抗制造技术

本发明专利技术的课题在于提供能够用于癌的治疗的抗

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CLDN4
‑
抗CD137双特异性抗体


[0001]本专利技术涉及期待作为用于癌的治疗的药物组合物的有效成分有用的抗
CLDN4
‑
抗
CD137
双特异性抗体
。

技术介绍

[0002]紧密连接蛋白
‑
4(Claudin
‑4，
CLDN4)
为属于紧密连接蛋白家族的四次跨膜蛋白
。
其在上皮细胞
、
内皮细胞中表达，作为构成紧密连接的主要分子发挥重要的作用
。CLDN4
在大肠癌
、
膀胱癌
、
卵巢癌等癌组织中也确认到高表达，暗示了抗
CLDN4
抗体可以应用于癌的治疗或诊断的可能性
(
专利文献
1、
非专利文献
1)。
另外，在动物模型中显示出抗
CLDN4
抗体与抗表皮生长因子受体
(Epidermal growth factor receptor
，
EGFR)
抗体的并用所带来的抗肿瘤效果
(
非专利文献
2)。
[0003]分化簇
137(Cluster of Differentiation 137
，
CD137
，别名4‑
1BB)
为属于肿瘤坏死因子受体超家族
(Tumor Necrosis Factor Receptor Super family
，
TNFRSF)
的分子，已报道其在
T
细胞
、B
细胞
、
自然杀伤细胞
(NK)
细胞
、
树突状细胞
、
嗜酸性粒细胞
、
肥大细胞等免疫细胞表面表达
。
尤其已知，
T
细胞上的
CD137
与抗原呈递细胞上的
CD137
配体结合，作为共刺激分子参与
T
细胞的活化和生存
(
非专利文献
3)。
抗
CD137
激动抗体在动物模型中显示出肿瘤微环境内的免疫细胞的活化介导的抗肿瘤效果
(
非专利文献
4)。
作为抗
CD137
激动抗体的乌瑞芦单抗
(Urelumab)
虽然在临床试验中显示出治疗效果，但也被报道了会引起肝障碍的副作用
(
非专利文献
5)。
[0004]作为能够以低抗体浓度获得癌细胞选择性细胞毒活性的划时代的方法，已报道各种抗体形式的双特异性
T
细胞募集抗体
(bispecific T
‑
cell
‑
recruiting antibodies)。
双特异性
T
细胞募集抗体为包含针对在癌细胞表面表达的肿瘤相关抗原
(Tumor
‑
Associated Antigens
；
TAA)
的抗体
、
和与
T
细胞结合的抗体的双特异性抗体，正在研究这些抗体针对
T
细胞介导的免疫疗法的效果
(
非专利文献
6)。
作为与
T
细胞结合的抗体，大多使用抗
CD3
抗体，现在也在研究开发各种针对
TAA
的双特异性
T
细胞募集抗体
。
[0005]另外，近年来正在积极进行针对
CD137
和
TAA
的双特异性
T
细胞募集抗体的研究
。
正在研究识别作为
TAA
的磷脂酰肌醇蛋白聚糖
3(Glypican3
，
GPC3)、
人表皮生长因子受体2型
(Human Epidermal Growth Factor Receptor Type2
，
HER2)、
程序性细胞死亡配体
1(Programmed Cell Death
‑
Ligand1
，
PD
‑
L1)、
成纤维细胞活化蛋白
(Fibroblast Activation Protein
，
FAP)
的抗
GPC3
‑
抗
CD137
双特异性抗体
、
抗
HER2
‑
抗
CD137
双特异性抗体
、
抗
PDL1
‑
抗
CD137
双特异性抗体
、
抗
FAP
‑
抗
CD137
双特异性抗体等
(
专利文献2和
3、
非专利文献7～
9)。
[0006]然而，迄今为止还没有关于抗
CLDN4
‑
抗
CD137
双特异性抗体的报道
。
[0007]现有技术文献
[0008]专利文献
[0009]专利文献1：国际公开号
2008/114733
号
[0010]专利文献2：国际公开号
2015/156268
号
[0011]专利文献3：国际公开号
2016/177802
号
[0012]非专利文献
[0013]非专利文献1：
Cancer Science,2009:100(9):p.1623
‑
1630
[0014]非专利文献2：
Oncotarget,2018:9(100):p.37367
‑
37378
[0015]非专利文献3：
Cancer Science,2020:111(5):p.1461
‑
1467
[0016]非专利文献4：
Cancer Immunology Immunotherapy,2012:61(5):p.1721
‑
1733
[0017]非专利文献5：
Clinical Cancer Research,2017:23(8):p.1929
‑
1936
[0018]非专利文献6：
mAbs,2017:9(2):p.182
‑
212
[0019]非专利文献7：
Clinical Cancer Resea本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种双特异性抗体，其为包含抗
CLDN4
抗体的重链可变区和轻链可变区
、
以及抗
CD137
抗体的重链可变区和轻链可变区的抗
CLDN4
‑
抗
CD137
双特异性抗体，其中，抗
CLDN4
抗体的重链可变区和轻链可变区为以下的
(a)
或
(b)
中的任意一者：
(a)
包含由序列号2的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号2的氨基酸编号
50
至
66
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号2的氨基酸编号
99
至
114
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号4的氨基酸编号
24
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号4的氨基酸编号
51
至
57
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号4的氨基酸编号
90
至
98
的氨基酸序列构成的
CDR3
的抗
CLDN4
抗体的轻链可变区；或者
(b)
包含由序列号6的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号6的氨基酸编号
50
至
66
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号6的氨基酸编号
99
至
112
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号8的氨基酸编号
24
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号8的氨基酸编号
51
至
57
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号8的氨基酸编号
90
至
98
的氨基酸序列构成的
CDR3
的轻链可变区
。2.
