替加环素葡糖苷酸代谢物及其差向异构体制造技术

已经在用替加环素治疗的人中鉴定了替加环素葡糖苷酸代谢物及其相应的差向异构体。质谱数据已经用于鉴定这些结构。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】替加环素葡糖苷酸代谢物及其差向异构体本专利技术涉及替加环素(tigecycHne)的葡糖苷酸、更具体是葡糖苷酸衍生 物、制备它们的方法以及含有它们的药物组合物。替加环素(GAR-936)是甘氨酰环素类抗生素，并且是半合成四环 素一一米诺环素一一的类似物。它随着出现对抗生素的耐药性的全球性威 胁而被开发出。替加环素在体外和体内均具有广镨抗菌活性。与四环素类 抗生素类似，甘氨酰环素类抗生素通过抑制细菌的蛋白质翻译而起作用。包M加环素在内的甘氨酰环素对多种耐抗生素的革兰氏阳性病原菌 如耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(Sto/^j^a^ow 耐青霉素肺炎 链球菌(ift考,ococc"s /meum卵/ae)和耐万古霉素肠球菌(e"teiwocd)具有 活性(Weiss等人，1995; Fraise等人1995)。替加环素对抗带有两种主要形式 的四环素耐药性一一外流和核糖体保护一一的菌抹的活性具有重要意义 (Schnappinger和HHlen， 1995)。四环素类抗生素很少或不经过代谢。已有报道米诺环素在人体内进行 9-幾基化和N-脱甲基，但是程度有限(Ndis和DeLeenheer， 1982)。还有报道 大部分四环素类抗生素在C4位置进行差向异构化，差向异构化通常:ML认为 是降解而非代谢途径(Remmers等人，1963)。将"C替加环素静脉内施用于 健康男性志愿者后分析了药物的代谢处置，并且还将^研究的结果与大鼠 和狗的临床前代谢研究所获得的结果进行了比较。将"C1替加环素静脉内施用于健康男性志愿者后，对血清、尿液和粪 便中基于放射性标记的替加环素的组分进行了分析。将非放射性替加环素 静脉内施用于男性志愿者后分析了人血清和尿液，报道了类似的结果，其 中报道了最少的代谢。非标记性研究与使用大鼠和狗的代谢研究的结果一 致，在后者中替加环素是静脉内施用后血浆和尿液中主要的与化合物有关 的组分。在本文中，在^^基质中还观察到了替加环素的差向异构体和M3a (叔丁 基氨基乙酸)。已经表明替加环素的差向异构体是降解物而非代谢物，并且向异构体。血清和粪便样品中替加环素差向异构体的量可能被高估了，因 为在用于这些基质的提取操作过程中大量替加环素被转化为了差向异构 体。在大鼠和狗的血浆和尿液中还观察到了推测是M3a的早期洗脱色镨峰。 来自本研究的在血清、尿液和粪便中检测出的与替加环素有关的化合 物显示在流程图l中。流程图l.在Ajk清、尿液和粪便中检测出的与"C1替加环素有关的化合物5 OH O O 替加环素Y入叔丁基氨基乙酸(M3a) S、 U和F中的代谢物o 6 9-氨基米诺环素(M3) S和U中的代谢物0 OHO o 替加环素差向异构体S、 U和F中的降解物,葡糖醛酸替加环素葡糖苷酸(M7)和 替加环素葡糖苷酸的差向异构体(M6) S、 U和F中的代谢物<formula>formula see original document page 15</formula>N-乙耽基9-氨基米诺环素(M9)和 N-乙跣基9-氣基米诺环素的差向异构体(M8)羟基替加环素(Ml、 M2、 M4) U中的痕量代谢物S和U中的代谢物 S:血清；U:尿液；F:粪便；,表示放射性标记的位点在血清和粪便样品的放射色镨图中既观察到了M6 (替加环素葡糖苷酸 的差向异构体)，又观察到了M7 (替加环素葡糖苷酸)。葡糖苷酸化的位置 尚未知晓。