一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合和抗体组合及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合和抗体组合及其应用

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合和抗体组合及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合和抗体组合及其应用
。

技术介绍

[0002]乌司奴单克隆抗体（
Ustekinumab
），简称乌司奴单抗，是一种人源化单克隆抗体，针对白介素
12
和白介素
23
，调节免疫系统和免疫介导的炎症性疾病的发生
。
在两个针对中重度牛皮癣的
III
期临床试验中显示
Ustekinumab
是安全有效的，最长时间为
76
周
。Ustekinumab
同样适用于治疗中度到重度斑块型银屑病
、
活动性银屑病和克罗恩病，通常需要更高的注射剂量
。
[0003]临床疗效通常与治疗性抗体的浓度水平相关，监测治疗性抗体的浓度可为实现最优的治疗方案提供参考依据
。
然而，国内临床实践针对乌司奴单抗的血药浓度开展的监测方案很少，这与乌司奴单抗的血药浓度检测方法繁琐
、
人们缺乏血药浓度监测的意识等有关
。
乌司奴单抗的检测分析主要有
ELISA
法和
LC
‑
MS
法，但
LC
‑
MS
法分析时间较长，操作复杂，难以满足临床检验对高效能的要求，
ELSIA
法自动化程度低，测试时间长，满足不了临床高通量
、
快速准确的检测需求
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于弥补现有技术的不足，提供能简单快速的检测乌司奴单抗杂交瘤细胞株组合和抗体组合，以此提高乌司奴单抗检测的灵敏性
、
特异性和精密度
。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合，所述杂交瘤细胞株组合包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1和杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
；
[0006]所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；
[0007]所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45640。
[0008]本专利技术还提供了一种检测乌司奴单抗的抗体组合，所述抗体组合包括包被抗体和检测抗体；
[0009]所述包被抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；
[0010]所述检测抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45640。
[0011]本专利技术还提供了上述技术方案所述的杂交瘤细胞株组合或抗体组合在制备检测乌司奴单抗的产品中的应用
。
[0012]本专利技术还提供了上述技术方案所述的杂交瘤细胞株组合或抗体组合在制备监测
乌司奴单抗的血药浓度水平的产品中的应用
。
[0013]本专利技术还提供了一种检测乌司奴单抗的试剂盒，所述试剂盒包括磁微粒工作液
、
抗体工作液和指示液；
[0014]所述磁微粒工作液包括包被抗体偶联磁微粒和磁珠缓冲液；所述包被抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；
[0015]所述抗体工作液包括示踪物标记的检测抗体和抗体稀释液；所述检测抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45640。
[0016]优选的，所述磁微粒工作液中包被抗体偶联磁微粒的浓度为
0.2~0.6mg/mL
；
[0017]所述抗体工作液中示踪物标记的检测抗体的浓度为
0.1~2
μ
g/mL。
[0018]优选的，所述包被抗体偶联磁微粒中磁珠和包被抗体的质量比为（
50~500
）：
1。
[0019]优选的，所述示踪物标记的检测抗体包括示踪物
、
检测抗体和偶联剂；
[0020]所述示踪物
、
检测抗体和偶联剂的质量比为1：（
0.2~1
）：（
0.2~1
）
。
[0021]优选的，所述磁珠缓冲液包括
TBST
缓冲液；
[0022]所述抗体稀释液包括
50mM 2
‑
吗啉乙磺酸
、5mg/mL
牛血清白蛋白
、0.9mg/mL
氯化钠和
1mM MgCl2；所述抗体稀释液的
pH
为
6.7
，溶剂为水；
[0023]所述指示液包括发光液；
[0024]所述示踪物包括碱性磷酸酶
。
[0025]本专利技术还提供了一种非诊断和治疗目的的乌司奴单抗游离血液浓度的检测方法，包括如下步骤：
[0026]将待检测样品和不同浓度的标准品分别和磁微粒工作液混合，
37℃
孵育
5min
，去除上清，得到包被磁珠；将所述包被磁珠和抗体工作液混合，
37℃
孵育
5min
，去除上清，得到检测磁珠；将所述检测磁珠和发光液混合，统计发光值；
[0027]利用不同浓度的标准品测定的发光值建立标准曲线，将待检测样品的发光值带入所述标准曲线，即为所述待检测样品中乌司奴单抗游离血液浓度；
[0028]所述磁微粒工作液为上述技术方案所述试剂盒中的磁微粒工作液；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于检测乌司奴单抗的杂交瘤细胞株组合，其特征在于，所述杂交瘤细胞株组合包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1和杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45640。2.
一种检测乌司奴单抗的抗体组合，其特征在于，所述抗体组合包括包被抗体和检测抗体；所述包被抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；所述检测抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
G
‑
10
保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45640。3.
权利要求1所述的杂交瘤细胞株组合或权利要求2所述的抗体组合在制备检测乌司奴单抗的产品中的应用
。4.
权利要求1所述的杂交瘤细胞株组合或权利要求2所述的抗体组合在制备监测乌司奴单抗的血药浓度水平的产品中的应用
。5.
一种检测乌司奴单抗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括磁微粒工作液
、
抗体工作液和指示液；所述磁微粒工作液包括包被抗体偶联磁微粒和磁珠缓冲液；所述包被抗体包括杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1产生的抗体；所述杂交瘤细胞株
Ust
‑
B
‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.45641
；所述抗体工作液包括示踪物标记的检测抗体和抗体稀释液；所述检测抗体包括杂交瘤细胞株
...

【专利技术属性】
技术研发人员：周裕军，周建平，许秀丽，王艳新，张瑜，申霖，
申请(专利权)人：北京丹大生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：