本发明专利技术公开了一种拟除虫菊酯降解菌株,属于生物技术领域
【技术实现步骤摘要】
一种联苯菊酯降解菌株以及应用
[0001]本专利技术属于生物
,特别是涉及一种联苯菊酯降解菌株以及应用
。
技术介绍
[0002]拟除虫菊酯类农药是一类广谱高效的仿生型农药,是继有机磷
、
有机氯和氨基甲酸酯的一类新型杀虫剂,因其起效快
、
杀虫谱广
、
不易光解等优点被广泛的用于水产养殖和农业灭害中
。
联苯菊酯是拟除虫菊酯中杀虫活性最强的品种之一,在国内是用量增长最快的农药之一,其大范围的使用导致了在环境中的大量残留,并可通过喷雾漂移
、
降雨降尘
、
地表径流及农田排水等多种途径在水体中汇集,最终附着于底泥,又因其高度疏水,可以牢固的与土壤和有机物结合,从而使它们能够浸入到江河湖泊等生态系统,对水生生物造成不可逆转影响
。
由于拟除虫菊酯类杀虫剂耐光
、
耐热,可在自然环境中残留较长时间,随着联苯菊酯施用量的增大,在农村,城镇甚至是动物,人体组织中都检测到了联苯菊酯的存在,因此减少联苯菊酯的污染残留非常重要
。
[0003]微生物修复技术可将有机污染物降解成更具安全性的产物,甚至完全矿化,具有成本低
、
效果好
、
无二次污染等优点,是目前联苯菊酯污染修复最具潜力的修复手段
。
诸多学者通过降解菌对蔬菜
、
耕地土壤的农药残留进行生物修复的研究较为普遍,但是在淡水环境下和底泥中,筛选拟除虫菊酯类农药降解菌的方面的研究较少
。
同时目前有研究报道的联苯菊酯降解菌多为枝孢属
、
鞘脂菌属
、
醋酸不动杆菌和霉菌等,然而对阴沟肠杆菌降解联苯菊酯的报道较少
。
降解菌能否运用于特定环境下,对土著微生物影响较小且具有较高的降解活性是目前生物修复技术亟待解决的问题,因此在不同环境中筛选出能有效降解联苯菊酯的菌株更具有实际应用价值
。
技术实现思路
[0004]本专利技术为解决上述
技术介绍
中存在的技术问题,提供了一种联苯菊酯降解菌株以及应用
。
[0005]本专利技术采用以下技术方案:提供一种联苯菊酯降解菌株,该降解菌株命名为阴沟肠杆菌(
Enterobacter cloacae
)
F23
,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,简称
GDMCC
,保藏日
2023
年
05
月
14
日,保藏登记号:
GDMCC N0
:
63465
;保藏地址为广州市先烈中路
100
号大院
59
号楼5楼,广东省科学微生物研究所
。
[0006]如上的联苯菊酯降解菌株在降解杀虫剂联苯菊酯中的应用,方法如下:
[0007]1)将保藏登记号:
GDMCC N0
:
63465
的菌株置于培养基中培养
[0008]所述培养基为葡萄糖
20.0g/L、
酵母粉
5.0g/L、
硫酸铵
5.0g/L、
七水硫酸镁
0.5g/L、
一水硫酸锰
0.05g/L、
磷酸二氢钾
1.5g/L、
磷酸氢二钾
3.4g/L、1ml/L
微量元素溶液
(
七水硫酸业铁
2g/L、
七水硫酸锌
0.1g/L、
硼酸
0.3g/L、
六水氯化钻
0.2g/L、
二水氯化铜
0.01g/L、
六水氯化镍
0.02g/L、
钼酸钠
0.03g/L)
,其中调节培养基
ph
值为
6.8。
[0009]2)将培养后菌株按照体积百分比
5%
加入含有联苯菊酯的溶液或被污染的污泥中
。
[0010]3)提取残留联苯菊酯方法如下,在样品中添加等量乙腈,经涡旋
10 min
,超声
2min
后,
5000rmin
离心
5min
,取有机相过
0.22
μ
m
微孔滤膜,转移到干净的样品瓶中,重复操作三次,合并溶液,氮吹浓缩近干后,加
0.5mL
二氯甲烷定容,待上机检测
。
[0011]本专利技术的有益效果:本专利技术培养得到的降解菌株对联苯菊酯具有显著的降解效果,即具有较高的降解能力,可为建立有效地去除淡水养殖环境中联苯菊酯残留的微生物修复技术,保护淡水环境
、
治理养殖环境农药残留污染提供理论和技术支持
。
同时菌体本身可以通过自然降解去除,对环境友好
。
附图说明
[0012]图1为阴沟肠杆菌(
Enterobacter cloacae
)
F23
革兰氏染色图
。
[0013]图2为阴沟肠杆菌(
Enterobacter cloacae
)
F23
的菌落形态图
。
[0014]图3为实施例4中的
PCR
电泳结果图
。
[0015]图4为实施例4中建立的系统发育树图
。
[0016]图5为实施例4中平均值制作标准曲线图
。
[0017]图6为实施例4中
F23
对不同初始浓度联苯菊酯降解
。
具体实施方式
[0018]下面结合具体实施例和说明书附图对本专利技术做进一步的描述
。
[0019]实施例1[0020]本实施例公开一种联苯菊酯降解菌株,该降解菌株命名为阴沟肠杆菌(
Enterobacter cloacae
)
F23
,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,简称
GDMCC
,保藏日
2023
年
05
月
14
日,保藏登记号:
GDMCC N0
:
63465
;保藏地址为广州市先烈中路
100
号大院
59
号楼5楼,广东省科学微生物研究所
。
[0021]为制备上述菌株,本实施例还公开了以下培养流程:根据实地考察在引江济巢沿线缓冲带选取6个站点,采取泥样
。
泥样采用彼得森抓斗式采泥器,在同一采样点的不同位置进行无菌采集中心无污染底泥3次,将采取的3份样品均匀混合,装至
15mL
规格的
PE
管,将底泥样品冷藏运输回实验室,在
‑
20℃
...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种联苯菊酯降解菌株,其特征在于,该降解菌株命名为阴沟肠杆菌(
Enterobacter cloacae
)
F23
,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,简称
GDMCC
,保藏日
2023
年
05
月
14
日,保藏登记号:
GDMCC N0
:
63465
;保藏地址为广州市先烈中路
100
号大院
59
号楼5...
【专利技术属性】
技术研发人员:宋婧,马昆,曹苗苗,陈思傲,高焱,丁开妍,杨怡然,谷鹏飞,王李耘,徐瑞,吴心怡,黄睿,
申请(专利权)人:安庆师范大学,
类型:发明
国别省市:
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