一种稳定的胸腺素β4滴眼液制剂配方组成比例

本发明专利技术涉及一种药物组合物、包含其的滴眼液，以及滴眼液在制备用于预防和/治疗受试者的眼部疾病和/或症状的药物中的用途。本发明专利技术还涉及组合物在提升人胸腺素β4稳定性中的用途。途。

【技术实现步骤摘要】
一种稳定的胸腺素
β
4滴眼液制剂配方


[0001]本专利技术涉及一种药物组合物、包含其的滴眼液，以及滴眼液在制备用于预防和/治疗受试者的眼部疾病和/或症状的药物中的用途。本专利技术还涉及组合物在提升人胸腺素β4稳定性中的用途。

技术介绍

[0002]1981年，Low和Goldstein从胸腺提取物中首次分离并表征了胸腺素β4，天然人胸腺素β4是一种含有43个氨基酸的小分子蛋白，是一种天然存在的肌动蛋白螯合抗炎因子，可修复和再生受损组织的蛋白质，通过减少细胞死亡、增加干细胞迁移和减少瘢痕形成而发挥作用。胸腺素β4修复和再生各种组织，包括创伤或缺血损伤后的皮肤、眼睛、心脏和大脑。早期临床试验表明胸腺素β4在眼部疾病中使用是安全、耐受性好，且具有一定的有效性。
[0003]角膜上皮的及时表面重建、角膜基质的重塑，以及角膜细胞结构对恢复角膜功能和防止视力丧失至关重要。角膜创伤修复过程与复杂的炎症反应密切相关，受伤后角膜中失调的炎症反应会导致病理过程，从而永久损害视力。在最初的一项大鼠清创术模型研究中表明，局部的胸腺素β4使该模型的上皮化和炎症介质调节增加，达到角膜伤口愈合的效果。在体内碱性眼损伤模型中，胸腺素β4减少了浸润角膜的炎性细胞和介质的数量和局部肿胀，并促进上皮化。体外培养角膜上皮细胞的研究则进一步证实了胸腺素β4在减少炎症介质中的作用，明确其在调节因子(如NF
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κB)控制炎症反应中的作用。与对照组相比，给予胸腺素β4组的眼部伤口闭合间隙粘附性更强，更粘附于底层基质，这种增加的细胞粘附性可能是由于胸腺素β4介导的层粘连蛋白
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5蛋白合成增加，对防止感染和保持组织完整性以及减少液体损失非常重要(Thymosinβ4:a multi
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functional regenerative peptide.Basic properties and clinical applications.Expert Opinion on Biological Therapy,2012.)。另有研究表明，胸腺素β4独立于其G
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肌动蛋白结合特性，直接靶向于NF
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κB RelA/p65亚基，其过表达干扰了TNF
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a介导的NF
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κB活化以及下游IL
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8基因转录。以上科学研究与发现，为胸腺素β4作为一种角膜伤口愈合和眼部抗炎治疗药物提供了强有力的基础(Thymosin beta 4and the eye:the journey from bench to bedside.Expert Opinion on Biological Therapy,2018,18(sup1):99
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104.)。
[0004]干眼症(DES)是一种常见疾病，其病因复杂，包括年龄(65岁以上)、女性、药物和某些医疗条件，如类风湿关节炎、糖尿病、甲状腺问题、狼疮、眼睑炎等，以及用眼的环境条件。有研究报告提及胸腺素β4在小鼠干眼模型中，胸腺素β4滴眼液在统计学上显著降低了角膜荧光素染色，使其恢复到接近基线水平(Thymosinβ4:a potential novel dry eye therapy.Annals of the New York Academy of Sciences,2012,1270(1):45
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50.)。
[0005]胸腺素β4在干眼症和神经营养性角膜炎的治疗方面已进入了临床试验研究。在开发新的、安全有效的促进角膜损伤、化学暴露和干眼症后修复的药物方面，胸腺素β4的已知生物学特性使其成为治疗眼表疾病的候选药物。
[0006]治疗眼表疾病的主要剂型以滴眼液为主，胸腺素β4为分子量较小的蛋白。通常，液体状态的蛋白制品即便在室温或冷藏条件下，稳定性也较低，因此需要研究胸腺素β4滴眼液稳定的配方组成，以达到药品开发的目的。并且，由于基因工程重组蛋白的分子结构和生产工艺较为复杂，因此异质性普遍存在，如氧化型、脱酰胺型、二硫键错配、二硫键断裂、赖氨酸残基糖化异构体等，以上均可能影响到重组蛋白的质量和稳定性。
[0007]因此，需要开发一种胸腺素β4滴眼液配方，其辅料组成简单，不含潜在刺激性成分，重要的是可有效地保持活性物质的稳定性。

