一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液及制备方法和应用技术

本申请涉及骨关节炎治疗药物的技术领域的一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液及制备方法和应用

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液及制备方法和应用


[0001]本申请涉及骨关节炎治疗药物的
，尤其是涉及一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液及制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]能活动的骨连结叫做关节，是骨连结的主要形式，由关节面
、
关节囊和关节腔三部分构成
。
关节面是两个以上相邻骨的接触面，一个略凸另一个略凹，表面覆盖着一层光滑的软骨，能缓冲相连骨在运动时的震动和冲击
。
关节囊是坚韧的结缔组织，把相邻两骨牢固地联系起来，内层为滑膜层，可分泌关节滑液以减少运动时的摩擦
。
关节腔是关节软骨和关节囊围成的狭窄间隙，正常时只含有少许滑液
。
[0003]骨关节炎是一种慢性炎症性疾病，最常见于髋关节和膝关节，特征包括滑膜炎症
、
关节头骨质疏松
(
骨体积
/
组织体积减小
、
骨小梁数量减少
/
厚度变薄
/
间隙变大
)
和
OARSI(
患者疼痛
、
体能和功能
)
评分增高为特征
。
骨关节炎的常用动物模型为小鼠膝关节的前交叉韧带横断模型
(ACLT)
，手术7‑
10
周后具有典型的骨关节炎特征
。
[0004]在全国范围内，有症状的髋关节炎和膝关节炎的患病率分别为1％和8％
。<br/>骨关节炎好发于中老年人，
65
岁以上人群的患病率超过
50
％
。
对乙酰氨基酚
、
非甾体抗炎药
、
葡糖胺和软骨素通常用于骨关节炎的口服治疗，而关节内皮质类固醇和透明质酸注射或关节置换手术适用于更严重的骨关节炎患者
。
临床治疗的重点是减少慢性炎症和减轻疼痛
。
[0005]促炎细胞因子白细胞介素1β
(IL
‑1β
)
通过促进降解关节细胞外基质
II
型胶原
、
蛋白多糖和透明质酸的蛋白水解酶活性，在骨关节炎发病中重要作用
。IL
‑1β
的过表达导致
T
细胞活化
、M1
型巨噬细胞极化
、
破骨细胞生成以及滑膜细胞和脂肪细胞释放其他促炎细胞因子
。IL
‑1β
还可增强基质金属蛋白酶
(MMP)
的活性，增加软骨降解的速度
。
软骨损伤容易引起软骨下异常血管
(Emcn+)
生成，改变了软骨重建的平衡，导致软骨下骨硬化和骨赘形成，改变了软骨下骨的机械应力特征和软骨的营养供应模式，并增加了软骨的脆弱性
。
因而，降低促炎细胞因子活性和软骨下血管生成可能是减少骨关节炎进展的有用治疗策略
。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术中骨关节炎治疗效果不佳的技术问题，本申请提供一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液，该混合液中同时包括外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
，二者之间能够发挥协同作用，进而能够显著改善骨关节炎症
。
[0007]为此，本申请第一方面提供了一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液，所述外泌体混合液中包括内部过表达
miR
‑
144
‑
3p
的外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和内部过表达
miR
‑
210
‑
3p
的外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p。
[0008]本申请所述外泌体混合液中的外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
均为基因工程外泌体，其中外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
的内部能够过表达
miR
‑
144
‑
3p
，外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
的内部能够过表达
miR
‑
210
‑
3p。
在关节腔内的炎细胞中，
miR
‑
144
‑
3p
可抑
制
IL
‑1β
mRNA
的翻译，进而减少或阻断关节腔内炎症因子
IL
‑1β
的分泌
。miR
‑
210
‑
3p
被关节软骨下血管内皮细胞
(
表面标记粘蛋白阳性，即
Emcn+)
吸收后，可抑制内皮细胞内转化生长因子
β
受体
1mRNA
的翻译，来抑制软骨下血管生成，最终抑制软骨下硬化和骨刺形成
。
本申请所述外泌体混合液中外泌体过表达的
miR
‑
144
‑
3p
和
miR
‑
210
‑
3p
能够同时在关节腔内发挥作用，可协同抑制关节内滑膜炎症和关节软骨退化，发挥“1+1&gt;2
的作用”，进而可有效用于治疗骨关节炎疾病
。
[0009]在一些实施方式中，所述外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
的粒径分布为
50
～
140nm
，
D50
为
58
～
60nm
，
D90
为
75
～
78nm
，
D10
为
55
～
57nm。
[0010]本申请中，
D50
表示外泌体颗粒累积分布为
50
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于治疗骨关节炎的外泌体混合液，其特征在于，所述外泌体混合液中包括内部过表达
miR
‑
144
‑
3p
的外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和内部过表达
miR
‑
210
‑
3p
的外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p。2. 根据权利要求1所述的外泌体混合液，其特征在于，所述外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
的粒径分布为
50~140nm
，
D50
为
58~60nm
，
D90
为
75~78nm
，
D10
为
55~57 nm。3.
根据权利要求1或2所述的外泌体混合液，其特征在于，所述外泌体混合液中外泌体
Exo
‑
miR
‑
144
‑
3p
和外泌体
Exo
‑
miR
‑
210
‑
3p
总含量为（
1.5~10
）
×
10
11
颗粒
/mL。4.
一种如权利要求1‑3中任意一项所述的外泌体混合液的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1
，制备重组慢病毒，所述重组慢病毒上包括基因
miR
‑
144
‑
3p、
基因
miR
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈继冰，王雪莹，
申请(专利权)人：广州四叶草健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：