代谢物及其差向异构体的可能结构显示如下<formula>formula see original document page 16</formula><formula>formula see original document page 17</formula><formula>formula see original document page 18</formula><formula>formula see original document page 19</formula>差向异构体在尿液样品的放射色镨图中观察到了M7，但没有观察到M6。以前没 有在体外釆用AJf^^体或AJf细胞的实验中或者在体内在大鼠、狗或人 中报道替加环素的葡糖苷酸化。以前采用未标记的替加环素并采用用于初 步评价替加环素代谢的LC/MS样品分析，对AjfcL清和尿液进行分析。在该 研究过程中，没有特别地研究葡糖苷酸代谢物，使用["C1替加环素进行了 体内大鼠和狗样品的分析，没有观察到葡糖苷酸化。在科学文献中没有将 葡糖苷酸化确定为四环素类抗生素的代谢途径的已知报道。代谢物M6和M7可以用作替加环素的前药。 一旦施用，/S-葡糖醛酸糖 苷酶可以切割M6和M7而释放替加环素。作为M6和M7施用而非直接施用 替加环素可以改变药物的吸收、分布、代谢、排泄和/或副作用特性.此夕卜， 这些化合物还可以直接用作抗微生物剂，附图简述图l是人单次静脉内施用50mg剂量"C替加环素后尿液和粪便中放射 性消除的均值(ISD);图2是随时间推移血清中替加环素和放射性浓度的均值(ISD);图3A显示了在"C1替加环素给药后1小时从受试者1提取的人血清的 HPLC放射色^普图；图3B显示了在「CI替加环素给药后8小时从受试者l提取的人血清的 HPLC放射色镨图；图4是在"CI替加环素给药后8小时从受试者1提取的人血清的联合 LC/SRM色镨图；图5A是在"C替加环素给药后0-4小时从受试者4收集的人尿液的 HPLC放射色i脊图；图5B是在替加环素的稳定性；图7是在"Cl替加环素给药后0-4小时从受试者8收集的人尿液的联合 质谦图；图8是在14<:1替加环素给药后34.2小时从受试者8收集的所提取的人粪 便的HPLC放射色谦图；图9是替加环素的m/z 586质谱的子离子(product ion); 图IO是替加环素差向异构体的m/z 586质谱的子离子； 附图说明图11是M2的m/z 602质镨的子离子； 图12A是vMwA尿液中分离的M3a的放射色镨图； 图12B是^v尿液中分离的M3a的质镨图； 图13是M3a的LC/MS质i普；图M是人血清中M3 (^氨基米诺环素)的m/z 4"+456 SRM跃迁的 LC/SRM色镨图；图15是M6的M/Z 762质i普的子离子； 图16是M7的M/Z 762质^瞽的子离子； 图17是M9的M/Z 515质镨的子离子；图18是对替加环素葡糖苷酸所提出的结构和质镨碎裂流程图； 图19A是人尿液LC/MS分析的UV色镨图(其中人尿液来自施用了替加 环素的受试者)；图19B是人尿液LC/MS分析的选择质镨图(其中人尿液来自施用了替 加环素的受试者)；图19C是人尿液LC/MS分析的选择质谱图(其中人尿液来自施用了替 加环素的受试者)；图20A是替加环素葡糖普酸的m/z 762质谦的子离子的满刻度图，(B) 是M大以显示较低强度的子离子的图；图20B是替加环素葡糖苷酸的m/z 762质语的子离子图，被放大以显示 较低强度的子离子；图21A是人尿液m/z 762分析的子离子的LC/本文档来自技高网...

【技术保护点】
通过用替加环素治疗人而制备的替加环素葡糖苷酸代谢物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：RA知唐，W德迈欧，M霍夫曼，
申请(专利权)人：惠氏公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]