一种制备高纯度桃叶珊瑚苷的方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及一种制备高纯度桃叶珊瑚苷的方法。本发明专利技术采用正己烷脱脂，残渣用水或乙醇水溶液超声提取；所得提取液经高分子填料固定相的色谱柱，采用少量水和低浓度乙醇水溶液洗脱，分离的产物浓缩后经硅胶柱进行分离、重结晶，即得高纯度的桃叶珊瑚苷。本方法制备产物规模大、纯度高，所采用的高分子填料固定相和硅胶柱可反复使用，成本较低，用于洗脱的有机相不含毒性大、对环境有严重污染的有机溶剂，有机相回收后可重复利用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属医药
，涉及。
技术介绍
桃叶珊瑚苷，是一种环烯醚萜苷。分子式C15H2209；分子量346.33 ；分子结构式 理化性质熔点181°C (乙醇-乙醚)，易溶于水、甲醇，溶于乙醇，不溶于乙醚、氯 仿、苯及石油醚。桃叶珊瑚苷(AU)在植物中广泛存在，尤其是杜仲、车前子、地黄、马先蒿属及桃叶 珊瑚属植物。药理研究表明，AU具有护肝解毒、抗炎、抗氧化及延缓衰老、抗骨质疏松、神经 营养等作用，被广泛用于保健行业。目前，桃叶珊瑚苷提取工艺方面研究较少，中国专利200810017377. 2公开了 “一 种从马先蒿植物中提取桃叶珊瑚苷的方法”，主要包括乙醚脱脂、甲醇冷浸、丙酮结晶、乙 醇-甲醇重结晶，该方法提取时间长，产率较低，用了大量甲醇溶液，毒性大，存在一定安全 隐患。中国专利200810031122. 1公开了“一种从杜仲中提取环烯醚萜活性部位及单体的方 法”，该种方法采用高效液相色谱需要价格昂贵的仪器，且制备的量受限制，一般只能达到 毫克级的分离。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服上述现有技术的缺陷及不足，提供一种运营成本低、提 率较高、对环境无严重污染的提取工艺。本专利技术的技术解决方案是桃叶珊瑚苷的制备工艺包括以下步骤(1)脱脂将原料粉碎，加入正己烷脱脂1-2次，得脱脂粗料；(2)提取上述脱脂粗料加入水或稀乙醇超声提取2-3次，合并提取液；(3)高分子填料柱层析上述提取液加入高分子填料固定相的色谱柱，用少量水 和低浓度乙醇水溶液进行洗脱；(4)硅胶柱层析将上述洗脱液浓缩至无醇味，加入中压硅胶柱，用水及10%乙醇 洗脱，收集洗脱液；(5)浓缩结晶浓缩至体积1/5-1/10，丙酮饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置结 晶，结晶2-3次，过滤，干燥，即得白色针晶产品。所述原料可选车前子、桃叶珊瑚、峨眉桃叶珊瑚、杜仲叶、杜仲果实及马先蒿属植 物中的一种。所述正己烷用量为原料的8-10倍量，脱脂时间为1. 5-2小时。所述稀乙醇浓度为40-60%，用量为原料质量的5-8倍量；所述超声提取时间为每 次0. 5-1小时。所述的填料固定相的色谱柱其中高分子材料为大孔吸附树脂、聚酰胺树脂。所述步骤4的洗脱溶液中乙醇含量为0-30 %，按0 %、10 %、20 %、30 %的次序进行 洗脱，用量分别为 5-6BV、4-6BV、3-5BV、3-5BV。所述的中压硅胶柱分离条件5_8BV水和4_6BV10%乙醇洗脱桃叶珊瑚苷，薄层检 测。所述结晶时间为12-18小时。本专利技术存在以下优点以车前子、杜仲叶、马先蒿属植物或桃叶珊瑚属植物提取， 成本低，资源丰富；大孔树脂富集量大，洗脱杂质效果好，并减少了硅胶柱层析的工作量; 中压硅胶柱可连续上样，提高了硅胶利用率，缩短了生产周期。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限 于下列实施方式具体实施例方式下述实施例中桃叶珊瑚苷的含量测定采用高效液相色谱法(参考杨小梅等发表 的“HPLC法测定杜仲仁中桃叶珊瑚苷的含量”)，具体方法如下高效液相色谱法色谱柱:0DS柱 dp (4. 6mm X 25cm，5 u m)；流动相乙腈-水(3 97)；流速1.Oml/min ；检测波长206nm；进样量20ill;柱温室温。实施例1 将杜仲叶粉碎至40目，取20kg投入提取罐，加入160L正己烷脱脂，脱脂2次，每 次2小时，滤出药渣为脱脂粗料。脱脂粗料中加入120L50%乙醇溶液超声提取30分钟，提 取3次，合并提取液。取20LHPD100大孔吸附树脂装柱，预处理，将提取液加入树脂柱，依次 用5BV水、4BV10%乙醇、4BV20%乙醇、5BV30%乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集桃 叶珊瑚苷流分，回收乙醇，浓缩至无醇味，将浓缩液泵入10L中压硅胶柱，先泵入8BV水再泵 入5BV10%乙醇洗脱，薄层检测，收集桃叶珊瑚苷流分，50°C减压浓缩至原体积的1/8，加丙 酮饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置养晶15小时，结晶2次，过滤，冷冻干燥即得桃叶珊瑚苷191g，经HPLC(峰面积归一化法)测定含量为98. 