一种免疫球蛋白制造技术

本发明专利技术公开了一种免疫球蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种免疫球蛋白G4检测试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种免疫球蛋白
G4
检测试剂盒及其制备方法
。

技术介绍

[0002]IgG
是血清中免疫球蛋白的主成分，约占血清中免疫球蛋白总含量
75
％
。IgG
有
IgG1、IgG2、IgG3
和
IgG4 4
个亚型，相比于其他免疫球蛋白
G
亚型，免疫球蛋白
G4
浓度含量较低，占总免疫球蛋白
G
的4％
‑5％
。
[0003]而免疫球蛋白
G4
升高或降低，可见于多种免疫系统疾病
。
免疫球蛋白
G4
相关疾病
(G4
‑
RD)
是近年来新发现的一类病因不明的慢性
、
进行性炎症伴纤维化和硬化的疾病，主要特征为血清免疫球蛋白
G4
水平显著增高；受累器官组织由于大量淋巴细胞和免疫球蛋白
G4
阳性浆细胞浸润伴纤维化而发生肿大或结节
/
硬化性病变
。
在免疫球蛋白
G4
相关性疾病诊治中国专家共识
(2021
版
)
中明确指出血清免疫球蛋白
G4
升高是免疫球蛋白
G4
‑
RD
诊断和病情评估的重要指标
。
因此，血清免疫球蛋白
G4
浓度的检测具有一定的临床价值
。
[0004]目前主要的方法学有化学发光
、
免疫比浊
、
胶乳增强免疫比浊
、
酶联免疫吸附和荧光免疫层析法
。
化学发光法灵敏度高，但是试剂稳定性稍差；免疫比浊法试剂中一般使用抗血清或多抗制备，存在较多非特异性蛋白，易发生交叉反应；酶联免疫吸附法价格便宜但是操作过程繁琐，耗时较长；荧光免疫层析法用时较短，但是重复性较差
。
[0005]中国专利公开号为
CN 106771251A
公开了一种试剂盒采用糖基化修饰鼠抗
IgG4
单克隆抗体的方法，能兼顾高灵敏度和特异度
。
中国专利公开号为
CN 114859063A
公开了通过优化胶乳微球与抗体的偶联过程，即在微球与还原抗体之间增加一个载体分子，使抗体从微球表面延伸出来，从而减小抗原和抗体结合的空间位阻实现抗体
F(c)
端与胶乳微球的定向偶联，大大提高了试剂的灵敏度
。
但是这些胶乳试剂工艺复杂，经过多次离心重悬超声过程，不易复现，成本较高
。
另外经过复杂的化学反应，会极大影响试剂开封稳定性，导致试剂在机时间短，造成试剂的浪费
。
[0006]因此，仍然需要研发工艺简单
、
稳定性好且线性范围款的
G4
检测试剂盒，以满足目前临床检测的使用要求
。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的旨在针对现有技术的不足，提供一种免疫球蛋白
G4
检测试剂盒及其制备方法
。
本专利技术以胶乳免疫比浊法为检验原理，旨在提供一种免疫球蛋白
G4
检测试剂盒及其制备方法，来克服现有技术的缺陷，测定人体中免疫球蛋白
G4
的含量
。
本专利技术的制备工艺为一步法，工艺简单，而且在机开封稳定性可延长至
40
天，稳定性好，节约成本，线性宽
。
[0008]为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0009]一种免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，包括
R1
试剂和
R2
试剂，所述
R1
试剂包括以下成分：第一缓冲液
0.01
‑
0.06mol/L
；电解质
10
‑
40g/L
；促融剂
30
‑
80g/L
；第一表面活性剂1‑
10g/L
；
第一防腐剂
0.8
‑
1.2g/L
；所述
R2
试剂包括以下成分：抗免疫球蛋白
G4
单抗包被胶乳颗粒
0.1
‑
2.0g/L
；第二缓冲液
0.01
‑
0.1mol/L
；稳定剂5‑
30g/L
；第二防腐剂
0.8
‑
1.2g/L
；第二表面活性剂0‑
4g/L
；封闭剂0‑
4g/L。
优选的，所述
R1
试剂包括以下成分：第一缓冲液
0.02mol/L
；电解质
20g/L
；促融剂
60g/L
；第一表面活性剂
2g/L
；第一防腐剂
1.0g/L
；所述
R2
试剂包括以下成分：抗免疫球蛋白
G4
单抗包被胶乳颗粒
1.6g/L
；第二缓冲液
0.02mol/L
；稳定剂
20g/L
；第二防腐剂
1.0g/L
；第二表面活性剂
4g/L
；封闭剂
4g/L。
[0010]如上所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，所述的第一缓冲液和第二缓冲液分别为
TRIS
缓冲液
、
硼酸
‑
硼砂缓冲液
、HEPES
缓冲液
、MES
缓冲液
、PB
缓冲液中的一种或几种
。
优选的，所述第一缓冲液为
HEPES
缓冲液，所述第二缓冲液为
HEPES
缓冲液
。
[0011]如上所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，所述促融剂为
PEG6000、PEG8000、PEG12000、PEG20000
中的一种或几种
。
优选的，所述促融剂为
PEG20000。
[0012]如上所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，所述第一表面活性剂和第二表面活性剂分别为
T
‑
20、
曲拉通
‑
100、S9、
甘油中的一种或几种
。
优选的，所述第一表面活性剂为甘油，所述第二表面活性剂为
T
‑
20、
曲拉通
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，包括
R1
试剂和
R2
试剂，所述
R1
试剂包括以下成分：第一缓冲液
0.01
‑
0.06mol/L
；电解质
10
‑
40g/L
；促融剂
30
‑
80g/L
；第一表面活性剂1‑
10g/L
；第一防腐剂
0.8
‑
1.2g/L
；所述
R2
试剂包括以下成分：抗免疫球蛋白
G4
单抗包被胶乳颗粒
0.1
‑
2.0g/L
；第二缓冲液
0.01
‑
0.1mol/L
；稳定剂5‑
30g/L
；第二防腐剂
0.8
‑
1.2g/L
；第二表面活性剂0‑
4g/L
；封闭剂0‑
4g/L。2.
根据权利要求1所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液和第二缓冲液分别为
TRIS
缓冲液
、
硼酸
‑
硼砂缓冲液
、HEPES
缓冲液
、MES
缓冲液
、PB
缓冲液中的一种或几种
。3.
根据权利要求1或2所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述促融剂为
PEG6000、PEG8000、PEG12000、PEG20000
中的一种或几种
。4.
根据权利要求1所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述第一表面活性剂和第二表面活性剂分别为
T
‑
20、
曲拉通
‑
100、S9、
甘油中的一种或几种
。5.
根据权利要求1所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述第一防腐剂和第二防腐剂分别为
Proclin300、
叠氮钠
、
硫柳汞中的一种或几种
。6.
根据权利要求1所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为海藻糖
、
蔗糖
、EDTA
‑
2Na
中的一种或几种
。7.
根据权利要求1所述的免疫球蛋白
G4
检测试剂盒，其特征在于，所述封闭剂为
BSA、
酪蛋白
、
乙醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨帆，宋金玲，孙娜，田永帅，史文艳，高仁玲，
申请(专利权)人：青岛汉唐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：