一种烟草源产制造技术

本发明专利技术涉及一种烟草源产

【技术实现步骤摘要】
一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌、筛选方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌
、
筛选方法及其应用，属于微生物

。

技术介绍

[0002]淀粉作为烟叶中重要的碳水化合物，是烟叶化学成分中重要组成部分，其含量变化可对烟叶品质造成影响
。
烟叶中淀粉的大量积累会导致叶片增厚
、
变脆，不但会影响燃吸的速度和完全性，而且淀粉在燃烧时会产生焦糊气味以及多种有害物质，对烟草制品的色
、
香
、
味产生不良影响
。
调研发现，我国优质烟叶中的淀粉含量
(4
％
‑6％
)
明显高于国外优质烟叶
(1
％
‑2％
)
，严重制约国内烟叶品质的提升
。
因此，如何降解烟叶中的淀粉，使其分解为可改善烟叶品质的还原糖等小分子物质，成为一个重要的研究热点
。
[0003]目前可通过烟草品种选育
、
栽培方式
、
施肥水平
、
调制和醇化工艺以及酶制剂法和微生物法等方式来降低烟叶中的淀粉含量，以改善烟叶质量，相较于其他措施，微生物具有种类繁多，便于获取，代谢迅速，易培养再生，成本低廉，操作简单等优势
。
[0004]生物酶制剂作为一类绿色
、
>安全
、
高效的生物催化剂，生物酶处理技术在烟叶品质提升方面已展示了巨大的应用潜力
。
冯颖杰等发现1株高产淀粉酶的苏云金芽孢杆菌，该菌能在生长和代谢过程中产生淀粉酶，将烟叶中的淀粉降解为还原糖，还原糖裂解有利于平衡烟气酸碱性
、
协调香气
。
胥海东等筛选出1株产酶较高的枯草芽胞杆菌，最高酶活性为
16.22U/mL
，发酵后喷施于烟叶，其淀粉降解率为
11.49
％
。
但是，目前筛选出的烟草淀粉降解菌，依然存在淀粉酶活性较低
、
耐受温度较低，不适合烟草制品的高温发酵，且降解菌筛选的周期较长
。
因此，优化筛选方法，筛选出淀粉酶活性高且适合烟草高温发酵的产淀粉酶菌株，是亟待解决的问题
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一个目的在于提供一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌，以解决现有技术中烟草源微生物产
α
‑
淀粉酶活性较低且不适合烟草制品的高温发酵的问题
。
[0006]本专利技术的第二个目的在于提供烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选方法，以解决现有技术中烟草源淀粉降解菌的筛选周期长
、
无目的筛选的问题
。
[0007]本专利技术的第三个目的在于提供烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌在提升烟叶品质方面的应用，本专利技术的烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌产的
α
‑
淀粉酶在
70℃
高温下，活性高达
71.63
±
0.05U/mL
，将其应用于烟草制品，检测结果显示烟草制品中淀粉含量下降了
1.03
％，下降幅度超过
20
％；经烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌处理的烟草制品，通过感官评价后，刺激性减轻，烟气柔和，余味干净，烟气质量改善明显
。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术中烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的技术方案是：
[0009]一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌，所述枯草芽胞杆菌为枯草芽胞杆菌
(Bacillus subtilis)FYZ1
‑3，保藏编号为
CCTCC NO
：
M 20221924。
[0010]上述技术方案的有益效果在于：本专利技术由雪茄烟支样品中分离出一株产
α
‑
淀粉酶的烟草淀粉降解菌，经鉴定为枯草芽胞杆菌
(Bacillus subtilis)
，该菌产的
α
‑
淀粉酶在
70℃
高温下，经测定活性可高达
71.63
±
0.05U/mL。
[0011]为了实现上述目的，本专利技术中烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选方法的技术方案是：
[0012]一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选方法，包括以下步骤：
[0013](1)
取样与富集筛选：将待筛选样本置于液体筛选培养基中定向富集培养；
[0014](2)
菌株的初筛：将步骤
(1)
培养的菌液于
80
～
82℃
水浴加热
15
～
20min
后，接种于固体筛选培养基中培养；
[0015](3)
菌株的复筛：根据透明圈直径和菌落直径比值挑选单菌落，测量挑选单菌落发酵上清过滤液
α
‑
淀粉酶活性，得
α
‑
淀粉酶活性最高的复筛菌株
。
[0016]上述技术方案的有益效果在于：本专利技术以
α
‑
淀粉酶活性为评价指标，先使用筛选培养基定向富集培养后，再使用筛选培养基进行初筛
、
复筛两次筛选，定向筛选出烟草源产
α
‑
淀粉酶活性较高的菌种，操作方法简便，从初始即为定向筛选，极大缩短筛选周期
。
[0017]作为进一步地改进，步骤
(1)
中液体筛选培养基包括：烟草淀粉1～
2g/L
，氯化钠5～
6g/L
，酵母粉2～
3g/L。
[0018]上述技术方案的有益效果在于：本专利技术采用碱式提取法从烟叶中提取烟草淀粉，并配制成液体筛选培养基，可以定向
、
精准地优先富集微生物
。
[0019]作为进一步地改进，步骤
(2)
中固体筛选培养基包括：烟草淀粉1～
2g/L
，氯化钠5～
6g/L
，酵母粉2～
3g/L
和琼脂粉
15
～
16g/L。
[0020]上述技术方案的有益效果在于：在液体筛选培养基中添加琼脂粉配制成固体筛选培养基能进一步筛选出目标菌种，且便于操作
。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌，其特征在于：所述枯草芽胞杆菌为枯草芽胞杆菌
(Bacillus subtilis)FYZ1
‑3，保藏编号为
CCTCC NO
：
M 20221924。2.
一种如权利要求1所述的烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)
取样与富集筛选：将待筛选样本置于液体筛选培养基中定向富集培养；
(2)
菌株的初筛：将步骤
(1)
培养的菌液于
80
～
82℃
水浴加热
15
～
20min
后，接种于固体筛选培养基中培养；
(3)
菌株的复筛：根据透明圈直径和菌落直径比值挑选单菌落，测量挑选单菌落发酵上清过滤液
α
‑
淀粉酶活性，得
α
‑
淀粉酶活性最高的复筛菌株
。3.
根据权利要求2所述的烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选方法，其特征在于：步骤
(1)
中液体筛选培养基包括：烟草淀粉1～
2g/L
，氯化钠5～
6g/L
，酵母粉2～
3g/L。4.
根据权利要求2所述的烟草源产
α
‑
淀粉酶的枯草芽胞杆菌的筛选...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘丹丹，李栋，郝捷，叶长文，李力群，马铭赛，黄阔，孙志康，吴娜，杨国涛，李青常，范黎，
申请(专利权)人：内蒙古昆明卷烟有限责任公司，
类型：发明
国别省市：