【技术实现步骤摘要】
固体载体上的官能团的定量
[0001]本申请是申请号为201680014577.5(PCT/US2016/021741)、申请日为2016年3月10日的专利技术专利申请的分案申请。
[0002]本专利技术涉及诊断测试领域,更特别涉及定量固定化在固体载体上的官能团的方法。
技术介绍
[0003]在医学和临床化学领域中,通过利用特异性结合对成员之间的相互作用进行生理活性物质或被分析物的许多研究和测定。例如,患者样品中的目标被分析物本身可以是特异性结合对的一个成员,其可以通过使用固定化在固体载体上的特异性结合对的相应成员检测。在这种情况下,例如,固定化的结合对成员可以是用于检测样品中的目标抗体的抗原。已经为这些应用开发出各种固体载体材料并且需要各种结合技术将特异性结合对成员固定化在固体载体上。
[0004]例如,顺磁粒子(PMP)是已知的固体载体材料,其可以用官能团如胺官能团官能化。在一些情况下,可以选择这些官能团以与键合在结合对成员上的连接基(例如戊二醛)键合。该结合对成员可能对样品中的目标被分析物(其通常是如上文提到的结合对的第二成员)有选择性。在将该结合对成员固定化在固体载体上时,可能必须确保适当量的官能团可供直接或间接连接该结合对成员。例如,太少的可用官能团可能导致在加入结合对成员时太少的连接位点。这可能导致固体载体不能准确测定在特定浓度下,特别是在目标被分析物的可检测范围内的较高浓度下的目标被分析物的量。另一方面,提供更高浓度的用于固定化特异性结合成员的官能团可能显著提高生产成本而没有任何额外益处 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法,该方法包括以下步骤:(a)使所述固定化在一种或多种顺磁粒子上的目标官能团与一定量的选择性化合物接触,其中一定量的选择性化合物直接结合到所述目标官能团上并形成结合选择性化合物,并且一定量的选择性化合物没有结合到所述目标官能团上并以未结合选择性化合物的形式存在,其中所述目标官能团包含醛类官能团,并且其中所述选择性化合物包含丙胺;(b)获得具有一定量的未结合选择性化合物的副产物;(c)将指示剂添加到所述副产物中,其结合到所述副产物中的未结合选择性化合物上以提供比色结果,其中所述指示剂包含含有2,4,6
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三硝基苯磺酸(TNBSA)的溶液;(d)测量所述比色结果;(e)由所述测量结果测定所述副产物中的未结合选择性化合物的量;(f)由未结合选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的结合选择性化合物的量;和(g)由固定化选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团的量;和(h)使顺磁粒子与有效量的第一结合对成员反应,以使第一结合对成员与顺磁粒子连接,其中基于步骤(g)中测定的固定化在顺磁粒子上的目标官能团的量确定所述第一结合对成员的有效量,并且其中第二结合对成员是样品中的目标被分析物。2.权利要求1所述的方法,其中所述醛类官能团通过将醛类官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上存在的氨基上的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。3.权利要求2所述的方法,其中所述醛类官能团通过戊二醛与所述一种或多种顺磁粒子上的氨基之间的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。4.权利要求1所述的方法,其中在键合到所述一种或多种顺磁粒子上的连接剂上提供所述目标官能团。5.权利要求1所述的方法,其进一步包括,在步骤(h)之前:如果所述一种或多种顺磁粒子上的测定的目标官能团数小于预定值,制造包含固定化在一种或多种顺磁粒子上的附加目标官能团的附加的一种或多种顺磁粒子。6.权利要求1所述的方法,其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。7.权利要求1所述的方法,其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。8.权利要求1所述的方法,其中使所述目标官能团与一定量的选择性化合物接触包括使所述目标官能团与一定量的选择性化合物反应。9.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法,该方法包括以下步骤:(...
【专利技术属性】
技术研发人员:S林,C里默,R斯皮尔斯,
申请(专利权)人:西门子医疗保健诊断公司,
类型:发明
国别省市:
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