一种含有唾液酸脂质衍生物的脂质纳米颗粒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及一种含有唾液酸脂质衍生物的脂质纳米颗粒及其应用

【技术实现步骤摘要】
一种含有唾液酸脂质衍生物的脂质纳米颗粒及其应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种含有唾液酸脂质衍生物的脂质纳米颗粒及其应用
。

技术介绍

[0002]基因治疗
(gene therapy)
是指将外源正常基因导入机体细胞，纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的
。
随着分子生物学的发展，基因疗法逐渐成为治疗恶性肿瘤
、
遗传性疾病以及心血管疾病的新希望
。
基因治疗可对目的细胞和目的基因进行更具针对性的治疗，其长期疗效更为显著
。
现有的基因疗法可分为
DNA
疗法
、RNA
疗法以及
CRISPR/Cas9
基因编辑疗法，相比于基因编辑和
DNA
疗法，
RNA
疗法没有基因组插入风险，因此具有更高安全性
。
外源基因易被核酸酶降解，因此，构建安全高效的基因递送载体是推动基因治疗发展的关键
。
现有的基因递送载体可分为病毒载体和非病毒载体，其中，非病毒载体具有无免疫原性
、
安全
、
易于大规模生产等优点而具有重要的应用价值
。
为实现
RNA
的高效传递，现已经开发了多种非病毒纳米载体，其中脂质纳米粒
(Lipid Nanoparticles,LNPs)
显示出了最佳临床转化价值
。
[0003]目前市售的
mRNA
疫苗
BNT162b2(BioNTech
公司的
SARS
‑
CoV
‑2‑
19mRNA
疫苗
)
和
mRNA
‑
1273(Mordena
公司的
SARS
‑
CoV
‑
2mRNA
疫苗
)
均采用了
LNPs
技术
。
这些上市的基因药物的配方中均含有不可断裂的聚乙二醇偶联脂质，其中
BNT162b2
采用的不可断裂
PEG
脂质为双四烷基乙酰胺甲氧基聚乙二醇
2000(ALC0159)
；
mRNA
‑
1273
采用的不可断裂
PEG
脂质为二肉豆蔻酰甘油
‑3‑
甲氧基聚乙二醇
2000(mPEG
2000
DMG)。
[0004]PEG
脂质的引入，使得
mRNA
脂质纳米颗粒的成型性良好，可以在简单的制备条件下获得粒径均匀的脂质纳米颗粒
。
然而，
SARS
‑
CoV
‑
2mRNA
疫苗中所含的辅料聚乙二醇脂质衍生物自
SARS
‑
CoV
‑2保护疫苗接种活动开始以来，一直被认为是疫苗接种者产生严重
IgE
介导的过敏反应的可能因素之一
。
由于环境的暴露，健康人群中也存在较低水平的抗
PEG
抗体，并且这些预先存在的抗
PEG
抗体在接种
SARS
‑
CoV
‑
2mRNA
疫苗后显著增加
。
并且
mRNA
‑
1273
接种后
PEG
特异性抗体的增加与临床相关
PEG
化
LNPs
与体外血液吞噬细胞相关性的显著增加有关，且
PEG
特异性抗体的水平与
LNPs
中的
PEG
脂质含量呈正相关
。
此外，较高的聚乙二醇脂质阻碍
LNPs
与细胞核内体膜的融合，进而降低
RNA
的早期核内体逃逸，最终导致基因转染效率的降低
。
[0005]实现编码抗原的
mRNA
在抗原提呈细胞
(Antigen presenting cells,APCs)
中的高效递送和翻译是进一步提升
mRNA
疫苗效力的关键
。
因此，将编码抗原的
mRNA
传递给特定的
APCs
成为疫苗开发的又一个关键问题
。
[0006]抗原提呈细胞可分为专职性抗原提呈细胞和非专职性抗原提呈细胞
。
专职性抗原提呈细胞表达
MHC
‑
II
类分子和
T
细胞活化相关的共刺激分子及黏附分子，具有显著的抗原摄取
、
加工处理和呈递功能，这类细胞主要包括树突状细胞
(Dendritic cells
，
DCs)、
单核
‑
巨噬细胞和
B
淋巴细胞
。
非专职性抗原提呈细胞在通常情况下不表达
MHC
‑
II
类分子，在
I
型
干扰素的刺激下可表达
MHC
‑
II
类分子和参与
T
细胞活化的共刺激分子以及黏附分子，并具有一定的抗原处理和提呈功能
。
这类细胞主要包括内皮细胞
、
成纤维细胞
、
上皮细胞
、
间皮细胞和嗜酸性粒细胞
。
在专职性抗原提呈细胞中，
DCs
具有最强的抗原提呈能力
。DCs
也是唯一能够刺激初始
T
细胞增殖的抗原提呈细胞，而其他种类的抗原提呈细胞
(
单核巨噬细胞和
B
细胞
)
仅能刺激已活化的或记忆性的
T
细胞
。
[0007]现有的疫苗中，已经开发了包括使用自体或异体肿瘤细胞
