SHP-1、制造技术

本发明专利技术涉及慢性阻塞性肺疾病技术领域，尤其涉及

【技术实现步骤摘要】
SHP
‑
1、细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法


[0001]本专利技术涉及慢性阻塞性肺疾病
，尤其涉及
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法
。

技术介绍

[0002]慢性阻塞性肺疾病是一种慢性进行性的呼吸系统疾病，主要特征是气流受限
。
它通常由长期吸烟
、
空气污染或其他有害气体和颗粒物引起
。SHP
‑1是一种酪氨酸磷酸酶，属于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族
。
它由
PTPN6
基因编码，是一种负调控蛋白
。SHP
‑1主要在免疫细胞中表达，并在免疫调节和信号转导中发挥重要作用
。
细胞信号通路是指细胞内外信息传递的过程，用于调节和协调细胞的生理功能和行为
。
细胞信号通路涉及多种分子和蛋白质相互作用，通过化学信号分子的识别和传递来调控细胞的生理状态和行为
。
肺疾病是指影响肺部结构和功能的各种疾病，可以涉及肺组织
、
气道
、
肺泡和肺血管等结构
。
[0003]慢性支气管炎是指气道
(
支气管
)
的慢性炎症，导致气道收缩和黏液分泌增加
。
这会导致咳嗽
、
咳痰和呼吸困难等症状，可以揭示肺疾病发展中炎症和纤维化的机制，可以干预肺疾病的发展和进展，例如抑制炎症反应
、<br/>减轻肺纤维化等，为此提出了
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法
。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，克服了现有技术的不足，旨在解决
技术介绍
中的问题
。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0006]一种
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，包括步骤1：设立组别
、
建立
COPD
小鼠模型；
[0007]步骤2：取材，
48
天
(
末次给药
24
～
48
小时后
)
时行肺功能检测后取血液和肺泡灌洗液，肺组织；
[0008]步骤3：指标检测；
[0009]步骤4：观察各组检测指标间差异，统计分析数据；
[0010]步骤5：根据所获得的结果，探讨
SHP
‑
1、PI3K/AKT
与气道重塑和肺气肿的相关性并于临床标本对照验证，探究
SHP
‑1调控
PI3K/AKT
干预气道重塑和肺气肿的作用及可能机制
。
[0011]优选的，所述方案利用已构建成功的气道上皮细胞
SHP
‑1基因特异性敲除的转基因小鼠和野生型小鼠，构建
CSE
诱导的
COPD
动物模型
。
[0012]优选的，所述步骤一中，需选取野生型雄性
C57BL/6
小鼠
24
只，
SHP
‑1Δ
/
Δ
小鼠
24
只，6‑8周龄，将动物按随机数字表法平均分为野生型对照组
、
野生型
COPD
模型组
、SHP
‑1Δ
/
Δ
对照组
、SHP
‑1Δ
/
Δ
COPD
模型组
。
[0013]优选的，所述步骤3中指标检测的步骤包括：
[0014]S1、
检测各组别小鼠肺功能：使用有创肺功能检测仪器进行肺功能检测；
[0015]S2、
检测血清和肺泡灌洗液炎症标志物：使用
ELISA
试剂盒检测检测小鼠血清和肺泡灌洗液中
IL
‑
6、IL
‑
8、IL
‑1β
含量；
[0016]S3、QRT
‑
PCR
法检测肺组织
SHP
‑
1、PI3K/AKTmRNA
表达情况；
[0017]S4、WB
检测肺组织
SHP
‑
1、PI3K/AKT
蛋白表达情况；
[0018]S5、
肺组织病理：收集肺组织固定后切成，行
HE
染色后观察组织的病理变化，免疫组化分析
SHP
‑
1、PI3K/AKT
表达
。
[0019]优选的，所述
PI3K/AKT
通路中，磷脂酰肌醇3‑
激酶
(PI3K)
是一个关键的酶，它可以将膜上的磷脂酰肌醇二磷酸
(PIP2)
催化成磷脂酰肌醇三磷酸
(PIP3)。
而
PIP3
则作为第二信使，能够结合到胞内的蛋白质
AKT(
也称为蛋白激酶
B)
上，激活
AKT。
[0020]优选的，所述
mRNA
带有一串由核苷酸组成的序列，称为开放阅读框，
ORF
中的三个核苷酸一组被称为密码子，每个密码子对应着一个氨基酸
。
在翻译过程中，
mRNA
的密码子将被识别并与适配的
tRNA
上的反密码子进行碱基配对，从而在核糖体中合成相应的氨基酸序列，最终形成蛋白质
。
[0021]本专利技术的有益效果是：
[0022]本专利技术：
1、
收集
COPD
肺组织样本，通过
HE
染色观察气道重塑和肺气肿情况，免疫组化分析
SHP
‑1蛋白和
PI3K/AKT
表达，通过基础试验手段检测
SHP
‑
1、PI3K/AKT
及炎症因子表达，并与对照组肺组织标本比较，阐述
SHP
‑
1、PI3K/AKT、
气道重塑和肺气肿之间的相关性
[0023]2、
利用已构建成功的气道上皮细胞
SHP
‑1基因特异性敲除的转基因小鼠和野生型小鼠，参考文献构建
CSE
诱导的
COPD
动物模型，阐明
SHP
‑
1、PI3K/AKT
与气道重塑和肺气肿的相关性并于临床标本对照，探究其作用机制
。
[002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，其特征在于，包括：步骤1：设立组别
、
建立
COPD
小鼠模型；步骤2：取材，
48
天
(
末次给药
24
～
48
小时后
)
时行肺功能检测后取血液和肺泡灌洗液，肺组织；步骤3：指标检测；步骤4：观察各组检测指标间差异，统计分析数据；步骤5：根据所获得的结果，探讨
SHP
‑
1、PI3K/AKT
与气道重塑和肺气肿的相关性并于临床标本对照验证，探究
SHP
‑1调控
PI3K/AKT
干预气道重塑和肺气肿的作用及可能机制
。2.
根据权利要求1所述的
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，其特征在于，所述方案利用已构建成功的气道上皮细胞
SHP
‑1基因特异性敲除的转基因小鼠和野生型小鼠，构建
CSE
诱导的
COPD
动物模型
。3.
根据权利要求1所述的
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，其特征在于，所述步骤一中，需选取野生型雄性
C57BL/6
小鼠
24
只，
SHP
‑1Δ
/
Δ
小鼠
24
只，6‑8周龄，将动物按随机数字表法平均分为野生型对照组
、
野生型
COPD
模型组
、SHP
‑1Δ
/
Δ
对照组
、SHP
‑1Δ
/
Δ
COPD
模型组
。4.
根据权利要求1所述的
SHP
‑
1、
细胞信号通路与肺疾病的相关性检测方法，其特征在于，所述步骤3中指标检测的步骤包括：
S...

【专利技术属性】
技术研发人员：何权，马小梅，陈子，陆旭之，封伟奇，凌婷，
申请(专利权)人：镇江市中西医结合医院镇江市第二人民医院，
类型：发明
国别省市：