技术实现思路

[0008]本申请的专利技术人经过大量的研究，出乎意料的发现了特别适用于提升人胸腺素β4稳定性的滴眼液配方。具体来说，本专利技术的滴眼液配方与单独的人胸腺素β4相比，稳定性提升了110％。不仅如此，本专利技术的滴眼液配方还与眼部的生理环境相同，提升了用药安全性的舒适性。在此基础上，本专利技术的滴眼液配方又添加了增黏剂，在不影响稳定性和安全性的情况下增强了滴眼液的用药顺应性。
[0009]因此，在第一方面，本申请提供了一种药物组合物，其包含：人胸腺素β4，EDTA二钠和氯化钠。
[0010]任选地，所述药物组合还包含磷酸盐缓冲液。
[0011]在某些实施方案中，EDTA二钠作为螯合剂，可避免因微量金属离子催化加速的滴眼剂氧化降解反应，将药液中微量金属离子螯合。
[0012]在某些实施方案中，磷酸盐缓冲液作为缓冲组分调控溶液的pH，通过影响蛋白质的表面电荷类型、密度和分布来左右蛋白质的稳定性。在某些实施方案中，磷酸盐缓冲液不仅确保蛋白的稳定，还适宜于眼部生理耐受范围。
[0013]在某些实施方案中，氯化钠作为渗透压调节剂和保护剂，使处方溶液渗透压保持在292～312mOsmal/L，并起到稳定蛋白的作用。
[0014]在某些实施方案中，所述药物组合物还包含增黏剂。
[0015]在某些实施方案中，所述增黏剂选自聚乙烯醇和/或羟丙甲纤维素。
[0016]在某些实施方案中，所述增黏剂为聚乙烯醇。
[0017]在某些实施方案中，所述药物组合物包含胸腺素β4，EDTA二钠，氯化钠，磷酸盐缓冲液和聚乙烯醇。
[0018]在某些实施方案中，所述药物组合物包含0.001mM至10mM(例如，0.005mM至9.5mM，0.010mM至8.5mM，0.014mM至7.5mM，0.014mM至6.5mM，0.014mM至5.4mM，0.02mM至5mM，0.05mM至4mM，0.1mM至3mM)的EDTA二钠。
[0019]在某些实施方案中，所述药物组合物包含0.014mM至5.4mM的EDTA二钠。
[0020]在某些实施方案中，所述药物组合物包含0.014mM，0.027mM，0.27mM，2.7mM或5.4mM的EDTA二钠。
[0021]在某些实施方案中，所述药物组合物包含5mM至20mM(例如，5mM至20mM，6mM至18mM，7mM至16mM，7.5mM至15mM，7mM至13mM，8mM至12mM，9mM至11mM)的磷酸盐缓冲液。
[0022]在某些实施方案中，所述药物组合物包含7.5mM，10mM或15mM的磷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种药物组合物，其包含：胸腺素β4，EDTA二钠和氯化钠；任选地，所述药物组合还包含磷酸盐缓冲液。2.权利要求1所述的药物组合物，所述药物组合物还包含增黏剂；优选地，所述增黏剂选自聚乙烯醇和/或羟丙甲纤维素；优选地，所述增黏剂为聚乙烯醇；优选地，所述药物组合物包含胸腺素β4，EDTA二钠，氯化钠，磷酸盐缓冲液和聚乙烯醇。3.权利要求1或2的药物组合物，所述药物组合物具有选自下列的一项或多项特征：(1)所述药物组合物包含0.001mM至10mM(例如，0.005mM至9.5mM，0.010mM至8.5mM，0.014mM至7.5mM，0.014mM至6.5mM，0.014mM至5.4mM，0.02mM至5mM，0.05mM至4mM，0.1mM至3mM)的EDTA二钠；优选地，所述药物组合物包含0.014mM至5.4mM的EDTA二钠；优选地，所述药物组合物包含0.014mM，0.027mM，0.27mM，2.7mM或5.4mM的EDTA二钠；(2)所述药物组合物包含5mM至20mM(例如，5mM至20mM，6mM至18mM，7mM至16mM，7.5mM至15mM，7mM至13mM，8mM至12mM，9mM至11mM)的磷酸盐缓冲液；优选地，所述药物组合物包含7.5mM，10mM或15mM的磷酸盐缓冲液；(3)所述氯化钠的浓度为0.5％至1.5％(例如，0.7％至1.2％，0.8％至1.0％，0.7％至0.9％)；优选地，所述氯化钠的浓度为0.7％，0.8％或0.9％。(4)所述聚乙烯醇的浓度为0.5％至2.5％，例如，0.8％至2.2％，1％至2％，1％至1.8％；优选地，所述聚乙烯醇的浓度为1％至1.8％。4.权利要求1
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3任一项的药物组合物，其中，所述胸腺素β4是人胸腺素β4；优选地，所述人胸腺素β4是天然的人胸腺素β4，重组的人胸腺素β4或经改造的人胸腺素β4；优选地，所述胸腺素β4具有如SEQ ID NO:1
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3任一项所示的序列；优选地，所述药物组合物包含0.1mg/ml至100mg/ml(例如，0.1mg/ml至0.5mg/ml，0.5mg/ml至1mg/ml，1mg/ml至10mg/ml，10mg/ml至50mg/ml，50mg/ml至100mg/ml)的人胸腺素β4。5.组合物在提升胸腺素β4稳定性中的用途，其中，所述组合物包括EDTA二钠，磷酸盐缓冲液和氯化钠；优选地，所述组合物用于提升滴眼液中的胸腺素β4的稳定性；优选地，所述胸腺素β4以液体的形式存在于所述滴眼液中；优选地，所述组合物还包含增黏剂；优选地，所述增黏剂选自聚乙烯醇和/或羟丙甲纤维素；优选地，所述增黏剂为聚乙烯醇；优选地，所述组合物包含EDTA二钠，氯化钠，磷酸盐缓冲液和聚乙烯醇。6.权利要求5所述的用途，其中，所述组合物具有选自下列的一项或多项特征：(1)所述组合物包含0.001mM至10mM(例如，0.005mM至9.5mM，0.010mM至8.5mM，0.014mM至7.5mM，0.014mM至6.5mM，0.014mM至5.4mM，0.02mM至5mM，0.05mM至4mM，0.1mM至3mM)的
EDT...

【专利技术属性】
技术研发人员：王艺诺，张波，马杉姗，汤晓闯，韩成权，马素永，聂李亚，许松山，
申请(专利权)人：北京诺思兰德生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：