一种小叶栀子的组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种小叶栀子的组织培养方法，属于植物组织培养技术领域，本发明专利技术以小叶栀子带顶芽的枝条为外植体进行无根苗培养

【技术实现步骤摘要】
一种小叶栀子的组织培养方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，具体涉及一种小叶栀子的组织培养方法
。

技术介绍

[0002]栀子属
(Gardenia Ellis.)
植物分布广泛，在热带
、
亚热带及温带地区均有栽培或野生植株，具有观赏
、
药用
、
饮料
、
提炼油脂和香料等多种用途，具有较大的开发潜力
。
小叶栀子
(Gardeniajasminoides Ellis.var.radicans)
为茜草科栀子属植物中栀子
(Gardeniajasminoides Ellis.)
的一个栽培变种，为叶小浓密
、
花白具有浓郁香气的常绿灌木，是优良的园林绿化景观植物，应用前景广泛
。
前人多利用有性
、
营养繁殖方式产生小叶栀子幼苗，但总体上成活率较低，难以满足市场需求
。
[0003]近年来，植物组织培养技术日趋成熟，已广泛应用于农业
、
园林
、
园艺
、
林业
、
工业和植物化学物质生产等诸多领域
。
迄今为止，对于栀子属植物再生体系的研究，多见于利用茎段
、
叶片
、
果皮
、
种子或种子团等材料作为外植体进行组织培养以获得再生植株，而利用无菌叶片和顶芽做为外植体进行木本植物组织培养的研究较少
。
小叶栀子具有较高的研究价值及应用前景，但目前国内外利用组织培养建立再生体系的研究多集中在栀子属其它物种，针对小叶栀子的离体快繁技术鲜见
。
为此，本专利技术提供一种小叶栀子的组织培养方法
。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种小叶栀子的组织培养方法，建立了小叶栀子的再生体系，为大规模扩繁生产小叶栀子提供了技术支持，也为其广泛的推广应用创造了有利条件，同时提供了一种高效稳定的可快速获得小叶栀子种苗的组织培养方法
。
[0005]本专利技术提供了一种小叶栀子的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0006]S1
，预处理：获取小叶栀子的顶芽，清洗，纱布包裹所述顶芽，流水冲洗，得到预处理小叶栀子顶芽；
[0007]S2
，无根苗培养：对
S1
的预处理小叶栀子顶芽消毒，切去木质化茎段，保留
0.5cm
顶芽，并浸泡于抑菌液，得到无菌顶芽，将所述无菌顶芽接种于启动培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
得到无根苗；
[0008]S3
，愈伤组织诱导和增殖：选取
S2
无根苗上的新芽或叶片为外植体，将所述外植体接种于诱导培养基中，于
25℃
，遮光培养，得到愈伤组织；
[0009]S4
，愈伤组织分化：将
S3
的愈伤组织切块，接种于分化培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
得到分化组织；
[0010]S5
，生根培养：将
S4
分化组织的芽从基部切下，并接种于生根培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
后得到小叶栀子生根苗
。
[0011]优选的，
S2
中，所述抑菌液由体积比为1：1的氨苄西林钠和硫酸链霉素组成
。
[0012]优选的，所述氨苄西林钠和硫酸链霉素的浓度均为
50mg/L。
[0013]优选的，
S2
中，所述启动培养基为
MS
培养基，
pH
值为
5.8。
[0014]优选的，
S3
中，每升所述诱导培养基由
MS
培养基
、1
～
2mg 2,4
‑
D、0.5
～
1mg6
‑
BA
组成
。
[0015]优选的，
S4
中，每升所述分化培养基由
MS
培养基
、0.03
～
0.05mg NAA、1.5mg
～
1.8mg 6
‑
BA
组成
。
[0016]优选的，
S5
中，每升所述生根培养基由
1/2MS
培养基
、0.05
～
0.15mg NAA、0.5mg IBA
组成
。
[0017]优选的，
S4
中，所述愈伤组织切块的尺寸为
5mm
×
5mm
×
5mm。
[0018]优选的，
S2
中，所述消毒的具体方法为：将
S1
的预处理小叶栀子顶芽置于无菌瓶中，于
75
％的乙醇中浸泡
30s
，再于
0.1
％的
HgCl2溶液浸泡
8min
，无菌水冲洗6遍即可
。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0020](1)
本专利技术以小叶栀子带顶芽的枝条为外植体进行无根苗培养
、
愈伤组织诱导和增殖
、
愈伤组织分化和生根苗培养，快速获得了可以直接室外种植的小叶栀子组培苗，建立了小叶栀子的再生体系，为大规模扩繁生产小叶栀子幼苗提供了技术支持，缩短了小叶栀子种苗繁殖周期，较好地保持优良性状；采用本专利技术抑菌液处理顶芽，污染率低至
25
％，无菌顶芽愈伤组织的诱导率高达
93.3
％，而无菌叶片的愈伤组织诱导率也达到
90
％，愈伤组织分化率高达
96.7
％
。
[0021](2)
本专利技术提供的小叶栀子组织培养方法中启动培养基
、
诱导培养基
、
分化培养基和生根培养基能够起到促进发芽与生根
、
提高存活率的作用，实现小叶栀子的快速繁殖，获得率较高，所得种苗质量稳定，能较好的保持其优良性状，达到快速大量繁殖
、
大批量生产的要求，便于小叶栀子的大规模推广
。
附图说明
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种小叶栀子的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1
，预处理：获取小叶栀子的顶芽，清洗，纱布包裹所述顶芽，流水冲洗，得到预处理小叶栀子顶芽；
S2
，无根苗培养：对
S1
的预处理小叶栀子顶芽消毒，切去木质化茎段，保留
0.5cm
顶芽，并浸泡于抑菌液，得到无菌顶芽，将所述无菌顶芽接种于启动培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
得到无根苗；
S3
，愈伤组织诱导和增殖：选取
S2
无根苗上的新芽或叶片为外植体，将所述外植体接种于诱导培养基中，于
25℃
，遮光培养，得到愈伤组织；
S4
，愈伤组织分化：将
S3
的愈伤组织切块，接种于分化培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
得到分化组织；
S5
，生根培养：将
S4
分化组织的芽从基部切下，并接种于生根培养基，于
25℃
，
1500Lx
光照条件下，每日光照
16h
，黑暗培养
8h
，
30d
后得到小叶栀子生根苗
。2.
根据权利要求1所述的小叶栀子的组织培养方法，其特征在于，
S2
中，所述抑菌液由体积比为1：1的氨苄西林钠和硫酸链霉素组成
。3.
根据权利要求2所述的小叶栀子的组织培养方法，其特征在于，所述氨苄西林钠和硫酸链霉素的浓度均为
50mg/L。4.
根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海涛，刘玲，王慧，黄胜男，胡开让，
申请(专利权)人：淮南师范学院，
类型：发明
国别省市：