与绵羊繁殖性状相关的分子标记制造技术

本发明专利技术提供了一种绵羊繁殖性状相关的分子标记

【技术实现步骤摘要】
与绵羊繁殖性状相关的分子标记、特异性引物及应用


[0001]本专利技术涉及绵羊繁殖鉴定
、
育种领域，具体而言，涉及一种与绵羊繁殖性状相关的分子标记
、
特异性引物及应用
。

技术介绍

[0002]中国是养羊大国之一，羊肉营养丰富，容易消化，具有蛋白质含量高
、
胆固醇低等特点，深受消费者喜爱
。
皮山红羊是新疆地区新发现的绵羊品种，其性情温顺，耐粗饲，能很好地适应当地生态环境，高繁殖率是其养殖优势
。BMPR1B(
骨形态发生蛋白受体
1B)
位于绵羊6号染色体，是多种骨形态发生蛋白的膜受体，广泛存在于机体各组织中，主要在卵巢组织中表达
。FecB
是
BMPR1B
基因上的一个突变位点，对排卵有促进作用
。
[0003]但是，目前还尚未有任何报道是关于
FecB
位点与绵羊繁殖性状相关的分子标记
。
[0004]鉴于以上原因，特提出本专利技术
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一目的在于提供一种与绵羊繁殖性状相关的分子标记
、
特异性引物及应用，旨在通过对
BMPR1B
基因进行测序分析，探讨其不同基因型与绵羊繁殖性状的关联性，旨在为提高绵羊高繁的遗传改良方面提供理论基础，加快培育出高繁殖力的优质肉羊新品种，缩短培育进程
。
[0006]本专利技术的第二目的在于提供一种包括上述特异性引物组合的试剂盒，该试剂盒使用方便，可以通过相应的检测方法提炼出试剂
。
[0007]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种与绵羊繁殖性状相关的分子标记，所述分子标记位于皮山红羊的第6号染色体上的
BMPR1B
基因第
29382188
位碱基
FecB
位点，该位点为
T/C
多态性位点
。
[0009]在
NCBI
上公布的绵羊
BMPR1B
基因
mRNA
序列，给序列基因号为：
NM_001009431.1
，序列如
SEQ ID NO.4
所示
。
[0010]其中，
SEQ ID NO.4:
[0011][0012][0013]本专利技术还提供了用于检测上述分子标记的特异性引物组，由上游引物
、
下游引物
以及延伸引物组成，所述上游引物具有
SEQ ID No.1
所示碱基序列，所述下游引物具有
SEQ ID No.2
所示碱基序列，所述延伸引物具有
SEQ ID No.3
所示碱基序列
。
[0014]其核苷酸序列为：
[0015]SEQ ID NO.1:ACGTTGGATGCCAAGATGTTTTCATGCCTC
；
[0016]SEQ ID NO.2:ACGTTGGATGTTCTTCACTACAGAGGAGGC
；
[0017]SEQ ID NO.3:CCTCATCAACACCGTC。
[0018]通常说来，每增加一个核苷酸引物特异性会提高4倍，这样，大多数应用的最短引物长度为
18
个核苷酸
。
引物长度的上限并不很重要，主要与反应效率有关
。
[0019]一般引物的序列中，
G+C
含量一般为
40
％
‑
60
％，一对引物的
GC
含量和
Tm
值应该协调
。
本专利技术的引物组合中的引物
G+C
含量均控制在适宜的范围内，且碱基分布随机，因而具有适中的解链温度，便于扩增
。
[0020]总之，本专利技术的引物组合特异性好，扩增效率高，可以很好的应用于检测与绵羊繁殖性状相关的分子标记
。
通过过利用上述的引物组对绵羊的基因组
DNA
中进行扩增和检测，确定待测样品的
BMPR1B
基因的基因型，从而可以从中选育出产多羔的绵羊品种
。
[0021]本专利技术还提供了一种筛选多产的绵羊的方法，具体包括如下步骤：
[0022]提取待检样本的
DNA
作为模板，用引物组合对绵羊
BMPR1B
基因进行
PCR
扩增，扩增反应结束后将
PCR
扩增产物进行分析，判断扩增产物中的
FecB
位点的具体基因型，选择基因型为
CC
或
CT
的个体作为种羊进行繁殖
。
因为
CC
型产羔数均极显著高于
CT
型，
CT
型又极显著高于
TT
型
。
说明该位点可用做产羔数的辅助标记，说明
FecB
位点可用用本研究皮山红羊群体多羔性状的选育
。
[0023]优选地，上述筛选多产的绵羊方法中，
PCR
扩增反应程序为：
94℃
预变性
120s
，
94℃
变性
20s
，
56℃
退火
30s
，
72℃
延伸
60s
，
48
个循环，
72℃
延伸
180s。
[0024]随着反应的逐渐进行，酶会逐渐失活，
dNTP
等原料会逐渐消耗掉，此外有一些非特异产物的扩增也会相应增加
。
因此虽然随着反应循环数的增加，产物会增多，但循环次数依然不宜过多，因而本专利技术限定为
48
个循环
。
[0025]本专利技术还包含有包括上述引物组合的的试剂盒，该试剂盒在绵羊群体多羔性状的筛选方面具有很好的应用
。
[0026]总之，本专利技术通过对皮山红羊的
BMPR1B
基因进行
PCR
扩增和测序，发现在扩增片段的
FecB
位点存在一个
T/C
多态性位点，并通过检测
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只皮山红羊多态性和建立的一般线性模型，确定了与绵羊繁殖性状相关的分子标记，该分子标记可以用于培育多产的绵羊，为绵羊繁殖性状的遗传改良提供了有效的基因工程手段，具有重大的实际应用价值，在辅助绵羊群体多羔性状的选育方面具有很好的应用
。
附图说明
[0027]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种与绵羊繁殖性状相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记位于皮山红羊的第6号染色体上的
BMPR1B
基因第
29382188
位碱基
FecB
位点，该位点为
T/C
多态性位点
。2.
一种用于检测所述权利要求1的分子标记的特异性引物组，其特征在于，由上游引物
、
下游引物以及延伸引物组成，所述上游引物具有
SEQ ID No.1
所示碱基序列，所述下游引物具有
SEQ ID No.2
所示碱基序列，所述延伸引物具有
SEQ ID No.3
所示碱基序列
。3.
一种包括权利要求2所述的特异性引物组的试剂盒
。4.
权利要求1所述的分子标记在辅助绵羊群体多羔性状的选育方面的应用
。5.
权利要求2所述的特异性引物组
、
权利要求3所述的试剂盒在绵羊群...

【专利技术属性】
技术研发人员：依明，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：