油菜茎基溃疡病菌的ＰＣＲ检测方法及检测用引物技术

本发明专利技术公开了一种油菜茎基溃疡病菌的ＰＣＲ检测方法及检测用引物，根据油菜茎基溃疡病菌Ｌ．ｍａｃｕｌａｎｓ与其近似种ＩＴＳ序列的差异，设计了检测Ｌ．ｍａｃｕｌａｎｓ的特异性引物Ｌｍｂ３（５’－ｃａｃｃａａｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｔａ－３’）／Ｌｍｂ４（５’－ａｇｇｃｇａｇｔｃｃｃａａｇｔｇｇａａｃａ－３’），建立了Ｌ．ｍａｃｕｌａｎｓ的ＰＣＲ检测方法。该方法的检测灵敏度为４ｐｇ菌丝ＤＮＡ，油菜籽样品的检测试验表明这种ＰＣＲ方法可用于进境油菜籽样品中油菜茎基溃疡病菌Ｌ．ｍａｃｕｌａｎｓ的快速检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种油菜茎基溃疡病菌的ＰＣＲ检测方法，其特征在于，包括如下步骤：　　（１）设计引物，该引物的序列为：　　Ｌｍｂ３：５’－ｃａｃｃａａｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｔａ－３’（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．１）或其互补链；　　Ｌｍｂ４：５’－ａｇｇｃｇａｇｔｃｃｃａａｇｔｇｇａａｃａ－３’（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．２）或其互补链；　　（２）收集菌丝并提取ＤＮＡ；　　（３）采用步骤（１）设计的引物进行ＰＣＲ检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：易建平，尚琳琳，周国梁，
申请(专利权)人：中华人民共和国上海出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]