一种制造技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种

【技术实现步骤摘要】
一种CRS细胞因子ELISA检测试剂盒及使用方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒及使用方法和应用
。

技术介绍

[0002]细胞因子释放综合征
(CRS)
是一种致命的失控全身炎症反应，
CRS
最常见于一些使用免疫相关药物的患者当中，并且很多免疫治疗药物具有很高的
CRS
诱发风险，随着这些药物的逐渐的广泛使用，对于
CRS
的预防和检测将会变得越来越频繁
。
[0003]而
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒是一种用于检测人体内细胞因子含量常用的检测试剂盒
。
中国专利
CN209417055U
提供了一种细胞因子的
ELISA
检测的试剂盒，其主要通过对于试剂盒的结构设计提高了试剂盒中的试剂的反应速度，提高使用和检测的效率，但是并未有从根本上解决现有的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒质量受样本影响大
、
可能存在交叉反应
、
结果难以获取的技术问题
。
[0004]因此，为了解决上述技术问题，本申请提供了一种可以同时检测多种细胞因子含量，且具有快速获取结果能力的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒
。<br/>
技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术第一方面提供了一种
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，所述试剂盒用料包括：包被酶标板，混合标准品，抗体偶联混合物，
HRP
偶联物，样品稀释液，洗涤液，显色液，终止液和封板膜
。
[0006]作为一种优选的方案，所述混合标准品为
IL
‑
2、IL6、IL10、IFN
‑
γ
，质量比为
1:2:1:1。
[0007]作为一种优选的方案，所述抗体偶联混合物为
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子的特异性检测抗体混合液
。
[0008]作为一种优选的方案，所述
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
的含量比为
300
～
600
：
800
～
1200
：
300
～
600
：
300
～
600pg/mL。
[0009]作为一种优选的方案，所述
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
的含量比为
500
：
1000
：
500
：
500pg/mL。
[0010]作为一种优选的方案，所述特异性检测抗体混合液中稀释液为
20wt
％
CSBuffer
或
3wt
％
BSA
‑
PBS。
[0011]作为一种优选的方案，所述特异性检测抗体混合液中稀释液为
20wt
％
CSBuffer。
[0012]本申请人意外发现，当本申请中采用
500
：
1000
：
500
：
500pg/mL
含量比下的
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子的特异性检测抗体混合液作为抗体偶联混合物时候，不仅能够实现试剂盒半定量检测以及同时4种细胞因子的检测，还能够在此基础上大幅提高检测准确性以及加快结果获取时间
。
本申请人认为：当
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子的特异性检测抗体含量比为
500
：
1000
：
500
：
500pg/mL
时，不仅能够共同促进
[0031]123456789101112AS1T1T3T5T1T9T11T13T15T17T19I21BS1T1T3T5T7T9T11T13T15T17T19T21CS1T1T3T5T7T9T11T13T15T17T19T21DS1T1T3T5T7T9T11T13T15T17T19T21ES2T2T4T6T8T10T12T14T16T18T20T22FS2T2T4T6T8T10T12T14T16T18T20T22GS2T2T4T6T8T10T12T14T16T18T20T22HS2T2T4T6T8T10T12T14T16T18T20T22
[0032]本专利技术第二方面提供了一种上述
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒的应用，包括该
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒在快速
CRS
细胞因子含量检测方法中的应用
。
[0033]有益效果：
[0034]1、
本申请中提供的一种
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，作为半定量检测试剂盒具有优异的检测准确定，并且检测效率高，操作简便，大幅降低了检测成本
。
[0035]2、
本申请中提供的一种
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，采用
500∶1000∶500∶500pg/mL
含量比下的
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子的特异性检测抗体混合液作为抗体偶联混合物，不仅能够共同促进所有目标因子与相应的特异性抗体结合的速度，并且能够配合本申请中采用的单组分显色液降低背景复杂程度，避免背景因为非特异性相互作用增加而增加，从而显色后影响最终数据准确性，最终简化检测过程，提高检测准度和效率
。
[0036]3、
本申请中提供的一种
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒用料包括：包被酶标板，混合标准品，抗体偶联混合物，
HRP
偶联物，样品稀释液，洗涤液，显色液，终止液和封板膜
。2.
根据权利要求1所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述抗体偶联混合物为
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子的特异性检测抗体混合液
。3.
根据权利要求2所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述特异性检测抗体混合液中稀释液为
20wt
％
CSBuffer
或
3wt
％
BSA
‑
PBS。4.
根据权利要求3所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述
IL
‑
2、IL
‑
6、IL
‑
10
和
IFN
‑
γ
四种检测细胞因子与特异性检测抗体混合液中稀释液的质量比为
1:100
～
2000。5.
根据权利要求4所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述
HRP
偶联物为
HRP
‑
链酶亲和素溶液
。6.
根据权利要求5所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述样品稀释液为
0.5wt
％
Casein
‑
Na、3wt
％
BSA
‑
PBS、3wt
％
BSA
‑
0.1
‰
PBST
中的至少一种
。7.
根据权利要求6所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒，其特征在于：所述显色液为单组分显色液
、
双组份显色液中的至少一种
。8.
一种根据权利要求1～7所述的
CRS
细胞因子
ELISA
检测试剂盒的使用方法，其特征在于：步骤包括以下几步：
(1)
将所有试剂盒用料在使用前平...

【专利技术属性】
技术研发人员：许金超，栗红建，张丹，李永锋，刘丽美，张伟男，蔡宇卿，郭彬彬，
申请(专利权)人：江苏谱新生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：