一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法技术

本发明专利技术公开了一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法，通过添加二次滤液，调节微生物生长环境，缩短菌体生长周期，提高菌体得率；通过溴化锂机组降温放罐，既有效预防菌体自溶导致腺苷流失，又节能环保

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法


[0001]本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及到一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法
。

技术介绍

[0002]冬虫夏草是一种珍贵的食药用真菌
。
其体内不仅含有丰富的营养物质，还含有能够对人体多种疾病有预防和治疗功效的功能性成分；比如核苷类
、
甾醇类
、
蝙蝠蛾拟青霉素类等
。
蝙蝠蛾拟青霉是一株从冬虫夏草中分离出来的寄生真菌，利用蝙蝠蛾拟青霉菌株通过深层液态发酵法产生的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中含有与冬虫夏草一致的功能性成分，其优势在于能够人工控制产生大量的菌丝体，同时菌丝体做为蝙蝠蛾拟青霉的初始形态，其多种功能性成分的含量高于子实体
。
此外，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中的腺苷含量也是考察蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉质量水平主要指标之一
(
中国药典规定腺苷含量
≥0.2
％为合格蝙蝠蛾拟青霉菌粉
)。
[0003]腺苷是冬虫夏草中主要的功能性成分，它做为一种内源性核苷广泛分布在人体之中，对人体的许多系统和组织都具有重要的生理学功能
。
腺苷可通过核苷类物质的代谢途径参与到人体的免疫和代谢系统之中，对心血管疾病
、
慢性支气管炎
、
肝硬化
、
高血脂等疾病有显著的预防和治疗功效
。
[0004]在实际大规模生产中，从发酵到提取最终得到的蝙蝠蛾拟青霉菌粉成品腺苷含量并不稳定，甚至会低于中国药典规定标准
。
究其原因，从发酵结束到烘干结束有一段处理时间，在这期间，菌丝就可能会出现腺苷流失的现象
。
[0005]因此，本领域亟需在发酵端和提取端预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中腺苷的流失，从而获得高腺苷的蝙蝠蛾拟青霉菌粉
。

技术实现思路

[0006]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例
。
在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分
、
说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围
。
[0007]鉴于上述和
/
或现有技术中存在的问题，提出了本专利技术
。
[0008]因此，本专利技术的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法
。
[0009]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：包括，
[0010]制备蝙蝠蛾拟青霉种子培养液：
[0011]一级种子培养：将经扩大培养的菌种接种于灭菌后的液体种子培养基培养
36
～
48
小时，得到一级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液；
[0012]二级种子培养：将一级种子培养液接种于灭菌后的液体种子培养基培养
24
～
36
小时，得到二级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液；
[0013]发酵培养：将所得二级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液接种于发酵罐中利用发酵培养基及上批次经微滤膜过滤的二次滤液进行发酵，发酵过程中控制温度在
26
‑
28℃
之间，在发酵液放罐前将温度降至
16
‑
18℃。
[0014]收集菌丝体：将发酵液先通过卧螺离心，再通过碟片离心，得到一次滤液和菌丝体，将一次滤液经微滤膜过滤得到截留菌丝和二次滤液，将所得的菌丝体合并烘干，即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体
。
[0015]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述液体种子培养基，包括，黄豆饼粉2％
、
葡萄糖2％
、
酵母浸粉
0.4
％
、
磷酸二氢钾
0.1
％
、
硫酸镁
0.02
％
、VB10.0001
％
、
生物素
0.0001
％
、
多羟基聚醚
0.05
％
。
[0016]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述制备蝙蝠蛾拟青霉种子培养液，其中，一级种子培养的菌种接种量为
0.1
～2％
(v/v)
，二级种子培养的培养液接种量为
10
～
20
％
(v/v)
，发酵培养的培养液接种量为
10
～
20
％
(v/v)。
[0017]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述发酵培养基，包括，黄豆饼粉2％
、
葡萄糖3％
、
蛋白胨
0.4
％
、
磷酸二氢钾
0.1
％
、
硫酸镁
0.02
％
、VB10.0001
％
、
多羟基聚醚
0.05
％
。
[0018]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述发酵培养，其中，在培养基灭菌前添加二次滤液
。
[0019]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述添加二次滤液，其中，二次滤液为发酵液先经过卧螺离心
、
碟片离心，再经过微滤膜得到的滤液，其中，二次滤液和水的占比各
50
％
。
[0020]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述收集菌丝体，其中，卧螺离心进料速度为
2.2
～
2.3
吨
/
小时，碟片离心机转速维持在
6000rpm/min
左右，微滤膜为陶瓷膜，孔径为
50nm。
[0021]本专利技术的再一目的是，克服现有技术中的不足，提供一种预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法
。
[0022]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：包括，利用溴化锂机组在放罐前进行降温
。
[0023]作为本专利技术所述的一种优选方案，其中：所述溴化锂机组降温，包括，将灭菌及烘干过程中的尾气进行收集，利用尾气余热来进行降温
。
[0024]本专利技术有益效果：
[0025](1)
通过本专利技术方法，使蝙蝠蛾拟青霉菌丝体生长周期缩短
20
％，最终得率提高
20
％以上，蝙蝠蛾拟青霉菌粉腺苷含量损失减少
50
％以上，得到的蝙蝠蛾拟青霉菌腺苷含量高达
0.35
％以上的同时，甘露醇含量稳定在
12
％以上
。
[0026](2)
本专利技术采用降温放罐的方法，通过降低发酵温度，在不杀死蝙蝠蛾拟青霉活性的基础上，有效预本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法，其特征在于：包括如下步骤
:
制备蝙蝠蛾拟青霉种子培养液：制备
PDA
培养基，将
PDA
培养基作为种子培养液使用；一级种子培养：将经过扩大的菌种接种在种子培养中进行培养，得到一级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液；二级种子培养：将一级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液接种在培养基中培养制得二级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液；发酵培养：将二级蝙蝠蛾拟青霉种子培养液接种在发胶罐中同时使用发酵培养基进行发酵培养，放罐前进行降温处理；收集菌丝体：将发酵液进行离心，得到一次滤液和菌丝体，接着进行滤膜过滤得到菌丝和二次滤液，将得到的菌丝体合并烘干，得到蝙蝠蛾拟青霉菌丝体
。2.
根据权利要求1所述的用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法，其特征在于：所述种子培养液具体为按照重量计，黄豆饼粉2％
、
葡萄糖2％
、
酵母浸粉
0.4
％
、
磷酸二氢钾
0.1
％
、
硫酸镁
0.02
％
、VB10.0001
％
、
生物素
0.0001
％
、
多羟基聚醚
0.05
％
。3.
根据权利要求1或2所述的用于预防蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷流失的方法，其特征在于：所述一级种子培养中，所述一级种子的菌种接种量为
0.1
～2％
(v/v)
，二级种子培养基中，菌种接种量为
10
～
20
％
(v/v)
，所述发酵培养中，菌种接种量为
10
～
20
％
(v/v)。4.
根...

【专利技术属性】
技术研发人员：万祥，王鹏，赵伏梅，纪乐军，蔡佳佳，徐庆阳，耿燕，周帅，
申请(专利权)人：江苏神华药业有限公司，
类型：发明
国别省市：