一种用于卵子制造技术

本发明专利技术提出了一种用于卵子

【技术实现步骤摘要】
一种用于卵子/胚胎复苏的玻璃化解冻液及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液及其制备方法，属于生物

。

技术介绍

[0002]配子和胚胎的冷冻保存已经是辅助生殖领域中一个必要的部分
。
冷冻保存技术的发展亦可反映辅助生殖技术的发展程度，现在的冷冻技术已用于冷冻保存精子
、
卵子和不同时期的胚胎，尤其是玻璃化冷冻技术
(Vitrification)
，不仅获得医学界广泛的认可，并逐渐取代传统慢速冷冻法，而成为冷冻保存技术的最佳选择，并且在卵子
、
卵巢组织和人类胚胎干细胞的冷冻保存方面也显示出巨大的作用
。
[0003]玻璃化冷冻法的基本原理是将高浓度的冷冻保护剂在超低温环境下冻结，形成玻璃化状态，保存了液态时正常分子和离子分布，因而玻璃化可以对细胞产生保护作用
。
所保存细胞在冷冻保护剂中脱水到一定程度后，则引起内源性胞质大分子如蛋白质及渗透到胞内的冷冻保护剂浓缩，从而使细胞在剧烈的快速降温中得到保护
。
这些冷冻保护剂容易同溶液中的水分子结合，从而降低冰点，减少冰晶的形成，并且通过其摩尔浓度降低未结冰溶液中电解质的浓度，使细胞免受溶质损伤，细胞得以在超低温条件下保存
。
[0004]在复苏时，目前主要通过解冻液
、
稀释液和洗涤液三步法进行解冻操作
。
一般解冻液和稀释液为在洗涤液的基础上添加蔗糖
。
通常以很快的速度升温，在最短的时间内即恢复到常温，细胞内外不会重新形成较大的冰晶，也不会暴露在高浓度的电解质溶液中过长的时间，从而无冰晶损伤和溶质损伤产生，冻存的细胞经复苏后仍保持其正常的结构和功能
。
但是目前的玻璃化解冻液存在细胞存活率
、
囊胚形成率较低的问题
。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是提供一种玻璃化解冻液，以解决现有的玻璃化解冻液存在的细胞存活率
、
囊胚形成率较低的问题
。
本专利技术采用如下技术方案实现：
[0006]一种用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液及其制备方法，所述用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液包括解冻液
、
稀释液和洗涤液；
[0007]所述洗涤液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白；
[0008]所述稀释液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、400
～
600mmol/L
的海藻糖；
[0009]所述解冻液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、800
～
1200mmol/L
的海藻糖
。
[0010]可选地，所述稀释液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、480
～
520mmol/L
的海藻糖；
[0011]所述解冻液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、950
～
1050mmol/L
的海藻糖
。
[0012]可选地，所述解冻液
、
稀释液和洗涤液中均包含9～
15mg/mL
的人血白蛋白
。
[0013]可选地，所述基础离子剂中包含氯化钠
、
氯化钾
、
硫酸镁
、
磷酸二氢钾
、
氯化钙
。
[0014]可选地，所述解冻液中包含
55
～
85mmol/L
的氯化钠
、2.5
～
4.5mmol/L
的氯化钾
、0.1
～
0.2mmol/L
的硫酸镁
、0.2
～
0.3mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.1
～
1.8mmol/L
的氯化钙；
[0015]所述稀释液中包含
60
～
100mmol/L
的氯化钠
、3
～
5mmol/L
的氯化钾
、0.1
～
0.2mmol/L
的硫酸镁
、0.25
～
0.4mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.2
～
2.1mmol/L
的氯化钙；
[0016]所述洗涤液中包含
70
～
115mmol/L
的氯化钠
、3.5
～
5.5mmol/L
的氯化钾
、0.15
～
0.25mmol/L
的硫酸镁
、0.25
～
0.45mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.5
～
2.5mmol/L
的氯化钙
。
[0017]可选地，所述基础能量剂中包含丙酮酸钠
、
乳酸钠
、
葡萄糖
。
[0018]可选地，所述解冻液中包含
0.16
～
0.3mmol/L
的丙酮酸钠
、12
～
20mmol/L
的乳酸钠
、2
～
3.5mmol/L
的葡萄糖；
[0019]所述稀释液中包含
0.2
～
0.35mmol/L
的丙酮酸钠
、14
～
22mmol/L
的乳酸钠
、2
～
3.5mmol/L
的葡萄糖；
[0020]所述洗涤液中包含
0.25
～
0.4mmol/L
的丙酮酸钠
、15
～
25mmol/L
的乳酸钠
、2
～
3.5mmol/L
的葡萄糖
。
[0021]可选地，所述解冻液中包含
2.2
～
3.5mmol/L
的碳酸氢钠
、10
～
18mmol/L
的羟乙基哌嗪乙磺酸；
[0022]所述稀释液中包含
2.5
～
4mmol/L
的碳酸氢钠
、12
～
22mmol/L
的羟乙基哌嗪乙磺酸；
[0023]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液包括解冻液
、
稀释液和洗涤液；所述洗涤液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白；所述稀释液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、400
～
600mmol/L
的海藻糖；所述解冻液中包含基础离子剂
、
基础能量剂
、
人血白蛋白
、800
～
1200mmol/L
的海藻糖
。2.
根据权利要求1所述的用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述解冻液
、
稀释液和洗涤液中均包含9～
15mg/mL
的人血白蛋白
。3.
根据权利要求1所述的用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述基础离子剂中包含氯化钠
、
氯化钾
、
硫酸镁
、
磷酸二氢钾
、
氯化钙
。4.
根据权利要求3所述的用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述解冻液中包含
55
～
85mmol/L
的氯化钠
、2.5
～
4.5mmol/L
的氯化钾
、0.1
～
0.2mmol/L
的硫酸镁
、0.2
～
0.3mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.1
～
1.8mmol/L
的氯化钙；和
/
或，所述稀释液中包含
60
～
100mmol/L
的氯化钠
、3
～
5mmol/L
的氯化钾
、0.1
～
0.2mmol/L
的硫酸镁
、0.25
～
0.4mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.2
～
2.1mmol/L
的氯化钙；和
/
或，所述洗涤液中包含
70
～
115mmol/L
的氯化钠
、3.5
～
5.5mmol/L
的氯化钾
、0.15
～
0.25mmol/L
的硫酸镁
、0.25
～
0.45mmol/L
的磷酸二氢钾
、1.5
～
2.5mmol/L
的氯化钙
。5.
根据权利要求1所述的用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述基础能量剂中包含丙酮酸钠
、
乳酸钠
、
葡萄糖
。6.
根据权利要求5所述的用于卵子
/
胚胎复苏的玻璃化解冻液，其特征在于，所述解冻液中包含
0.16
～
0.3mmol/L<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培尚，李兴艳，王志松，
申请(专利权)人：迈得诺医疗科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：