3%。实施例2 将扭盔马先蒿粉碎至20目，取20kg投入提取罐，加入200L正己烷脱脂，脱脂3次， 每次1. 5小时，滤出药渣为脱脂粗料。脱脂粗料中加入100L60%乙醇溶液超声提取45分 钟，提取2次，合并提取液。取20LAB-8大孔吸附树脂装柱，预处理，将提取液加入树脂柱，依 次用6BV水、4BV10%乙醇、3BV20%乙醇、5BV30%乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集 桃叶珊瑚苷流分，回收乙醇，浓缩至无醇味，将浓缩液泵入10L中压硅胶柱，先泵入5BV水再 泵入6BV10%乙醇洗脱，薄层检测，收集桃叶珊瑚苷流分，50°C减压浓缩至原体积的1/10， 加丙酮饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置养晶12小时，结晶3次，过滤，冷冻干燥即得桃叶 珊瑚苷323g，经HPLC(峰面积归一化法)测定含量为98. 6%。实施例3 将杜仲种仁粉碎至50目，取10kg投入提取罐，加入90L正己烷脱脂，脱脂2次，每 次1. 5小时，滤出药渣为脱脂粗料。脱脂粗料中加入80L40%乙醇溶液超声提取1小时，提 取2次，合并提取液。取10LHPD-600大孔吸附树脂装柱，预处理，将提取液加入树脂柱，依 次用5BV水、6BV10%乙醇、4BV20%乙醇、4BV30%乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集 桃叶珊瑚苷流分，回收乙醇，浓缩至无醇味，将浓缩液泵入10L中压硅胶柱，先泵入6BV水再 泵入5BV10%乙醇洗脱，薄层检测，收集桃叶珊瑚苷流分，40°C减压浓缩至原体积的1/9，加 丙酮饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置养晶18小时，结晶2次，过滤，冷冻干燥即得桃叶珊 瑚苷251g，经HPLC(峰面积归一化法)测定含量为98. 2%。实施例4:将车前草粉碎至30目，取10kg投入提取罐，加入100L正己烷脱脂，脱脂2次，每 次2小时，滤出药渣为脱脂粗料。脱脂粗料中加入70L50%乙醇溶液超声提取1小时，提取 3次，合并提取液。取10LNKA-9大孔吸附树脂装柱，预处理，将提取液加入树脂柱，依次用 6BV水、5BV10%乙醇、3BV20%乙醇、3BV30%乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集桃叶珊 瑚苷流分，回收乙醇，浓缩至无醇味，将浓缩液泵入10L中压硅胶柱，先泵入7BV水再泵入 4BV10%乙醇洗脱，薄层检测，收集桃叶珊瑚苷流分，40°C减压浓缩至原体积的1/8，加丙酮 饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置养晶14小时，结晶3次，过滤，冷冻干燥即得桃叶珊瑚苷 22g，经HPLC(峰面积归一化法)测定含量为98. 8%。实施例5 将峨眉桃叶珊瑚叶粉碎至40目，取5kg投入提取罐，加入30L正己烷脱脂，脱脂2 次，每次1. 5小时，滤出药渣为脱脂粗料。脱脂粗料中加入25L50%乙醇溶液超声提取30 分钟，提取3次，合并提取液。取5L聚酰胺树脂装柱，预处理，将提取液加入树脂柱，依次 用6BV水、5BV10%乙醇、3BV20%乙醇、4BV30%乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集桃 叶珊瑚苷流分，回收乙醇，浓缩至无醇味，将浓缩液泵入5L中压硅胶柱，先泵入8BV水再泵 入4BV10 %本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备高纯度桃叶珊瑚苷的方法，其特征在于包含以下步骤：　　１）脱脂：将原料粉碎，加入正己烷脱脂１－２次，得脱脂粗料；　　２）提取：上述脱脂粗料加入水或稀乙醇超声提取２－３次，合并提取液；　　３）高分子填料柱层析：上述提取液加入高分子填料固定相的色谱柱，用少量水和低浓度乙醇水溶液进行洗脱；　　４）硅胶柱层析：将上述洗脱液浓缩至无醇味，加入中压硅胶柱，用水及１０％乙醇洗脱，收集洗脱液，　　５）浓缩结晶：浓缩至体积１／５－１／１０，丙酮饱和溶解，滴加少量无水乙醇，静置结晶，结晶２－３次，过滤，干燥，即得白色针晶产品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：苏刘花，
申请(专利权)人：南京泽朗农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]