抗人制造技术

本发明专利技术属于抗体领域，具体涉及抗人

【技术实现步骤摘要】
抗人PD
‑
L1鼠单抗及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于抗体领域，具体涉及抗人
PD
‑
L1
鼠单抗及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]细胞程序性死亡
‑
配体
1(Programmed cell death 1ligand 1
，
PD
‑
L1)
也称为表面抗原分化簇
274(cluster of differentiation 274
，
CD274)
或
B7
同源体
(B7homolog 1
，
B7
‑
H1)
，是人类体内的一种蛋白质，由
CD274
基因编码
。PD
‑
L1
是大小为
40kDa
的第一型跨膜蛋白，据信其在某些特殊情形
(
例如怀孕
、
组织移植
、
自体免疫疾病，以及诸如肝炎等某些疾病
)
下，与免疫系统的抑制有关
。
正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，促发具抗原特异性的细胞毒杀性
T
细胞
(CD8+Tcell
增生
)。
而细胞程序性死亡受体
‑
1(PD
‑
1)
与
PDr/>‑
L1
结合，可以传导抑制性的信号，减低淋巴结
CD8+T
细胞的增生，而且
PD
‑1还可以借由调节
Bcl
‑2基因，控制淋巴结中抗原特异性
T
细胞的聚积
。
[0003]PD
‑
L1
抗体属于免疫检测点抑制剂，是一种抗体类的肿瘤免疫药物
。
它的机制是增强体内免疫细胞
T
对肿瘤的识别，从而达到杀灭肿瘤的作用
。
在许多肿瘤环境中，肿瘤细胞高表达
PD
‑
L1
分子，与肿瘤部位浸润
T
淋巴细胞表面的
PD
‑1分子结合后，抑制
T
细胞活性，实现肿瘤的免疫逃避
。
而目前
PD
‑
1/PD
‑
L1
抑制剂均是检测
PD
‑
L1
的表达
。
[0004]免疫检查点抑制剂可以与
PD
‑1或
PD
‑
L1
结合，阻断肿瘤细胞对免疫功能的控制，保证
T
细胞等免疫细胞的功能，重拾
T
细胞对肿瘤的清除作用
。
因此，如果肿瘤细胞含有大量的
PD
‑
L1
，肿瘤患者可能会获益于免疫检查点抑制剂的治疗
。
免疫疗法可增强患者的免疫系统以帮助其识别并抵抗肿瘤细胞，它往往比其他的治疗方法具有更少的副作用
。
[0005]专利
CN 107973854 B
提供的
PD
‑
L1
单克隆抗体能有效抑制局部肿瘤生长；阻断
PD
‑
1/PD
‑
L1
信号可以促进肿瘤抗原特异性
T
细胞的增殖，发挥杀伤肿瘤细胞的作用；阻断肿瘤细胞上相关
PD
‑
L1
信号可上调浸润
CD8+T
细胞
IFN
γ
的分泌
。
专利
CN 109627339 B
公开了结合人
PD
‑
L1
的抗体或其抗原结合部分，编码所述抗体或其抗原结合部分的多核苷酸
、
包含所述多核苷酸的载体
、
包含所述多核苷酸或载体的宿主细胞
、
制备和纯化该抗体的方法及所述抗体或其抗原结合部分的应用
。
[0006]基于临床需求，研制出一种可以大量制备，亲和力和特异性更高的针对
PD
‑
L1
蛋白的单克隆抗体对诊断和治疗肿瘤疾病特具有重要的生物学和医学意义
。

技术实现思路

[0007]为了解决上述问题，本专利技术提供了抗人
PD
‑
L1
抗体的具体氨基酸序列，通过该序列可以利用现有技术获得表达抗人
PD
‑
L1
抗体的基因工程细胞，提高了
PD
‑
L1
抗体的产率和生产稳定性，并且该抗体亲和力高，特异性强，有望用于制备抗肿瘤
、
免疫系统和神经系统疾病的诊断和治疗药物
。
[0008]术语：
[0009]本专利技术中，
CDR(complementarity
‑
determining regions
，
CDR)
叫做互补决定区或
互补决定簇
。
它位于免疫球蛋白的超变区，超变区是抗体的抗原结合位，与抗原决定簇的结构互补
。
一般包括
CDR1、CDR2、CDR3。
[0010]本专利技术中，可变区指免疫球蛋白轻链和重链靠近
N
端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区
。
[0011]本专利技术中，重链指抗体中2条较长
、
相对分子量较大的相同的重链
(H
链
)
；轻链指抗体中2条较短
、
相对分子量较小的相同的轻链
(L
链
)。
[0012]本专利技术中，相似性指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性和可取代氨基酸所占的比例
。
[0013]本专利技术中，单克隆抗体指由单一
B
细胞克隆产生的高度均一
、
仅针对某一特定抗原表位的抗体
。
[0014]本专利技术中，鼠源化抗体指将来源于免疫接种过的小鼠的
B
细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的鼠杂交融合细胞分泌的抗体
。
[0015]一方面，本专利技术提供了抗人
PD
‑
L1
抗体，所述的抗人
PD
‑
L1
抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，所述的轻链可变区包括
LCDR1、LCDR2、LCDR3
，其中：
[0016本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
抗人
PD
‑
L1
抗体，其特征在于，包括重链和轻链，所述的重链包括重链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，所述的轻链可变区包括
LCDR1、LCDR2
和
LCDR3
，其中：
(1)HCDR1
为
SEQ ID NO.1
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列；
(2)HCDR2
为
SEQ ID NO.3
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.4
所示的氨基酸序列；
(3)HCDR3
为
SEQ ID NO.5
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.6
所示的氨基酸序列；
(4)LCDR1
为
SEQ ID NO.7
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.8
所示的氨基酸序列；
(5)LCDR2
为
SEQ ID NO.9
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.10
所示的氨基酸序列；
(6)LCDR3
为
SEQ ID NO.11
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.12
所示的氨基酸序列
。2.
根据权利要求1所述的抗人
PD
‑
L1
抗体，其特征在于，所述的抗人
PD
‑
L1
抗体重链可变区的氨基酸序列为
SEQ ID NO.13
或与
SEQ ID NO.13
具有
80
％以上序列相似性的序列；或所述的抗人
PD
‑
L1
抗体重链可变区的氨基酸序列为
SEQ ID NO.14
或与
SEQ ID NO.14
具有
80
％以上序列相似性的序列；所述的抗人
PD
‑
L1
抗体轻链可变区的氨基酸为
SEQ ID NO.15
或与
SEQ ID NO.15
具有
80
％以上序列相似性的序列；或所述的抗人
PD
‑
L1
抗体轻链可变区的氨基酸为
SEQ ID NO.16
或与
SEQ ID NO.16
具有
80
％以上序列相似性的序列
。3.
根据权利要求1所述的抗人
PD
‑
L1

【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，昌鑫，王美淳，褚冰儿，赵鑫萍，徐飞，张娅，褚建达，陈浩，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：