O-制造技术

本发明专利技术属于载药纳米胶束领域，涉及

【技术实现步骤摘要】
O
‑
羧甲基壳聚糖
‑
g
‑
胆甾醇琥珀酸单酯及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于载药纳米胶束领域，涉及
O
‑
羧甲基壳聚糖
‑
g
‑
胆甾醇琥珀酸单酯及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]植物大麻
(Cannabis sativa L.)
提取物大麻二酚
(Cannabidiol
，
CBD)
具有抗炎
、
抗癫痫
、
抗癌
、
抑制冠状病毒活性等多种药理作用
[1
‑
3]。
相比于同源成瘾成分
Δ9‑
四氢大麻酚，
CBD
具有非成瘾
、
不致幻的优势
。
随着
CBD
医用价值逐渐被发掘，截至
2019
年1月，全球有
41
个国家宣布医用大麻合法，超过
50
个国家宣布
CBD
合法
。
我国也分别于
2010
年和
2018
年允许在云南和黑龙江两省合法种植工业大麻，政策的松绑给药用大麻的发展带来机遇
[4]。2018
‑
2020
年，美国
、
欧盟和澳大利亚相继批准英国
GW
制药公司研制的高纯度大麻二酚口服液体制剂上市
[5]，
2019
年销售额为
2.964
亿美元，掀起了多领域关于
CBD
的研究热潮
。
[0003]然而，
CBD
是一种高度亲脂性化合物，水溶性极低，口服生物利用度受溶解性差和首过效应大的双重影响，仅为6％，限制了
CBD
临床应用
[5
‑
7]。
国内外现有文献报道中，增加
CBD
水溶性
、
提高口服生物利用度的研究很少
。Koch
等
[8]制备的
CBD
无定形固体制剂，存在稳定性不好
、
载药量低等问题；
Knaub
等
[9]开发了
CBD
自乳化药物传递系统
(SEDDS
‑
CBD)
，虽改善了
CBD
口服生物利用度，但个体吸收差异性大
、
制剂复杂
、
安全性低
。
[0004]两亲性纳米胶束作为包载药物的新颖形式，其载体材料为生物相容性好
、
可生物降解的两亲性嵌段共聚物，通过物理包裹等方法包载难溶药物，能显著提高药物水溶性，安全性高，且粒径小，组织渗透性
、
细胞穿透性强，还具有缓释控释等优点
[10
‑
12]，可作为
CBD
制剂研究的优良选择，开发高效低毒的两亲性聚合物成为构建
CBD
纳米胶束载药系统的首要目标
。
[0005]羧甲基壳聚糖是一种安全无毒的天然多糖衍生物
[13
‑
15]，保留了壳聚糖的生物黏附性和促吸收性质，分子中含有大量活性氨基和羧基，水溶性较壳聚糖大大增加
[16
‑
19]，将疏水嵌段引入后制备的两亲性聚合物可通过自聚集作用形成具有核
‑
壳结构纳米胶束
。
其疏水性内核包载疏水性药物
(
紫杉醇等
)
，亲水性外壳发挥立体稳定作用使胶束稳定的分散于水性介质中
[20
‑
22]，从而大幅度提高其包载药物的水溶性，延长药物在体内特定部位的滞留时间，提高生物利用度
。
[0006]CBD
经两亲性纳米胶束有效负载，制备得到载药纳米胶束后进行口服给药，进入体内后主要在小肠吸收
[23]。Caco
‑2细胞来源于人结肠腺癌细胞，具有微绒毛结构，能够产生小肠刷状缘上皮相关的酶，细胞培养成熟后可形成完整的细胞单层膜，结构和功能类似于小肠上皮细胞，是国际上公认的研究小肠上皮细胞吸收和转运等功能的最佳模型之一
。
其在体外培养稳定性好，重现性高，与动物实验相比容易操作
、
耗费时间少
、
需要样品量小，广泛应用于药物体外活性快速筛选
、
肠道相关问题的科学研究
。
故可将其作为
CBD
两亲性纳米胶束口服吸收研究的体外模型
。
[0007]具有生物活性的化合物能否在生物体内发挥效应，很大程度上取决于血浆中药物浓度和生物利用度，且给药途径对药物的药代动力学参数有较大影响
。
研究表明，口服给药会由于首过效应的影响极大地限制
CBD
口服生物利用度，而舌下
、
静脉
、
吸入给药等方式会减少
CBD
在胃肠道的吸收，从而对
CBD
的药代动力学参数产生较大影响
[24]。
