【技术实现步骤摘要】
一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL
‑
syn及其制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
,具体地说,涉及一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素及其制备方法与应用
。
技术介绍
[0002]金黄色葡萄球菌
(Staphylococcus aureus
,简称金葡菌
)
为革兰氏阳性菌,是一种重要的人类致病菌,可引起皮肤及软组织等局部感染,严重时甚至会导致败血症
、
脓毒症等全身性感染,严重威胁人类健康
[Ye et al.,Antibiotics(Basel),2022
;
12:67]。
然而,近年来由于抗生素在人和畜牧业中的大量不合理使用,金葡菌对现有的抗生素产生了广泛耐药性
(et al.,JClinMicrobiol,2019
;
57:e01006
‑
19)。
此外,金葡菌生物被膜的形成为耐药性细菌的产生提供了有利的场所
。
在生物被膜的保护下,细菌可以逃避抗生素和宿主先天免疫细胞的攻击,对常规抗生素的耐受性比浮游细菌提高
10
~
1000
倍,从而导致炎症反应增加
(Olsen I.Eur J ClinMicrobiol Infect Dis,2015
;
34:877
‑
886)。2017
年,世界卫生组织已经将甲氧西林耐药金葡 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素
LysSYL
‑
syn
,其特征在于,通过如下方法制备而成:
1)
以分离的金黄色葡萄球菌噬菌体
SYL
编码的内溶素基因
lysSYL
为模板,依据宿主菌的遗传密码使用偏嗜性,人工设计并合成内溶素编码序列
lysSYL
‑
syn
;
2)
将合成的
lysSYL
‑
syn
序列构建于质粒载体上,获得重组质粒;
3)
利用一对引物对所述重组质粒中的目标基因表达框进行扩增,经酶切后插入原核表达载体,转化宿主菌,筛选并获得重组表达质粒
pET
‑
lysSYL
‑
syn
;
4)
将所述重组表达质粒
pET
‑
lysSYL
‑
syn
转化宿主菌
,
筛选重组子进行目标蛋白表达,通过纯化获得重组内溶素
LysSYL
‑
syn。2.
根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素
LysSYL
‑
syn
,其特征在于,所述的金黄色葡萄球菌噬菌体内溶素
lysSYL
的编码核苷酸序列为
SEQ ID NO:1
所示的全部或部分碱基序列,所述噬菌体内溶素
lysSYL
的编码氨基酸序列为
SEQ ID NO:2。3.
根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素
LysSYL
‑
syn
,其特征在于,所述的依据宿主菌遗传密码偏嗜性人工设计合成的内溶素
lysSYL
‑
syn
的编码核苷酸序列为
SEQ ID NO:3<...
【专利技术属性】
技术研发人员:饶贤才,刘鹤,卢曙光,尚伟龙,杨裔,彭华刚,饶一凡,胡珍,李梦阳,
申请(专利权)人:中国人民解放军陆军军医大学,
类型:发明
国别省市:
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