【技术实现步骤摘要】
猪链球菌与副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗及其制备方法
[0001]本专利技术涉及生物
,尤其涉及猪链球菌与副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗及其制备方法
。
技术介绍
[0002]链球菌病是由链球菌属中致病性链球菌所致的动物和人共患的一种多型性传染病,为重要的细菌性传染病之一,多使用疫苗进行预防
。
猪链球菌
(Streptococcus suis
,
SS)
是一种革兰阳性球菌,存在
35
种血清型,其主要毒力因子包括荚膜多糖
、
溶菌酶释放蛋白
、
细胞外因子以及溶血素等
。
其中溶菌酶释放蛋白及细胞外蛋白因子是猪链球菌2型的两种重要毒力因子
。
[0003]猪副嗜血杆菌病又称多发性纤维素性浆膜炎和关节炎,也称格拉泽氏病
。
是由猪副嗜血杆菌引起的传染病
。
可通过疫苗进行预防
。
猪副嗜血杆菌
(Haemophilus parasuis
,
HPS)
属革兰氏阴性短小杆菌,目前已经鉴定了
15
种血清型,但还有
20
%以上的分离株不能分型,且各血清型之间的毒力也存在较大差异
。
猪副嗜血杆菌的主要毒力因子包括荚膜多糖
、
脂多糖
、
脂寡糖
、
外膜蛋白
、
转铁结合蛋白或神经酰胺酶等 >。
[0004]近年来,链球菌病和猪副嗜血杆菌病对养猪场的危害日益严重,开发链球菌病和猪副嗜血杆菌病的二联疫苗成为研究的热点
。
目前行业普遍流行的做法为副猪嗜血杆菌和猪链球菌分离培养后,采用规模扩大培养,然后使用灭活剂灭活后添加免疫佐剂制成全菌灭活苗
。
但全菌灭活苗存在的主要问题为,总蛋白含量大,存在免疫应激,其次过多无效蛋白的引入导致免疫效果不佳;另外最主要的是副猪嗜血杆菌和链球菌血清型较多,不同型之间交叉保护作用比较弱,灭活苗不能提供良好的保护
。
除灭活苗外,目前也有关于副猪嗜血杆菌或猪链球菌的基因工程疫苗的报道,但由于选用的抗原多以包涵体形式表达,难以形成有效的生物学活性或者生物学活性比较差,最终导致难以产生有效的免疫效果
。
技术实现思路
[0005]有鉴于此,本专利技术要解决的技术问题在于提供具有良好免疫效果的猪链球菌与副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗及其制备方法
。
[0006]本专利技术抗原片段来源于生产分离株,更加贴近生产需求与生产毒株更为吻合,有利于后续免疫效果提升
。
在保持免疫效果的前提下,为了提高抗原片段的可溶性表达,本专利技术提供了猪链球菌和猪副嗜血杆菌抗原的截短片段
。
[0007]本专利技术提供的猪链球菌抗原的截短片段来自猪链球菌
palA
蛋白,在本专利技术中记做
HPS
‑1‑
PALA
Δ
。HPS
‑1‑
PALA
Δ
具有如
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列,或为在
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列中经取代
、
缺失或替代一个或多个氨基酸残基的蛋白,或者为与
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有至少
70
%同源性的且具有相同或相似功能的蛋白
。
一些具体实施例中,本专利技术提供的猪链球菌抗原截短片段
HPS
‑1‑
PALA
Δ
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示
。
[0008]本专利技术提供的另一个猪链球菌抗原的截短片段来自猪链球菌的寡聚肽
ABC
结合转运蛋白,在本专利技术中记做
HPS
‑
06257
Δ
,
HPS
‑
06257
Δ
具有如
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列,或为在
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列中经取代
、
缺失或替代一个或多个氨基酸残基的蛋白,或者为与
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列具有至少
70
%同源性的且具有相同或相似功能的蛋白
。
一些具体实施例中,本专利技术提供的猪链球菌抗原截短片段
HPS
‑
06257
Δ
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:2
所示
。
[0009]本专利技术提供的猪副嗜血杆菌抗原的截短片段来自猪副嗜血杆菌的不著名蛋白,在本专利技术中记做
SS
‑
0197
Δ
,
SS
‑
0197
Δ
具有如
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列,或为在
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列中经取代
、
缺失或替代一个或多个氨基酸残基的蛋白,或者为与
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列具有至少
70
%同源性的且具有相同或相似功能的蛋白
。
一些具体实施例中,本专利技术提供的猪链球菌抗原截短片段
SS
‑
0197
Δ
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:3
所示
。
[0010]本专利技术提供的另一个猪副嗜血杆菌抗原的截短片段来自猪副嗜血杆菌的不著名蛋白,在本专利技术中记做
SS
‑2‑
1036
Δ
,
SS
‑2‑
1036
Δ
具有如
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列,或为在
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列中经取代
、
缺失或替代一个或多个氨基酸残基的蛋白,或者为与
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列具有至少
70
%同源性的且具有相同或相似功能的蛋白
。
一些具体实施例中,本专利技术提供的猪链球菌抗原截短片段
SS
‑2‑
1036
Δ
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
所示
。
[0011]进一步的,本专利技术还提供了一种抗原组合,其包括
HPS
‑1‑
PALA
Δ
、HPS
‑
06257
△
、SS
‑
0197
△
和
SS
‑2‑
1本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
抗原组合,其包括猪链球菌抗原和猪副嗜血杆菌抗原;所述猪链球菌抗原包括
HPS
‑1‑
PALA
△
和
/
或
HPS
‑
06257
△
;所述猪副嗜血杆菌抗原包括
SS
‑
0197
△
和
/
或
SS
‑2‑
1036
△
;其中,
HPS
‑1‑
PALA
△
具有如
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列;
HPS
‑
06257
△
具有如
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列;
SS
‑
0197
△
具有如
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列;
SS
‑2‑
1036
△
具有如
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列
。2.
核酸组合,其特征在于,包括编码权利要求1所述抗原组合中任意抗原的核酸
。3.
根据权利要求2所述的核酸组合,其特征在于,编码
HPS
‑1‑
PALA
△
的核酸具有如
SEQ ID NO:5
所示的核酸序列;编码
HPS
‑
06257
△
的核酸具有如
SEQ ID NO:6
所示的核酸序列;编码
SS
‑
0197
△
的核酸具有如
SEQ ID NO:7
所示的核酸序列;编码
SS
‑2‑
1036
...
【专利技术属性】
技术研发人员:牛旻,杨瑞华,贾宾,任素静,段雯方,
申请(专利权)人:河南兴华生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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