、
多肽
、
蛋白质和
DNA
疫苗等多种方法，但在多数情况下，这些疫苗依赖与宿主
DCs
的随机相遇，疫苗所携带的抗原与
DCs
的接触缺乏可导致免疫反应降低
。
例如未激活的
DCs
，可能会导致免疫应答的沉默，这也是目前癌症疫苗存在的缺陷之一
。
[0008]研究表明未成熟
DCs
中的核内体和溶酶体酸化效率低下，这不利于所递送的
mRNA
逃离核内体和溶酶体进入细胞质翻译成编码的抗原蛋白，无法逃离溶酶体的
mRNA
会被降解从而无法发挥作用
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种脂质纳米颗粒，其特征在于，其中包含唾液酸脂质衍生物；所述唾液酸脂质衍生物由唾液酸与脂质片段偶连形成；所述唾液酸脂质衍生物为唾液酸的1位羧基或9位碳上羟基偶联有脂质片段，所述脂质片段为胆固醇
、
脂肪酸或其衍生物
。2.
根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物中，采用酰胺键或羧酸酯键连接唾液酸与脂质片段
。3.
根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物的通式如式
I
或式
II
所示：式
I
中，
R1为
H
原子或
C1
‑
C6
烷基；
R2为
H、(CH2)
m
、C2
‑
C6
烯基，
m
＝1‑
17
；
R4为
‑
OH、
‑
NHCOCH3或
‑
NHCOCH2OH
；
X
为
H
原子
、O
原子或羰基；当
X
为
H
原子或
O
原子时，
R3为
(CH2)
n
或胆固醇基，
n
＝1‑
17
；当
X
为羰基时，
R3为
C12
‑
C24
烷氧基
、C12
‑
C24
烷基取代氨基或胆固醇基；式
II
中，
R1为
‑
S
‑
(CH2)
n
‑
或
‑
S
‑
S
‑
(CH2)
n
‑
，
n
＝1‑6；
R2为
‑
OH、
‑
NHCOCH3或
‑
NHCOCH2OH
；
R3为
C12
‑
C24
烷氧基
、C12
‑
C24
烷基取代氨基或胆固醇基
。4.
根据权利要求3所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物为以下至少一种：
5.
根据权利要求1～4中任一项所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述脂质纳米颗粒中不含有
PEG
脂质；或所述脂质纳米颗粒中含有
PEG
脂质；当所述
PEG
脂质为可断裂的
PEG
脂质衍生物时，其占所述脂质纳米颗粒的摩尔百分比为3％以下；当所述
PEG
脂质为不可断裂的
PEG
脂质衍生物时，其占所述脂质纳米颗粒的摩尔百分比为1％以下
。6.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述脂质纳米颗粒中含有可断裂的
PEG
脂质衍生物或不可断裂的
PEG
脂质衍生物时，其占所述脂质纳米颗粒的摩尔百分比为1％以下
。7.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物与
PEG
脂质的摩尔比为5～
50
：
1。8.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物占所述脂质纳米颗粒的摩尔百分比为1％～
30
％
。9.
根据权利要求8所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述唾液酸脂质衍生物占所述脂质纳米颗粒的摩尔百分比为3％～
20
％
。10.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述
PEG
脂质为可断裂的
PEG
脂质衍生物
。11.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述
PEG
脂质中的脂质为支链
PEG
脂质
。12.
根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述
PEG
脂质中含有分子量为
200
‑
40...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓意辉，汤雪莹，邓成勇，赵宏伟，张家硕，杨琼芬，王天宇，宋艳志，
申请(专利权)人：广州制高点医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：