一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物及其应用，涉及生物医药领域，所述标志物为Hsa_circ_0041150，本发明专利技术的标记物的试剂盒可用于小细胞肺癌铂类耐药诊断。本发明专利技术使用无创体液中新的肿瘤标志分子Hsa_circ_0041150对小细胞肺癌铂类化疗耐药患者进行诊断和预后监测，有利于临床诊疗。有利于临床诊疗。有利于临床诊疗。

【技术实现步骤摘要】
一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物及其应用


[0001]本专利技术涉生物医药领域，具体而言，涉及一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物及其应用。

技术介绍

[0002]肺癌是中国男性和女性癌症死亡的主要原因，占全球肺癌死亡人数的40％，给社会带来了巨大的负担。在所有类型的肺癌中，小细胞肺癌(small
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cell lung cancer,SCLC)占15％，其复发率非常高，易早期转移，预后差，是非常危险的。根据发展阶段的不同，SCLC一般分为两种临床分期，即局限期(LD)和广泛期(ED)，由于SCLC具有肿瘤生长迅速、易早期转移扩散的特点，超过三分之二的患者被诊断为ED。因此，与绝大多数实体肿瘤不同，小细胞肺癌首选的治疗方法不是手术而是化疗，普遍接受的一线治疗方法是含铂联合化疗方案。
[0003]虽然绝大多数患者最初对化疗高度敏感，化疗后肿瘤消退明显，但临床问题在于耐药迅速出现，导致肿瘤复发或远处转移。由于SCLC患者很少接受手术，很难反复获得组织样本，且目前临床样本中SCLC肿瘤标志物主要涉及早期诊断，很少涉及化疗耐药的诊断，因此临床迫切需要从容易获得的样本中寻找新的SCLC化疗耐药生物标志物。
[0004]细胞外囊泡(EVs)是细胞分泌的纳米囊泡，平均直径约200纳米。它们包含多种成分，包括核酸、蛋白质、脂质、氨基酸和代谢物，在人体内作为细胞到细胞的运输系统，促进细胞成分的有效交换。检测生物体液中的EVs有可能提供有价值的诊断信息，反映细胞或组织的变化状态。目前对EVs的研究表明，这些纳米囊泡及其成分有望成为诊断、预后和治疗肺癌的新型生物标志物。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物及其应用，解决背景提出所提出的至少一个技术问题。
[0006]第一方面，本专利技术提供一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物，所述标志物为Hsa_circ_0041150。
[0007]第二方面，本专利技术提供一种上述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药诊断中应用。
[0008]第三方面，本专利技术提供一种上述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药治疗中应用。
[0009]第四方面，本专利技术提供一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的试剂盒，所述试剂盒包含Hsa_circ_0041150的上、下游引物；上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：8所示。
[0010]优先的，所述试剂盒还包含反转录反应所需试剂、RNA提取所需试剂和荧光定量PCR反应所需试剂。
[0011]优先的，所述诊断标志物的检测样本为患者的临床生物样本。
[0012]优先的，所述临床生物样本包括血清。
[0013]第五方面，包括降低Hsa_circ_0041150表达的抑制剂，所述Hsa_circ_0041150的序列如：SEQ ID NO.1所示。
[0014]技术效果：
[0015]由于小细胞肺癌患者难以反复获取组织样本，本专利技术使用无创体液(血清+血清细胞外囊泡)中的新的肿瘤标志分子(Hsa_circ_0041150)对小细胞肺癌铂类化疗耐药患者进行诊断和预后监测，有利于临床诊疗。发现新的生物标志物，使用无创体液样本进行耐药诊断，无创体液中新的生物标志物诊断效率优于传统肿瘤标志物。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0017]图1H446和SHP77细胞之间circRNAs表达显著差异(|log2FC|>4,p值<0.05)；
[0018]图2表达上调的环状RNAs的特征；
[0019]图3表达上调环状RNAs的引物；
[0020]图4上调的环状RNAs具有稳定的特征；
[0021]图5circRNAs在SHP77细胞中的表达水平明显高于H446细胞；
[0022]图6SCLC化疗耐药患者血清中circRNAs表达水平上调；
[0023]图7SCLC化疗耐药患者血清细胞外囊泡中circRNAs表达水平上调；
[0024]图8Hsa_circ_0041150对监测SCLC患者化疗耐药有较好的诊断效果；
[0025]图9Hsa_circ_0041150联合NSE可提高SCLC化疗耐药患者的诊断敏感性和特异性；
[0026]图10circRNAs和常规肿瘤标志物在SCLC化疗耐药患者中的ROC曲线；
[0027]图11circRNAs和常规肿瘤标志物在SCLC化疗耐药患者中的诊断效率；
[0028]图12Hsa_circ_0041150对监测SCLC患者从初诊到耐药的进展具有良好的价值；
[0029]图13Hsa_circ_0041150表达水平与SCLC化疗耐药患者临床病理特征的临床关系；
[0030]图14Hsa_circ_0041150促进SCLC细胞的增殖、侵袭、迁移和顺铂耐药。
具体实施方式
[0031]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0032]以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。
[0033]第一方面，本专利技术实施例提供一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物，所述
标志物为Hsa_circ_0041150，序列如SEQ ID NO：1所示。
[0034]第二方面，本专利技术实施例提供一种上述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药诊断中应用。
[0035]第三方面，本专利技术实施例提供一种上述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药治疗中应用。
[0036]第四方面，本专利技术实施例提供一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的试剂盒，所述试剂盒包含Hsa_circ_0041150的上、下游引物。上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：8所示。
[0037]进一步的，所述试剂盒还包含反转录反应所需试剂、RNA提取所需试剂和荧光定量PCR反应所需试剂。反转录反应所需试剂包括II逆转录酶等，RNA提取所需试剂根据提取方法不同所需试剂不同。
[0038]本专利技术实施例，所述诊断标志物的检测样本为患者的临床生物样本，进一步的采用无创操作性体液(血清和血清细胞外囊泡)进行检测。
[0039]本专利技术实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物，其特征在于，所述标志物为Hsa_circ_0041150，序列如：SEQ ID NO.1所示。2.权利要求1所述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药诊断中应用。3.权利要求1所述用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的标志物在小细胞肺癌铂类耐药治疗中应用。4.一种用于小细胞肺癌铂类耐药诊断的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含Hsa_circ_0041150的上、下游引物；上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：8所示。5.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：张扬，沈佐君，李明，
申请(专利权)人：安徽省立医院中国科学技术大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：