变体制造技术

本公开涉及用于治疗或预防疾病的变体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】变体Fc结构域及其用途
[0001]序列声明
[0002]本申请含有已以
ASCII
格式以电子方式提交且据此以引用方式整体并入的序列表
。
在
2022
年2月
24
日创建的所述
ASCII
副本被命名为
50945
‑
072WO2_Sequence_Listing_2_24_22_ST25
，并且大小为
71,230
字节
。

技术介绍

[0003]许多治疗剂
(
诸如小分子治疗剂
)
和生物制剂
(
诸如肽
、
多肽和多核苷酸
)
的效用具有血清半衰期不足的缺点
。
这需要以高频率和
/
或更高剂量施用这些治疗剂，或使用缓释制剂以维持治疗效果所需的血清水平
。
药物的频繁全身施用伴随着相当大的负面副作用
。
例如，频繁的全身注射为受试者带来相当大的不适，造成与施用相关的感染的高风险，并且可能需要住院治疗或频繁就医，特别是当治疗剂需要静脉内施用时
。
此外，在长期治疗中，每日静脉内注射也可导致由血管的反复穿刺引起的组织瘢痕形成和血管病理的显著副作用
。
类似的问题对于所有治疗剂频繁全身施用是已知的
。
所有这些因素导致患者依从性的降低和卫生系统的成本增加
。
[0004]需要增加治疗剂半衰期和功效的新的且更有效的方法
。