根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，抗
CLDN4
抗体的重链可变区和轻链可变区为以下的
(a)
或
(b)
中的任意一者：
(a)
由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区；或者
(b)
由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号8的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区
。3.
根据权利要求1或2中任一项所述的双特异性抗体，其包含由抗
CLDN4
抗体的包含重链可变区的重链和包含轻链可变区的轻链构成的
IgG
抗体
(
抗
CLDN4 IgG
抗体
)。4.
根据权利要求3所述的双特异性抗体，其在抗
CLDN4 IgG
抗体的
Fc
区包含
LALA
突变
(L234A
和
L235A(
在此，所述突变位置为人
Ig
γ1恒定区中的根据
EU
索引的氨基酸位置
))。5.
根据权利要求3所述的双特异性抗体，其在抗
CLDN4 IgG
抗体的
Fc
区包含
P331G
突变
(
在此，所述突变位置为人
Ig
γ1恒定区中的根据
EU
索引的氨基酸位置
)。6.
根据权利要求3所述的双特异性抗体，其在抗
CLDN4 IgG
抗体的
Fc
区包含
LALA
突变和
P331G
突变
。7.
根据权利要求1～6中任一项所述的双特异性抗体，其中，抗
CD137
抗体的重链可变区和轻链可变区为以下的
(a)
～
(d)
中的任意一者：
(a)
包含由序列号
10
的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
10
的氨基酸编号
50
至
66
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
10
的氨基酸编号
99
至
107
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号
12
的氨基酸编号
24
至
34
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
12
的氨基酸编号
50
至
56
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
12
的氨基酸编号
89
至
98
的氨基酸序列构成的
CDR3
的轻链可变区；
(b)
包含由序列号
14
的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
14
的氨基酸编号
50
至
65
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
14
的氨基酸编号
98
至
107
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号
16
的氨基酸编号
23
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
16
的氨基酸编号
51
至
57
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
16
的氨基酸编号
90
至
100
的氨基酸序列构成的
CDR3
的轻链可变区；
(c)
包含由序列号
18
的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
18
的氨基酸编号
50
至
65
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
18
的氨基酸编号
98
至
107
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号
20
的氨基酸编号
23
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
20
的氨基酸编号
51
至
57
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
20
的氨基酸编号
90
至
100
的氨基酸序列构成的
CDR3
的轻链可变区；或者
(d)
包含由序列号
22
的氨基酸编号
31
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
22
的氨基酸编号
50
至
65
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
22
的氨基酸编号
98
至
110
的氨基酸序列构成的
CDR3
的重链可变区
、
以及包含由序列号
24
的氨基酸编号
23
至
35
的氨基酸序列构成的
CDR1、
由序列号
24
的氨基酸编号
51
至
57
的氨基酸序列构成的
CDR2
和由序列号
24
的氨基酸编号
90
至
100
的氨基酸序列构成的
CDR3
的轻链可变区
。8.
根据权利要求1～7中任一项所述的双特异性抗体，其中，抗
CD137
抗体的重链可变区和轻链可变区为以下的
(a)
～
(i)
中的任意一者：
(a)
由序列号
10
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
12
的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(b)
由序列号
14
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
16
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(c)
由序列号
18
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
20
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(d)
由序列号
22
的氨基酸编号1至
121
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
24
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(e)
由序列号
26
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
26
的氨基酸编号
134
至
242
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(f)
由序列号
28
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
28
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区；
(g)
由序列号
30
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区和由序列号
