一种抗制造技术

本发明专利技术属于于功能抗体技术领域，公开了一种抗

【技术实现步骤摘要】
一种抗H7亚型流感病毒的纳米抗体及其应用


[0001]本专利技术属于功能抗体
，更具体的，涉及一种抗
H7
亚型流感病毒的纳米抗体及其应用
。

技术介绍

[0002]流感病毒是一种单股
、
负链
、
有囊膜
、
分节段的
RNA
病毒，属于正黏病毒科流感病毒属，其基因组由8个基因节段组成
。
流感病毒的核蛋白与基质蛋白，即
NP
与
M1
，根据二者的抗原性将流感病毒分为甲
、
乙
、
丙
、
丁四个亚型
。
甲型流感因其
HA
不同亚型可以与
NA
的不同亚型相互组合，形成百余种不同亚型的流感病毒，
H7N9
亚型流感病毒是其中的一种，它于
2013
年3月底在中国上海和安徽两地首先发现
。H7N9
亚型流感病毒是一种三源重配病毒，其两个表面基因
【
血凝素
(HA)
和神经氨酸酶基因
(NA)】
分别来源于野鸟中的
H7Nx
病毒和
HxN9
病毒，六个内部骨架基因
(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)
来源于家禽中流行的
H9N2
病毒
。
该病毒通常只在禽鸟类中传播，但后来
H7N9
>病毒的非结构蛋白基因组发生了一个单核酸突变，让
H7N9
病毒在包括人类的哺乳动物中繁殖能力增强，使得
H7N9
病毒成为可以跨物种感染人类的流感病毒
。
[0003]中和抗体是一种受广泛关注且能有效阻断病毒复制的抗病毒制剂，随着研究的不断深入，纳米抗体优越的特性也将会在更多领域展现其应用价值
。
原因是纳米抗体具有许多常规抗体所不具备的独特优势：
1、
与抗原结合力高：
VHH
与常规的
VH
相比，有更长的互补决定区
3(CDR3)
，这种长
CDR3
结构易形成凸环结构，可以结合到抗原分子隐蔽的抗原表位，因此弥补了纳米抗体由于轻链缺失而导致的抗原结合能力下降；
2、
容易生产：因为结构简单
、
可以被单个基因编码以及分子质量小等特点，可以通过基因工程技术成功用酵母菌
、
大肠杆菌等大量表达纳米抗体，从而能够以较低的成本进行大量生产；
3、
穿透性强：纳米抗体体积小，并且具有倾向于与凹形表位结合的特性，因此纳米抗体有更强的组织穿透能力，并能识别常规抗体难以接近靶向的目标表面上的沟
、
缝或被隐藏的抗原表位
。
[0004]现有技术缺少关于
H7
亚型流感相关的研究，且抗体筛选较少
。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的上述问题，首先提供一种纳米抗体
。
[0006]本专利技术的第二个目的是提供编码上述纳米抗体的核苷酸序列
。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供所述纳米抗体的应用
。
[0008]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
[0009]一种纳米抗体，所述纳米抗体的氨基酸序列：
[0010](a)
如
SEQ ID NO
：4所示；
[0011](b)
在
(a)
限定的氨基酸序列中经过取代
、
缺失或添加一个或几个氨基酸且与
SEQ ID NO
：4具有同一性的序列
。
[0012]具体的，所述纳米抗体
C7C9
含有三个重链可变区，分别为
CDR1、CDR2、
和
CDR3
，所述
CDR1
的氨基酸序列：
[0013](a)
如
SEQ ID NO
：5所示，或
[0014](b)
在
(a)
限定的氨基酸序列中经过取代
、
缺失或添加一个或几个氨基酸且与
SEQ ID NO
：5具有同一性的序列
。
[0015]所述
CDR2
的氨基酸序列：
[0016](a)
如
SEQ ID NO
：6所示，或
[0017](b)
在
(a)
限定的氨基酸序列中经过取代
、
缺失或添加一个或几个氨基酸且与
SEQ ID NO
：6具有同一性的序列
。
[0018]所述
CDR3
的氨基酸序列：
[0019](a)
如
SEQ ID NO
：7所示，或
[0020](b)
在
(a)
限定的氨基酸序列中经过取代
、
缺失或添加一个或几个氨基酸且与
SEQ ID NO
：7具有同一性的序列
。
[0021]本专利技术还保护用于编码权利要求1所述的纳米抗体的核苷酸序列，所述核苷酸序列为：
[0022](a)
如
SEQ ID NO
：4所示，
[0023](b)
在严格条件下与
(a)
限定的核苷酸序列杂交且编码具有
SEQ ID NO
：4所示氨基酸序列的
DNA
分子
。
[0024]本专利技术还保护含有所述核苷酸序列的表达盒
、
重组载体或者转基因细胞系；具体的，在本专利技术中，所述质粒
pCMV3
‑
VHH
也在保护范围内
。
[0025]本专利技术还保护含有所述纳米抗体的产品，所述产品保护抗
H7
亚型流感病毒纳米抗体以及偶联部分，所述偶联部分选自检测标记物
、
放射性核素
、
酶
、
毒素和化疗剂中的至少一种
。
[0026]优选地，所述检测标记物为荧光或发光标记物
。
[0027]优选地，所述放射性核素为诊断用同位素
。
[0028]优选地，所述诊断用同位素为
Tc
‑
99m、Ga
‑
68、F
‑
18、I
‑
123、I
‑
125、I
‑
131、In
‑
111、Ga
‑
67、Cu
‑
64、Zr<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的氨基酸序列：
(a)
如
SEQ ID NO
：4所示；
(b)
在
(a)
限定的氨基酸序列中经过取代
、
缺失或添加一个或几个氨基酸且与
SEQ ID NO
：4具有同一性的序列
。2.
用于编码权利要求1所述的纳米抗体的核苷酸序列，其特征在于，所述序列为：
(a)
如
SEQ ID NO
：4所示，
(b)
在严格条件下与
(a)
限定的核苷酸序列杂交且编码具有
SEQ ID NO
：4所示氨基酸序列的
DNA
分子
。3.
含有权利要求2所述核苷酸序列的表达盒
、
重组载体或者转基因细胞系
。4.
含有权利要求1所述纳米抗体的产品，其特征在于，所述产品包括抗
H7
亚型流感病毒纳米抗体以及偶联部分，所述偶联部分选自检测标记物
、
放射性核素
、
酶
、
毒素和化疗剂中的至少一...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭霄峰，褚颖，牛学锋，余运淞，李冰洁，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院广州呼吸中心，
类型：发明
国别省市：