技术实现思路

[0005]本公开提供了
Fc
结构域单体
、
包含
Fc
结构域单体的缀合物以及包含
Fc
结构域单体的融合蛋白，其中
Fc
结构域单体是亲本
Fc
多肽
(
例如，
IgG1
或
IgG2
多肽
)
的突变变体
。Fc
结构域单体可包含一个或多个有助于增加半衰期和
/
或功效的突变
。
[0006]所述一个或多个突变可促进或维持
Fc
结构域单体与
Fc
受体
(
例如，新生儿
Fc
受体
(FcRn))
的相互作用
。
例如，当
Fc
结构域单体与一种或多种治疗性分子缀合时，缀合可能会干扰
Fc
结构域单体与
FcRn
的相互作用
。FcRn
结合是理想的，因为它与增加的半衰期相关
。
所描述的
Fc
结构域单体变体促进小分子与变体
Fc
的氨基酸位点的缀合，其中小分子与变体
Fc
的缀合使得对
FcRn
结合的破坏最小化
。
在一些实施方案中，突变掩盖变体
Fc
结构域单体上的缀合位点，使得小分子的缀合不发生在将干扰与
Fc
受体相互作用的位点
。
[0007]所述一个或多个突变还可使制造期间的聚集最小化，从而增加生产并降低成本
。Fc
结构域单体还可优化大小
(
例如，如通过
kDa
或氨基酸残基测量
)
，以使向目标组织的组织分布最大化并且
/
或者使肾清除率最小化
。
[0008]本文所述的
Fc
结构域单体可以与治疗剂缀合
。
治疗剂可以与
Fc
结构域单体的一个或多个赖氨酸残基缀合
。
赖氨酸残基
(
例如，
K246)
突变为除赖氨酸之外的氨基酸残基可阻止治疗剂与该位置缀合
。
当赖氨酸与
Fc
结构域单体的介导功能
(
例如，结合
Fc
受体
)
的一个或多个氨基酸残基接近时，则可能需要防止治疗剂与赖氨酸残基缀合以防止
Fc
结构域单体的功能破坏
。
[0009]在一个方面，本公开提供了一种变体
Fc
结构域单体
(
例如，亲本
Fc
多肽的变体
)。
在一些实施方案中，变体
Fc
结构域单体包含第
246
位的氨基酸取代
(
例如，
K246X
，其中
X
不是赖
氨酸
)。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸选自丝氨酸
、
甘氨酸
、
丙氨酸
、
苏氨酸
、
天冬酰胺
、
谷氨酰胺
、
精氨酸
、
组氨酸
、
谷氨酸或天冬氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是丝氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是甘氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是丙氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是苏氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是天冬酰胺
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是谷氨酰胺
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是精氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是组氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是谷氨酸
。
在一些实施方案中，第
246
位的氨基酸是天冬氨酸
。
氨基酸取代是相对于野生型
Fc
单体氨基酸序列的，例如野生型人
IgG1
或
IgG2。
[0010]在一些实施方案中，变体
Fc
结构域单体包含第
246
位以及
(i)
第
252、254
和
256
位，
(ii)
第
309、311
和
434
位，或
(iii)
第
428
和
434
位的氨基酸取代，其中第
246
位的取代是非赖氨酸的氨基酸
(
例如，非赖氨酸的天本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
246
位的氨基酸取代，其中所述第
246
位的氨基酸不是赖氨酸，并且其中编号是根据如
Kabat
中的
EU
索引
。2.
如权利要求1所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体还包含在以下位置处的氨基酸取代：
(i)252、254
和
256
，
(ii)309、311
和
434
，或
(iii)428
和
434
，并且其中所述第
252
位的取代是酪氨酸，所述第
254
位的取代是苏氨酸，所述第
256
位的取代是谷氨酸，所述第
309
位的取代是天冬氨酸，所述第
311
位的取代是组氨酸，所述第
428
位的取代是亮氨酸，并且所述第
434
位的取代是丝氨酸
。3.
如权利要求1或2所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
246
位的非赖氨酸的氨基酸；第
252
位的酪氨酸；第
254
位的苏氨酸；以及第
256
位的谷氨酸
。4.
如权利要求1或2所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
246
位的非赖氨酸的氨基酸；第
309
位的天冬氨酸；第
311
位的组氨酸；以及第
434
位的丝氨酸
。5.
如权利要求1或2所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
246
位的非赖氨酸的氨基酸；第
428
位的甲硫氨酸；以及第
434
位的丝氨酸
。6.
如权利要求1至5中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸选自丝氨酸
、
甘氨酸
、
丙氨酸
、
苏氨酸
、
天冬酰胺
、
谷氨酰胺
、
精氨酸
、
组氨酸
、
谷氨酸或天冬氨酸
。7.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是丝氨酸
。8.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是甘氨酸
。9.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是丙氨酸
。10.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是苏氨酸
。11.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是天冬酰胺
。12.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是谷氨酰胺
。13.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是精氨酸
。14.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是组氨酸
。15.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是谷氨酸
。16.
如权利要求6所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
246
位的氨基酸是天冬氨酸
。17.
如权利要求1至
16
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体还包含第
220
位的取代
。18.
如权利要求
17
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
220
位的氨基酸是丝氨酸
。19.
如权利要求1至
18
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
356
位的天冬氨酸和第
358
位的亮氨酸
。
20.
如权利要求1至
18
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含第
356
位的谷氨酸和第
358
位的甲硫氨酸
。21.
如权利要求1至
20
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体还包含第
297
位的取代，其中第
297
位不是天冬酰胺
。22.
如权利要求
21
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述第
297
位的氨基酸是丙氨酸
。23.
如权利要求1至
22
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体是人
IgG1
或人
IgG2
的变体
。24.
如权利要求1至
23
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含少于
300
个氨基酸残基
。25.
如权利要求1至
24
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体包含至少
200
个氨基酸残基
。26.
如权利要求1至
25
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的长度介于
240
个和
255
个氨基酸残基之间
。27.
如权利要求1至
23
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的质量介于约
20kDa
和约
40kDa
之间
。28.
如权利要求
27
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的质量介于约
25kDa
和
28kDa
之间
。29.
如权利要求1至
28
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
N
‑
末端包含
Fab
结构域的
10
至
20
个残基
。30.
如权利要求
29
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
N
‑
末端是氨基酸第
198
‑
205
位中的任一者
。31.
如权利要求
30
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
N
‑
末端是
Asn 201。32.
如权利要求
30
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
N
‑
末端是
Val 202。33.
如权利要求1至
32
中任一项所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
C
‑
末端是氨基酸第
437
‑
447
位中的任一者
。34.
如权利要求
33
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
C
‑
末端是
Gly 446。35.
如权利要求
33
所述的变体
Fc
结构域单体，其中所述变体
Fc
结构域单体的
C
‑
末端是
Lys 447。36.
如权利要求1至
35
中任一项所述的变体
Fc...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：奇达拉治疗公司，
类型：发明
国别省市：