30
的氨基酸编号
132
至
249
的氨基酸序列构成的重链可变区；
(h)
由序列号
32
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
32
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区；或者
(i)
由序列号
34
的氨基酸编号1至
121
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
34
的氨基酸编号
137
至
247
的氨基酸序列构成的轻链可变区
。9.
根据权利要求7或8中任一项所述的双特异性抗体，其包含含有抗
CD137
抗体的重链可变区和轻链可变区的抗
CD137
单链可变区片段
(
抗
CD137scFv)。10.
根据权利要求9所述的双特异性抗体，其中，抗
CD137scFv
为以下的
(a)
～
(e)
中的任意一者：
(a)
由序列号
26
的氨基酸编号1至
242
的氨基酸序列构成的抗
CD137scFv
；
(b)
由序列号
28
的氨基酸编号1至
244
的氨基酸序列构成的抗
CD137scFv
；
(c)
由序列号
30
的氨基酸编号1至
249
的氨基酸序列构成的抗
CD137scFv
；
(d)
由序列号
32
的氨基酸编号1至
244
的氨基酸序列构成的抗
CD137scFv
；或者
(e)
由序列号
34
的氨基酸编号1至
247
的氨基酸序列构成的抗
CD137scFv。
11.
根据权利要求9或
10
中任一项所述的双特异性抗体，其包含抗
CLDN4 IgG
抗体和抗
CD137scFv
，且在抗
CLDN4 IgG
抗体的重链或轻链羧基末端经由接头连接着抗
CD137scFv
的氨基末端
。12.
一种抗
CLDN4
‑
抗
CD137
双特异性抗体，其为以下的
(a)
～
(j)
中的任意一者：
(a)
含有包含由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
26
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
26
的氨基酸编号
134
至
242
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(b)
含有包含由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
28
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
28
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(c)
含有包含由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
30
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区和由序列号
30
的氨基酸编号
132
至
249
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(d)
含有包含由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
32
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
32
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(e)
含有包含由序列号2的氨基酸编号1至
125
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号4的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
34
的氨基酸编号1至
121
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
34
的氨基酸编号
137
至
247
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(f)
含有包含由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号8的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
26
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
26
的氨基酸编号
134
至
242
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着抗
CD137scFv
的氨基末端
的双特异性抗体；
(g)
含有包含由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号8的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
28
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
28
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(h)
含有包含由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号8的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
30
的氨基酸编号1至
111
的氨基酸序列构成的轻链可变区和由序列号
30
的氨基酸编号
132
至
249
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；
(i)
含有包含由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和包含由序列号8的氨基酸编号1至
109
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CLDN4
抗体的轻链
、
以及包含由序列号
32
的氨基酸编号1至
118
的氨基酸序列构成的重链可变区和由序列号
32
的氨基酸编号
134
至
244
的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗
CD137scFv
，且在该抗
CLDN4
抗体的重链羧基末端经由接头连接着该抗
CD137scFv
的氨基末端的双特异性抗体；或者
(j)
含有包含由序列号6的氨基酸编号1至
123
的氨基酸序列构成的重链可变区的抗
CLDN4
抗体的重链和...

【专利技术属性】
技术研发人员：天田由幸，由利正利，八木繁典，佐竹佳树，平山和德，白井宏树，佐佐木博己，千胁史子，小松将之，
申请(专利权)人：国立研究开发法人国立癌症研究中心，
类型：发明
国别省市：