因此，研究灌胃给药后
CBD
及两种载药纳米胶束在大鼠体内的药代动力学过程，可初步评价
CBD
和
CBD
载药纳米胶束的口服生物利用度差异，为
CBD
制剂临床应用提供理论依据
。
[0008]因此，开发具有水溶性的
CBD
两亲性纳米胶束，改善
CBD
的生物利用度，提升其在肠道的转运效率及抗炎效果，探究
CBD
及其两亲性纳米胶束的吸收及抗炎机制迫在眉睫，本研究将为
CBD
在医药领域的巨大发展提供强大的理论支撑
。
[0009]参考文献：
[0010][1]Xu S S,Zhang H,Li C Z,et al.Cannabidiol promotes fin regeneration and reduces apoptosis in zebrafish embryos[J].Journal of Functional Foods,2021,86.
[0011][2]Hotz J,Fehlmann B,Papassotiropoulos A,et al.Cannabidiol enhances verbal episodic memory in healthy young participants:A randomized clinical trial[J].Journal of Psychiatric Research,2021,143:327
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.O
‑
羧甲基壳聚糖
‑
g
‑
胆甾醇琥珀酸单酯的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)
将胆甾醇与4‑
二甲基氨基吡啶
、
琥珀酸酐溶于二氯甲烷中，在惰性气体保护下进行酯化反应，制得胆甾醇琥珀酸单酯，记为
CHS
；
(2)
将
O
‑
羧甲基壳聚糖溶于水中，得到第一混合液；将步骤
(1)
得到的
CHS
溶于
N,N
‑
二甲基甲酰胺中，得到第二混合液；向第二混合液中加入1‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基
)
碳化二亚胺盐酸盐
、N
‑
羟基琥珀酰亚胺进行活化反应，得到活化液；将活化液加入到第一混合液中进行偶联反应；反应结束后将反应液离心，上清液透析，得到的透析液冷冻干燥，制得
O
‑
羧甲基壳聚糖
‑
g
‑
胆甾醇琥珀酸单酯，记为
CCMC。2.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤
(1)
中，所述胆甾醇与4‑
二甲基氨基吡啶
、
琥珀酸酐的摩尔比为1：1：2；所述酯化反应，反应温度为室温，反应时间为
16
～
32h
；所述惰性气体为氮气
。3.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤
(2)
中，所述第一混合液中
O
‑
羧甲基壳聚糖的浓度为5～
20mg
·
mL
‑1；所述第二混合液中
CHS
的浓度为
10
～
12mg
·
mL
‑1；所述
O
‑
羧甲基壳聚糖与
CHS
的质量比为1～2：1；所述
CHS
与1‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基
)
碳化二亚胺盐酸盐
、N
‑
羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1：
1.5
：
1.5
；所述活化反应，反应温度为室温，活化时间为
60
～
100min
；所述偶联反应，反应温度为
60
～
90℃
，反应时间为
36
～
54h。4.
权利要求1～3中任意一项所述的制备方法制备得到的
O
‑
羧甲基壳聚糖
‑
g
‑
胆甾醇琥珀酸单酯
。5.
权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李睿，阮文辉，郝瑞，陈珏，
申请(专利权)人：山西中医药大学，
类型：发明
国别省市：