸的回文序列为核心，两端为
poly G
尾，磷酸二酯键骨架为部分硫代修饰，通过回文序列和
poly G
形成高级结构，能够活化浆细胞样树突状细胞诱生大量
I
型干扰素，对
B
细胞活性弱；
B
类
CpG
‑
ODN
是一种全硫代修饰的线性
CpG
‑
ODN
，对
B
细胞有很强的免疫刺激活性，但不能活化浆细胞样树突状细胞；
C
类
CpG
‑
ODN
是一类全硫代修饰的
CpG
‑
ODN
，能通过回文序列形成二聚体，兼具
A
型和
B
型
CpG
‑
ODN
的活性，既能活化浆细胞样树突状细胞，又能活化
B
细胞
。CpG
‑
ODN
作为疫苗的辅助成分，用于增强免疫应答，目前已有产品被批准上市，如
HEPLISAV
‑
B
乙型肝炎疫苗
。
除了疫苗外，
TLR9
激动剂还可用于治疗炎症相关疾病和感染疾病等，目前都处于临床阶段
。
[0004]尽管
TLR9
激动剂在肿瘤治疗上具有巨大潜力，但将其开发为抗肿瘤药物存在以下难点：
1)TLR9
激动剂全身性给药可引起全身性炎症，造成较大副作用，且仅有少量药物进入肿瘤微环境，效果较差；
2)
一些研究者使用瘤内注射方式给药，虽然一定程度减少了给药剂量，但药物扩散速度快，仅有很少药物可在瘤内滞留；
3)TLR9
属于胞内受体，裸
CpG
‑
ODN
仅有少量可以进入细胞并发挥作用
。
[0005]目前
TLR9
激动剂主要从防止寡核苷酸被快速降解和增强内吞作用两方面进行优化
。Mologen Ag
公司的产品
Lefitolimod
通过将线性寡核苷酸改造成哑铃状寡核苷酸，延长了寡核苷酸的体内半衰期，但是单药治疗一线治疗后的晚期结直肠癌和一线治疗后的小细胞肺癌的2期和3期临床试验结果不佳，疗效并不明显，所以目前没有正在进行的肿瘤临床试验
。Checkmate
公司的瘤内注射产品
CMP
‑
001
是一种
CpG
‑
A
型的
TLR9
激动剂，通过病毒样颗粒包裹防止寡核苷酸被核酸酶降解，大大延长半衰期
。
但是采用病毒样颗粒装载递送寡核苷酸，其获取工艺繁琐，生产费用较高
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的在于提供一种
Toll
样受体激动剂，具体地，提供一种
TLR9
激动剂，以解决上述技术问题中的至少一个
。
[0007]本专利技术的第二个目的在于提供上述
Toll
样受体激动剂的应用，具体地，提供上述
Toll
样受体激动剂在制备疫苗佐剂或在制备治疗肿瘤的药物中的应用，以解决上述技术问题中的至少一个
。
[0008]本专利技术的第三个目的在于提供一种递送系统，用于递送本专利技术提供的
Toll
样受体激动剂，以解决上述技术问题中的至少一个
。
[0009]本专利技术的第四个目的在于提供一种包含上述递送系统和药学上可接受的一种或多种辅料的药物组合物
。
[0010]根据本专利技术的一个方面，提供了一种
Toll
样受体激动剂，其核苷酸序列包括经修饰的或未经修饰的如
SEQ ID NO:1
～4所示的核苷酸序列中的任意一种
。
[0011]在一些实施方式中，核苷酸的修饰为序列中所有的磷酸二酯键均采用硫代修饰
。
即，将序列中相邻的两个核苷酸之间的
P
＝
O
键替代为
P
＝
S
键
。
[0012]本申请提供的
Toll
样受体激动剂
(
下称为“CpG
‑
ODNs”)
为
C
类
CpG
‑
ODN
，可有效激活
TLR9。
[0013]本专利技术提供的
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Toll
样受体激动剂，其特征在于，其核苷酸序列包括经修饰的或未经修饰的如
SEQ ID NO:1
～4所示的核苷酸序列中的任意一种
。2.
根据权利要求1所述的
Toll
样受体激动剂，其特征在于，所述修饰为将序列中相邻的两个核苷酸之间的
P
＝
O
键替代为
P
＝
S
键
。3.
根据权利要求1或2所述的
Toll
样受体激动剂在制备疫苗佐剂中的应用
。4.
根据权利要求1或2所述的
Toll
样受体激动剂在制备治疗肿瘤的药物中的应用
。5.
根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自结肠癌
、
黑色素瘤
、
非小细胞肺癌
、
肝癌
、
直肠癌
、
乳腺癌
、
头颈部鳞状细胞癌
、
非黑色素瘤皮肤癌
、
乳腺癌
、
宫颈癌
、
胃癌中的至少一种
。6.
递送系统，其特征在于，包括活性成分和脂质成分；所述活性成分包括权利要求1或2所述的
Toll
样受体激动剂，所述脂质成分与权利要求1或2所述的
Toll
样受体激动剂的质量比为
(8
～
12):1
；所述脂质成分的组成包括
DOTAP、DODMA、DSPC、
胆固醇和
PEG
脂质，所述
DOTAP、DODMA、DS...

【专利技术属性】
技术研发人员：白俊，苏菲，李菁，林佳亮，李剑光，李晨，吴玉晶，杨永胜，赵孝斌，
申请(专利权)人：浙江海昶生物医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：